本文關鍵詞：運動預適應對力竭大鼠心肌TNF-α介導的凋亡通路的影響　出處：《河北大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

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【摘要】：目的:力竭運動可致心肌損傷,嚴重者發(fā)生猝死,這類事件并不少見,是運動醫(yī)學、軍事醫(yī)學及臨床醫(yī)學面臨的共同課題。以往研究多集中在對力竭后心肌損傷的藥物治療,仍缺乏有效的預防措施。目前已公認缺血預適應(ischemic preconditioning,IP)可通過反復多次短暫缺血使心臟在隨后持續(xù)的缺血損傷中得到保護,使人們從對細胞直接保護研究轉向對內(nèi)源性保護機制研究。運動預適應(exercise preconditioning,EP)作為IP的一種特殊形式,即通過運動誘導機體的自身保護,從而提高心肌耐受缺血缺氧的能力。最近研究表明心肌細胞凋亡是力竭后心肌損傷的細胞生物學基礎,力竭運動使Bax/Bcl-2比值增高,促進Fas蛋白表達,決定心肌細胞進入細胞凋亡的執(zhí)行期,繼而由TNF-α、NF-KB、Fas-L等引發(fā)一系列復雜的細胞信號傳導途徑最終導致細胞凋亡,其中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)相關凋亡信號通路發(fā)揮重要作用。EP具有心肌保護作用,但EP是否通過抑制心肌細胞凋亡從而發(fā)揮保護作用及其在心肌細胞凋亡時對細胞內(nèi)信號傳導通路的影響尚不清楚。本研究擬在建立大鼠EP和力竭運動損傷模型的基礎上,從細胞凋亡角度研究EP對心肌TNF-α和Caspase蛋白酶表達的影響,探討EP心肌保護效應是否通過影響TNF-α介導的凋亡通路發(fā)揮作用,進一步了解EP對心肌的保護作用的分子機制,同時為運動預適應對力竭后心肌損傷的防治提供新的實驗依據(jù)。方法:1.雄性SD大鼠48只,隨機分成4組:安靜對照組、力竭運動組、短期運動預適應組、長期運動預適應組(n=12)。除安靜對照組,其余各組以尾部負重大鼠3%體重的方式進行游泳訓練。安靜對照組:常規(guī)飼養(yǎng)3天,不游泳;力竭運動組:參照Thomas力竭標準,常規(guī)飼養(yǎng)3天后進行一次游泳運動,直至力竭。短期運動預適應組:標準參照Lennon方法建立,每天進行間歇性游泳運動1次,每次1小時,要求游泳15分鐘,休息5分鐘,重復3次,持續(xù)3天,然后與力竭組進行一次力竭游泳運動;長期運動預適應組:參照Margonato方法建立,每天進行間歇性游泳運動1次,運動方式同短期,持續(xù)3周(6天/周),然后進行一次力竭游泳運動。安靜對照組直接取材,各組于力竭運動后30分鐘取材。2.取大鼠心肌組織作病理切片,經(jīng)he染色,光鏡下觀察其顯微結構。3.采用elisa方法檢測血清中缺血修飾白蛋白(ima)、肌酸激酶同工酶(ck-mb)、肌鈣蛋白i(ctni)的含量。4.采用dna原位末端標記(tunel)法觀察心肌細胞的凋亡反應。5.采用熒光定量pcr方法檢測大鼠心肌組織中tnf-α、caspase-8、caspase-9、caspase-3基因的表達水平。6.采用westernblot方法檢測大鼠心肌組織中tnf-α、caspase-8、caspase-9、caspase-3蛋白的表達水平。結果:1.大鼠心肌顯微結構安靜對照組心肌結構完整,肌纖維排列整齊、無斷裂,間質無水腫,可見橫紋;力竭組心肌細胞腫脹明顯,可見肌纖維斷裂、排列紊亂,間質纖維增生、水腫;短期、長期運動預適應組偶見肌纖維斷裂,輪廓較清楚,間質水腫較輕,而且長期運動預適應組相比于短期更接近對照組。2.大鼠血清生化指標比較(1)與安靜對照組相比,力竭組、短期運動預適應組和長期運動預適應組血清ima、ck-mb含量均明顯升高,有統(tǒng)計學意義(p0.05),力竭組和短期運動預適應組血清ctni明顯升高,有統(tǒng)計學意義(p0.05),而長期運動預適應組升高不明顯,無統(tǒng)計學差異。(2)與力竭組相比,長期運動預適應組血清ima、ck-mb、ctni含量均明顯下降,有統(tǒng)計學意義(p0.05),短期運動預適應組血清ck-mb、ctni明顯下降,有統(tǒng)計學意義(p0.05),而ima下降不明顯,無統(tǒng)計學差異。3.大鼠心肌細胞凋亡情況經(jīng)tunel染色后正常細胞核呈藍色,凋亡細胞核呈棕色。結果顯示對照組(13.17±3.43%)大鼠心肌組織存在少數(shù)散在的細胞凋亡;力竭組(44.38±6.13%)大鼠心肌組織出現(xiàn)大量細胞凋亡,明顯高于對照組,有統(tǒng)計學意義(p0.05);短期(36.14±3.16%)、長期運動預適應組(25.83±5.12%)與力竭組相比凋亡明顯減少,有統(tǒng)計學意義(p0.05),長期運動預適應組較短期運動預適應組減少更明顯,有統(tǒng)計學意義(p0.05)。4.心肌組織中tnf-α、caspase-8、caspase-9、caspase-3mrna的表達水平(1)與安靜對照組相比,除長期運動預適應組的Caspase-9外,其余各組心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3mRNA表達量均明顯升高,有統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)與力竭組相比,除短期Caspase-3外,短期、長期運動預適應組大鼠心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3mRNA含量明顯降低,有統(tǒng)計學意義(P0.05),長期運動預適應組比短期下降更明顯,有統(tǒng)計學意義(P0.05)。5.心肌組織中TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表達水平(1)與安靜對照組相比,力竭組和短期運動預適應組大鼠心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3蛋白明顯升高,有統(tǒng)計學差異(P0.05),長期運動預適應組升高不明顯,無統(tǒng)計學差異。(2)與力竭組相比,短期運動預適應組大鼠心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3下降不明顯,無統(tǒng)計學意義,而長期運動預適應組明顯下降,有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論:1.力竭運動可致心肌損傷,運動預適應可減輕力竭運動后心肌損傷。2.心肌細胞凋亡參與力竭運動致心肌損傷的機制,力竭運動激活TNF-α介導的細胞凋亡信號通路,上調(diào)Caspase蛋白酶,從而誘導心肌細胞凋亡。3.運動預適應可通過抑制TNF-α介導的凋亡信號通路,減少心肌細胞凋亡,從而發(fā)揮保護心肌作用。4.短期運動預適應與長期運動預適應可不同程度的抑制心肌細胞凋亡,長期運動預適應的作用更強。
【學位授予單位】：河北大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R541.6

