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miR-155抑制AngⅡ誘導(dǎo)的主動脈血管平滑肌細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換

發(fā)布時間:2018-02-13 13:07

  本文關(guān)鍵詞: miR- 血管緊張素Ⅱ 血管平滑肌細(xì)胞 細(xì)胞周期 出處:《南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版)》2017年03期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的:觀察轉(zhuǎn)染miR-155后對血管緊張素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)誘導(dǎo)小鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換的影響并探討其機(jī)制。方法:原代培養(yǎng)小鼠VSMC,用1×10-6 mol/L AngⅡ作用于VSMC48 h后,采用實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,q-RT-PCR)檢測空白對照組及AngⅡ組miR-155表達(dá)水平。用q-RTPCR及Western blot檢測分別轉(zhuǎn)染miR-155及陰性對照后各組AngⅡ1型受體(angiotensinⅡtype 1 receptor,AT1R)的m RNA及蛋白表達(dá)水平;用Western blot檢測轉(zhuǎn)染miR-155 mimic及陰性對照后對AT1R下游細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)、核糖體蛋白S6激酶(P70S6K1)通路的影響。分別檢測轉(zhuǎn)染miR-155 mimic及使用血管緊張素受體阻滯劑纈沙坦、m TOR通路抑制劑雷帕霉素、ERK1/2抑制劑U0126對細(xì)胞周期素D1(Cyclin D1)的表達(dá)影響,并使用流式細(xì)胞分析檢測細(xì)胞周期變化,探討miR-155對細(xì)胞周期的影響及其機(jī)制。結(jié)果:AngⅡ可顯著降低miR-155的表達(dá)。miR-155可從m RNA及蛋白水平抑制AT1R表達(dá),并抑制AngⅡ促AT1R表達(dá)的作用。轉(zhuǎn)染miR-155 mimic后可顯著抑制AngⅡ促進(jìn)ERK1/2、P70S6K1通路激活的作用。轉(zhuǎn)染miR-155 mimic、使用纈沙坦、雷帕霉素、U0126抑制AngⅡ促Cyclin D1表達(dá)的作用,并使細(xì)胞周期阻滯在G0/G1期。結(jié)論:miR-155可通過抑制AT1R間接抑制AngⅡ促進(jìn)ERK1/2、P70S6K1通路激活及Cyclin D1表達(dá)的作用,抑制AngⅡ促進(jìn)細(xì)胞周期轉(zhuǎn)換的作用。
[Abstract]:Objective: to observe the effect of miR-155 transfection on the cell cycle transition induced by angiotensin 鈪,

本文編號:1508232

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