本文關(guān)鍵詞： 心房顫動(dòng) 自主神經(jīng)重構(gòu) 瑞舒伐他汀鈣 心房 房間隔　出處：《山東大學(xué)》2016年博士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景心房顫動(dòng)(簡(jiǎn)稱(chēng)房顫,atrial fibrillation, AF)是由于心房無(wú)序的顫動(dòng)造成的嚴(yán)重的心房電活動(dòng)紊亂,是目前臨床工作中最常見(jiàn)的心律失常之一。房顫使得心房失去了有效的收縮與舒張,加之房室結(jié)對(duì)快速心房激動(dòng)的遞減傳導(dǎo)引起的紊亂的心室率導(dǎo)致患者常出現(xiàn)胸悶、心悸等臨床癥狀。房顫患者的主要病理生理特點(diǎn)為心室律(率)紊亂、心功能受損和心房附壁血栓形成,而栓塞、心力衰竭等并發(fā)癥導(dǎo)致房顫患者的致殘率和致死率大大增加,醫(yī)療花費(fèi)也大大增加。迄今為止,房顫治療效果依然不盡人意。藥物治療是房顫治療的基石,射頻消融術(shù)近年來(lái)隨著其技術(shù)水平的提高,消融成功率也逐漸增高。然而,房顫治療的長(zhǎng)期有效性卻由于傳統(tǒng)抗心律失常藥物的潛在副作用和射頻消融術(shù)的高復(fù)發(fā)率特別是長(zhǎng)期復(fù)發(fā)率偏高而備受限制,這與房顫發(fā)生的確切機(jī)制尚未完全闡明密切相關(guān),也大大增加了房顫治療的難度。房顫的發(fā)生機(jī)制十分復(fù)雜,房顫可導(dǎo)致心房電學(xué)和組織學(xué)特性發(fā)生改變,形成心房重構(gòu),包括早期的電重構(gòu)和較晚期的結(jié)構(gòu)重構(gòu),兩者隨著房顫進(jìn)程而進(jìn)展,互相影響又相互促進(jìn)。近年研究表明,心臟自主神經(jīng)系統(tǒng)(autonomic nervous system, ANS)是房顫的發(fā)生與維持中的重要環(huán)節(jié),ANS包括外在ANS與內(nèi)在ANS。越來(lái)越多的研究顯示,心臟內(nèi)在ANS的神經(jīng)元及其神經(jīng)纖維的過(guò)度再生及不均一分布即心臟內(nèi)在自主神經(jīng)重構(gòu)(autonomic neural remodeling, ANR),參與了房顫的發(fā)生與維持,是房顫的重要發(fā)病機(jī)制。而且神經(jīng)重構(gòu)常常與電重構(gòu)及結(jié)構(gòu)重構(gòu)并存,彼此相互促進(jìn),形成惡性循環(huán),導(dǎo)致AF的發(fā)生并持續(xù)下去。房顫發(fā)生后,心房的自主神經(jīng)重構(gòu)隨即產(chǎn)生。研究表明,包括交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)重構(gòu)在內(nèi)的自主神經(jīng)重構(gòu)在房顫維持和易損基質(zhì)的形成過(guò)程中起著重要作用。而對(duì)于房顫發(fā)生后心房自主神經(jīng)重構(gòu)的部位而言,目前關(guān)于房顫后心房神經(jīng)重構(gòu)的研究大多集中在左右心房的神經(jīng)重構(gòu),而很少涉及房間隔。由于房間隔的兩側(cè)面為心內(nèi)膜,中間又夾有結(jié)締組織及肌束,其中位于房間隔下部右心房面的卵圓窩處主要由結(jié)締組織構(gòu)成,因此房間隔是極度不均一的特殊組織結(jié)構(gòu),其在房顫的發(fā)生中是否發(fā)生了神經(jīng)重構(gòu),其與心房其他部位的神經(jīng)重構(gòu)程度是否存在差異性以及其在房顫發(fā)生中所起的作用尚不明確。他汀類(lèi)藥物作為目前廣泛應(yīng)用的調(diào)脂藥物,具有抗炎、改善內(nèi)皮功能、減輕心肌缺血再灌注損傷等多種不同作用,而近期他汀類(lèi)藥物對(duì)心律失常的防治作用已成為研究的熱點(diǎn),特別是其對(duì)房顫等房性心律失常的防治作用受到廣泛關(guān)注,近期研究結(jié)果表明他汀類(lèi)藥物對(duì)心臟外科圍手術(shù)期房顫具有顯著的預(yù)防作用,但其作用機(jī)制仍不明確。他汀類(lèi)藥物是否能夠改善或者逆轉(zhuǎn)房顫的自主神經(jīng)重構(gòu),這種改善或逆轉(zhuǎn)的程度是否存在心房不同部位的差異性,以及其對(duì)房顫發(fā)生的抑制作用如何,目前尚無(wú)報(bào)道。據(jù)此,本研究應(yīng)用心房快速起搏兔制作房顫模型,觀察房顫兔模型心房各部位自主神經(jīng)重構(gòu)的特點(diǎn)及有無(wú)差異性,同時(shí)應(yīng)用瑞舒伐他汀進(jìn)行藥物干預(yù),觀察他汀類(lèi)藥物對(duì)于房顫兔模型中心房各不同部位的自主神經(jīng)重構(gòu)的影響,并探討其在房顫中的作用機(jī)制及療效,為房顫治療提供新的干預(yù)靶點(diǎn),也為臨床上他汀類(lèi)藥物防治房顫提供新的依據(jù)。研究目的本研究應(yīng)用心房快速起搏兔制作房顫模型,觀察房顫兔模型心房各部位自主神經(jīng)重構(gòu)、心房不同部位的自主神經(jīng)重構(gòu)有無(wú)差異性與房顫誘發(fā)率的變化以及瑞舒伐他汀鈣對(duì)心房各部位自主神經(jīng)重構(gòu)的影響,試圖探討瑞舒伐他汀鈣對(duì)房顫治療的可能機(jī)制,為房顫治療提供新的干預(yù)靶點(diǎn)。