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1 Wainwright CL;韓征平;房祥;;預適應:心臟抗缺血的自我保護反應[J];國外醫(yī)學.心血管疾病分冊;1993年04期

2 李政圣;孫宗全;;降鈣素基因相關肽預適應心肌保護作用的實驗研究[J];長江大學學報(自科版);2006年09期

3 王強;聞劍飛;施洪飛;;運動預適應心肌保護作用機制研究綜述[J];合肥師范學院學報;2010年06期

4 余國膺;;人有無預適應?[J];國外醫(yī)學情報;1996年11期

5 鄭斌;熱休克蛋白與晚期預適應[J];醫(yī)學綜述;2000年06期

6 劉宏雁,呂國蔚,王維忠;小鼠腦內(nèi)甘氨酸含量在缺氧預適應中的變化(英文)[J];生理學報;2001年06期

7 馬世玉;預適應對血管內(nèi)皮細胞的保護作用[J];國外醫(yī)學(內(nèi)科學分冊);2002年05期

8 孫星星;楊建棟;張博;李志超;;缺氧預適應小鼠缺氧耐受性、運動耐力及肺功能的改變[J];中國臨床康復;2005年43期

9 馬力;張常喜;謝春毅;;中醫(yī)藥預適應研究進展[J];中西醫(yī)結合心腦血管病雜志;2008年07期

10 呂國蔚;預適應研究的現(xiàn)狀與前景[J];神經(jīng)科學;1996年02期

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1 賈凌云;王憲;;鈣網(wǎng)蛋白參與了人肺Ⅱ型上皮細胞缺氧預適應的保護效應[A];第六屆全國自由基生物學與自由基醫(yī)學學術會議和海峽兩岸自由基生物學與自由基醫(yī)學學術會議論文集[C];2004年

2 范有明;高鈺琪;;低壓缺氧晚期預適應小鼠海馬差異表達基因的篩選及鑒定研究[A];第六次全國缺氧和呼吸病理生理學術會議論文摘要匯編[C];2003年

3 張清俊;先宏;叢建波;李彤;辛益妹;吳可;詹皓;張建中;孫存普;;重復+Gz條件下小鼠機體多臟器NO含量的變化及茶多酚的防護作用[A];第五屆全國自由基生物學與自由基醫(yī)學學術討論會論文摘要匯編[C];2000年

4 馬世玉;向繼洲;吳基良;馬業(yè)新;;內(nèi)源性一氧化氮介導脂質胞壁酸預適應對人冠脈內(nèi)皮細胞再復氧損傷的作用[A];中華醫(yī)學會心血管病分會第八次全國心血管病學術會議匯編[C];2004年

5 黃柏勝;劉發(fā)益;周p，

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