本文關(guān)鍵詞：饑餓對(duì)大鼠心肌自噬影響的實(shí)驗(yàn)研究

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【摘要】：目的饑餓是食物供應(yīng)或攝入受到限制而使機(jī)體處于營養(yǎng)物質(zhì)和能量攝入不足或缺乏的狀態(tài)。自噬是在真核細(xì)胞內(nèi)普遍存在的重要生物學(xué)現(xiàn)象,廣泛參與多種生理病理過程,其主要作用之一是降解細(xì)胞自身物質(zhì)并利用降解產(chǎn)物提供能量和重建細(xì)胞結(jié)構(gòu)、維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。本研究擬探討?zhàn)囸I對(duì)大鼠心肌自噬的影響,為整體水平的自噬研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)和參考。方法健康雄性SPF級(jí)SD大鼠105只,3月齡,體重330~370g,采用隨機(jī)數(shù)字表法,分為2組:正常對(duì)照組(C組,n=15)和饑餓模型組(S組,n=90);其中,S組根據(jù)饑餓時(shí)間又隨機(jī)分為六個(gè)亞組(n=15),饑餓1d組(S1亞組)、饑餓2d組(S2亞組)、饑餓3d組(S3亞組)、饑餓5d組(S5亞組)、饑餓7d組(S7亞組)和饑餓9d組(S9亞組)。饑餓期間無飼料供應(yīng),自由攝水。饑餓處理后,采用2%多聚甲醛-2.5%戊二醛磷酸鹽緩沖液固定心肌組織,行透射電鏡觀察超微結(jié)構(gòu);采用4%多聚甲醛磷酸鹽緩沖液固定心肌組織,制作石蠟切片,行蘇木素-伊紅染色觀察心肌組織病理學(xué)改變。采用免疫組織化學(xué)染色與Western blot法檢測(cè)大鼠心肌組織LC3與Beclin 1的表達(dá)水平。結(jié)果1 HE染色觀測(cè)結(jié)果:C組大鼠心肌組織形態(tài)結(jié)構(gòu)正常;與C組比較,S組心肌組織呈不同程度的損傷,隨著饑餓時(shí)間的延長,病理改變加重。2透射電子顯微鏡觀測(cè)結(jié)果:C組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)正常;S組可見線粒體呈不同程度的損傷,隨著饑餓時(shí)間的延長,病理改變加重,可見分隔膜與自噬體結(jié)構(gòu)。3免疫組織化學(xué)染色結(jié)果:與C組比較,S組各亞組大鼠心肌組織LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。S組各亞組間兩兩比較,LC3與Beclin 1表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),且在S1亞組和S2亞組,LC3與Beclin 1表達(dá)持續(xù)增高,于S2亞組達(dá)到峰值后表達(dá)逐漸下降,在S7、S9亞組,LC3與Beclin 1表達(dá)再次升高。4 Western blot檢測(cè)結(jié)果:與C組比較,S組各亞組大鼠心肌組織LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01)。S組各亞組間兩兩比較,LC3與Beclin 1表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05或P0.01),且在S1亞組和S2亞組,LC3與Beclin 1表達(dá)持續(xù)增高,于S2亞組達(dá)到峰值后表達(dá)逐漸下降,在S7、S9亞組,LC3與Beclin 1表達(dá)再次升高。結(jié)論饑餓狀態(tài)下大鼠心肌組織LC3與Beclin 1表達(dá)上調(diào),短期饑餓2天LC3與Beclin 1表達(dá)達(dá)到峰值,自噬增強(qiáng),長期饑餓LC3與Beclin 1表達(dá)再次上調(diào),自噬體數(shù)量增多。
【關(guān)鍵詞】：自噬 饑餓 心肌 LC3 Beclin 1
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R54
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 饑餓對(duì)大鼠心肌自噬影響的實(shí)驗(yàn)研究13-43
• 1.1 材料與方法13-21
• 1.1.1 主要試劑13
• 1.1.2 主要儀器13-14
• 1.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組14-15
• 1.1.4 動(dòng)物模型制備15
• 1.1.5 大鼠一般情況觀察15
• 1.1.6 標(biāo)本包埋、制作切片備用15
• 1.1.7 HE染色15-16
• 1.1.8 透射電子顯微鏡檢測(cè)16
• 1.1.9 免疫組織化學(xué)檢測(cè)16-17
• 1.1.10免疫印跡檢測(cè)17-21
• 1.2 結(jié)果21-32
• 1.2.1 大鼠一般情況觀察結(jié)果21
• 1.2.2 HE染色結(jié)果21-24
• 1.2.3 電子顯微鏡檢測(cè)結(jié)果24-25
• 1.2.4 免疫組化染色結(jié)果25-30
• 1.2.5 各組大鼠心肌LC3和Beclin 1 的western blot檢測(cè)結(jié)果30-32
• 1.3 討論32-40
• 1.3.1 饑餓自噬大鼠動(dòng)物模型的制備32
• 1.3.2 饑餓誘導(dǎo)細(xì)胞自噬32
• 1.3.3 我國心臟疾病的現(xiàn)狀32-33
• 1.3.4 自噬與心臟疾病的關(guān)系密切33-37
• 1.3.5 LC3和Beclin 1 在細(xì)胞自噬中的作用37-38
• 1.3.6 自噬的檢測(cè)方法38-40
• 1.4 小結(jié)40
• 參考文獻(xiàn)40-43
• 第2章 綜述 自噬與心臟疾病43-60
• 2.1 概述43-44
• 2.2 自噬的發(fā)生發(fā)展機(jī)制44-49
• 2.2.1 自噬的起始44-45
• 2.2.2 自噬與能量平衡的維持45-46
• 2.2.3 轉(zhuǎn)錄因子FoxO和NAD依賴脫乙酰酶SIRT1控制的自噬46
• 2.2.4 壓力信號(hào)誘導(dǎo)的自噬46-47
• 2.2.5 心肌細(xì)胞線粒體自噬47-48
• 2.2.6 適應(yīng)不良的心肌自噬48-49
• 2.3 自噬與心臟疾病49-52
• 2.3.1 自噬在心血管疾病中的作用49
• 2.3.2 自噬與心肌疾病49-50
• 2.3.3 自噬與心肌缺血再灌注損傷50-51
• 2.3.4 自噬與心力衰竭51-52
• 參考文獻(xiàn)52-60
• 結(jié)論60-61
• 致謝61-62
• 導(dǎo)師簡介62-63
• 作者簡介63-64
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集64

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 郭長江,韋京豫,楊繼軍,馮宇,葛玉章;不全饑餓狀態(tài)下的營養(yǎng)干預(yù)研究[J];解放軍預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志;1999年05期

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本文編號(hào)：1130847