研究方法1.房顫兔模型的制作及實(shí)驗(yàn)分組1.1實(shí)驗(yàn)分組將健康新西蘭大白兔30只隨機(jī)分為對(duì)照組(C,n=10)、快速起搏組(P,n=10)、瑞舒伐他汀鈣干預(yù)組(R,n=10)共三組。(1)對(duì)照組(C組)植入起搏器但不打開(kāi)起搏器開(kāi)關(guān),喂養(yǎng)2周。(2)快速起搏組(P組)植入動(dòng)物起搏器以600次／分快速起搏2周。(3)瑞舒伐他汀鈣干預(yù)組(R組)以同樣的方法起搏兩周,同時(shí)術(shù)后給予瑞舒伐他汀鈣(5mg/kg/d)灌胃2周,其余兩組以安慰劑生理鹽水灌胃2周。1.2房顫兔模型制作利用快速右心房起搏的方法制備房顫兔的動(dòng)物模型。新西蘭大白兔以3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)耳緣靜脈麻醉后,頸部切開(kāi)皮膚找到頸靜脈,從頸靜脈植入動(dòng)物起搏器,起搏器電極經(jīng)心內(nèi)電生理儀標(biāo)測(cè)至高位右房,在X線(xiàn)透視下固定電極,然后分離頸部皮膚制作囊袋,將起搏器放入囊袋中,慶大霉素沖洗囊袋,縫合皮膚,整個(gè)過(guò)程遵循無(wú)菌操作,術(shù)后青霉素抗感染3天。2.術(shù)前、術(shù)后心內(nèi)電生理指標(biāo)的測(cè)定術(shù)前經(jīng)頸靜脈植入標(biāo)測(cè)電極,連接電生理儀,以S1S1 200ms, S1S2起始周長(zhǎng)150ms,步長(zhǎng)為-5ms,電壓4V,測(cè)定心房的有效不應(yīng)期(AERP)并以S1S1刺激觀察房顫誘發(fā)率,術(shù)后2周再次測(cè)定AERP和房顫誘發(fā)率。術(shù)中應(yīng)用多導(dǎo)電生理儀LEAD-7000持續(xù)進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ?qū)?lián)心電監(jiān)測(cè)和血壓監(jiān)測(cè)。3.心電圖檢測(cè)術(shù)前所有動(dòng)物均應(yīng)用心臟電生理儀檢測(cè)心電圖,術(shù)后每天進(jìn)行體表心電圖檢查以確定有無(wú)房顫發(fā)生(檢查時(shí)關(guān)閉起搏器開(kāi)關(guān)),房顫發(fā)生以心電圖出現(xiàn)至少持續(xù)30s以上的頻率快、形態(tài)多變不規(guī)則的房顫波形為標(biāo)準(zhǔn)。4.免疫印記(Western-blot)測(cè)定由于膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(choline acetyl transferase, CHAT)代表心臟中膽堿能神經(jīng)的分布及其活性；絡(luò)氨酸羥化酶(TH)陽(yáng)性可代表心臟中交感神經(jīng)的分布情況。2周后取左右心房及房間隔組織并以酪氨酸羥化酶(TH)及乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶(CHAT)分別標(biāo)記交感與副交感神經(jīng),應(yīng)用Western-bot檢測(cè)各組心肌組織標(biāo)本中CHAT、TH蛋白表達(dá)情況,即獲得心臟中膽堿能神經(jīng)和交感神經(jīng)的含量,從而明確各組動(dòng)物心臟自主神經(jīng)分布及含量。5.免疫組化測(cè)定通過(guò)免疫組化方法和Western-blotting對(duì)CHAT、TH陽(yáng)性神經(jīng)進(jìn)行染色。測(cè)定交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)形態(tài)、密度及分布,并使用計(jì)算機(jī)輔助形態(tài)計(jì)量分析系統(tǒng)(Image-Pro Plus 6.0)在高倍鏡下進(jìn)行神經(jīng)密度分析和測(cè)量。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：應(yīng)用SPSS17.0軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)資料進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料以x±s表示,多組間比較采用單因素方差分析,組間比較采用LSD檢驗(yàn),多組間多部位比較采用重復(fù)測(cè)量設(shè)計(jì)的方差分析,各組間房顫誘發(fā)率的比較采用卡方檢驗(yàn),檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,P值為雙側(cè),P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.心內(nèi)電生理指標(biāo)的測(cè)定結(jié)果起搏兩周后,與C組比較,P組AERP縮短,且P組的房顫房顫誘發(fā)率顯著增加(P0.05),而R組AERP與房顫誘發(fā)率較C組比較無(wú)明顯差異(P0.05),但較P組AERP延長(zhǎng),房顫誘發(fā)率下降(P0.05)。