本文關(guān)鍵詞：動(dòng)脈粥樣硬化microRNA表達(dá)譜的研究　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：【目的】篩選出動(dòng)脈粥樣硬化患者與正常對(duì)照者之間差異表達(dá)microRNA(miRNA),為了解miRNA在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的作用及課題組進(jìn)一步研究miRNA靶向調(diào)節(jié)ⅡA型分泌型磷脂酶A2(sPLA2-ⅡA)表達(dá)在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的作用奠定基礎(chǔ)。 【方法】 1、收集廈門大學(xué)附屬第一醫(yī)院心血管內(nèi)科門診與病房確診的冠狀動(dòng)脈粥樣硬化患者3例，健康對(duì)照者3例。所有病例均在胸痛等癥狀發(fā)作后48小時(shí)內(nèi)采集外周血液，分離血清。 2、抽提樣本總RNA，用標(biāo)記酶將Hy3TM或Hy5TM熒光集團(tuán)標(biāo)記質(zhì)檢合格的RNA,采用Exiqon公司的microRNA芯片進(jìn)行檢測，篩選出差異表達(dá)的miRNAs。 3、為了進(jìn)一步驗(yàn)證microRNA芯片結(jié)果的可靠性，我們挑選出11個(gè)具有代表性的差異表達(dá)miRNAs分子：過表達(dá)的hsa-miR-3655、hsa-miR-548ac、hsa-miR-96-5p、 hsa-miR-1、 hsa-miR-107、 hsa-miR-15b-3p、hsa-miR-126-3p，低表達(dá)的hsa-miR-4682、 hsa-miR-610、hsa-miR-504-5p、 hsa-miR-186-3p。采用實(shí)時(shí)定量PCR方法進(jìn)行驗(yàn)證，用hsa-miR-423-5p作為內(nèi)參，所得數(shù)據(jù)采用2-ΔΔCT方法進(jìn)行分析。 【結(jié)果】 1、用microRNA芯片篩選出差異表達(dá)顯著改變(上調(diào)或下調(diào)2倍以上)的miRNAs分子232個(gè)，其中過表達(dá)2倍以上的的miRNAs分子134個(gè)，過表達(dá)5倍以上的miRNAs分子15個(gè)，過表達(dá)10倍以上的miRNAs分子1個(gè)，為hsa-miR-548ac；低表達(dá)2倍以上的miRNAs分子98個(gè)，低表達(dá)5倍以上的miRNAs分子20個(gè)，低表達(dá)10倍以上的miRNAs分子3個(gè)為hsa-miR-3155a、hsa-miR-3158-3p、hsa-miR-371b-5p�？傮w上動(dòng)脈粥樣硬化患者與正常對(duì)照者之間差異性表達(dá)顯著。 2、我們挑選出的11個(gè)具有代表性的差異表達(dá)miRNAs分子，過表達(dá)的hsa-miR-3655、hsa-miR-548ac、hsa-miR-96-5p、 hsa-miR-1、hsa-miR-107、 hsa-miR-15b-3p、 hsa-miR-126-3p，低表達(dá)的hsa-miR-4682、hsa-miR-610、hsa-miR-504-5p、 hsa-miR-186-3p，經(jīng)實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證，結(jié)果與芯片結(jié)果基本吻合。 【結(jié)論】 1、動(dòng)脈粥樣硬化患者與正常對(duì)照者之間miRNAs差異表達(dá)顯著，建立了動(dòng)脈粥樣硬化miRNAs的完整表達(dá)譜。為探討miRNA在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的作用提供有效和準(zhǔn)確的分子學(xué)依據(jù)。 2、通過運(yùn)用microRNA芯片篩選出動(dòng)脈粥樣硬化差異表達(dá)miRNAs，并經(jīng)實(shí)時(shí)定量PCR驗(yàn)證，，結(jié)果與microRNA芯片表達(dá)趨勢一致，說明microRNA芯片結(jié)果真實(shí)可靠，可用于后續(xù)研究。 3、為下一步研究miRNA靶向調(diào)節(jié)sPLA2-ⅡA表達(dá)在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制中的作用奠定了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R543.5

【參考文獻(xiàn)】

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1 陳偉丹;聶宇;李守軍;;循環(huán)miR-19a作為先天性心臟病相關(guān)肺動(dòng)脈高壓的標(biāo)志物[J];中國分子心臟病學(xué)雜志;2010年05期

本文編號(hào)：1310135