2.心電圖檢測(cè)結(jié)果應(yīng)用多導(dǎo)電生理儀進(jìn)行房顫誘發(fā)率檢測(cè)及每日復(fù)查體表心電圖發(fā)現(xiàn),C組無(wú)自發(fā)性房顫或其他房性心律失常發(fā)生,P組所有接受右心房快速起搏兔中共有8只出現(xiàn)房顫,成功建立房顫模型。而R組經(jīng)過(guò)2周瑞舒伐他汀鈣干預(yù)后,僅1只兔子發(fā)生房顫(P0.01)。3.免疫印記(Western-blot)測(cè)定結(jié)果蛋白質(zhì)印跡法(Western blotting)顯示,與C組相比,P組左右心房和房間隔的TH和CHAT蛋白表達(dá)量均明顯增加(P0.05),在起搏兩周后P組左房、房間隔和右心房的TH和CHAT蛋白表達(dá)量均較C組升高2-4倍(P0.05)。而R組經(jīng)過(guò)兩周的瑞舒伐他汀鈣藥物干預(yù)后,左房、房間隔和右房的交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)的蛋白表達(dá)量雖仍高于C組,但較P組明顯下降(P0.05)。4.免疫組化測(cè)定結(jié)果免疫組化染色顯示C組左心房、房間隔和右心房組織中TH與CHAT陽(yáng)性的神經(jīng)纖維密度無(wú)明顯差異,但房間隔神經(jīng)分布的不均一程度最大(P0.05)；P組中左右心房和房間隔的TH與CHAT陽(yáng)性神經(jīng)纖維密度均顯著高于C組,神經(jīng)分布不均一程度顯著增加(P0.05),其中右心房房間隔左心房；而R組中TH和CHAT陽(yáng)性神經(jīng)纖維密度雖仍高于C組,但與P組相比則明顯下降,神經(jīng)分布不均一程度也降低(P0.05),其中右心房和房間隔的神經(jīng)密度下降更明顯,大于左心房(P0.05)。結(jié)論持續(xù)性快速右心房起搏可致兔心房不同部位出現(xiàn)非均一性神經(jīng)重構(gòu)并可能介導(dǎo)房顫的發(fā)生,瑞舒伐他汀鈣具有逆轉(zhuǎn)這種非均一性神經(jīng)重構(gòu)并抑制房顫發(fā)生的作用,推測(cè)瑞舒伐他汀鈣抑制房顫可能與其逆轉(zhuǎn)心房自主神經(jīng)重構(gòu)有關(guān)。
[Abstract]:Atrial fibrillation ( AF ) is one of the most common arrhythmias in patients with atrial fibrillation due to atrial fibrillation . In this study , the effect of atorvastatin on the remodeling of atrial fibrillation ( AF ) in different parts of atrial fibrillation rabbits was investigated . A new model of atrial fibrillation ( AF ) was prepared by using the method of cardiac electrophysiology . The results showed that the cardiac autonomic nervous system was measured by immunohistochemistry and Western - blotting . Results 1 . Compared with group C , the expression of TH and CHAT were significantly higher in group C than in group C ( P0.05 ) .

【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R541.75

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7 賴(lài)斌;煙草中焦油與尼古丁對(duì)血栓調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)和血栓調(diào)節(jié)蛋白與凝血酶相互作用的影響及瑞舒伐他汀的干預(yù)[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

8 馬麗蘋(píng);瑞舒伐他汀聯(lián)合普羅布考對(duì)老年期腦梗死療效及相關(guān)因素影響的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2015年

9 萬(wàn)國(guó)楨;同型半胱氨酸與動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的相關(guān)性探討[D];蘭州大學(xué);2015年

10 王漢杰;瑞舒伐他汀對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠體內(nèi)脂聯(lián)素水平影響的研究[D];鄭州大學(xué);2015年

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本文編號(hào)：1503974