本文關(guān)鍵詞：AMPK對低氧誘導血管生成作用的研究

  更多相關(guān)文章： AMPK 缺血 血管生成 人臍靜脈內(nèi)皮細胞

【摘要】：目的：建立簡單有效且重復性高的人臍靜脈內(nèi)皮細胞(Human Umbilical VeinEndothelial Cells，HUVECs)體外原代培養(yǎng)及傳代技術(shù)，，并對培養(yǎng)的細胞進行鑒定。探討低氧條件下AMPK對人臍靜脈內(nèi)皮細胞血管生成的影響，為缺血性疾病的治療提供相應(yīng)的理論基礎(chǔ)。 方法：HUVECs的原代分離培養(yǎng)：采用I型膠原酶灌注消化法從臍靜脈分離內(nèi)皮細胞，并用人第Ⅷ因子相關(guān)抗原抗體免疫熒光染色法進行鑒定。通過MTT檢測低氧對細胞活性的影響；采用蛋白免疫印跡法檢測空白對照組與低氧處理組p-AMPK/AMPK蛋白的表達。實驗分為5組：空白組、低氧組(0.2mM CoCl2)、低氧+Compound C(20μM)、低氧+C75(10μM)和正常+VEGF(100ng/ml)組。劃痕試驗檢測人臍靜脈內(nèi)皮細胞遷移能力；小管形成實驗法檢測內(nèi)皮細胞體外血管形成能力。 結(jié)果：第Ⅷ因子相關(guān)抗原抗體免疫熒光檢測：細胞核為藍色，胞質(zhì)內(nèi)有紅色的染色顆粒；而對照組(PBS液)胞質(zhì)內(nèi)無紅色的染色顆粒，呈陰性反應(yīng)。確定低氧模型CoCl2的濃度為0.2mM，建立了較好的低氧實驗模型。低氧處理較正常培養(yǎng)的人臍靜脈細胞其AMPK磷酸化水平有明顯的增高，與正常組相比，低氧組可以誘導內(nèi)皮細胞的遷移和小管形成能力(p0.05)，給予AMPK相關(guān)抑制劑能抑制低氧誘導的遷移和小管形成能力(p0.05)。 結(jié)論：實驗結(jié)果表明，低氧可激活AMPK的磷酸化，促進人臍靜脈內(nèi)皮細胞的遷移和血管生成。
【關(guān)鍵詞】：AMPK 缺血 血管生成 人臍靜脈內(nèi)皮細胞
【學位授予單位】：湖北科技學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R543
【目錄】：

• 縮略詞5-6
• 中文摘要6-7
• Abstract7-8
• 前言8-10
• 材料與方法10-14
• 實驗方法14-20
• 實驗結(jié)果20-25
• 討論25-27
• 結(jié)論27-28
• 參考文獻28-32
• 綜述32-40
• 參考文獻36-40
• 致謝40

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宮克城;丁樹哲;;AMPK與2型糖尿病的關(guān)系及其在運動介導下的研究[J];遼寧體育科技;2009年03期

2 黃德強;羅凌玉;王麗麗;羅時文;呂農(nóng)華;羅志軍;;AMPK在胰島素信號轉(zhuǎn)導通路中的作用[J];中國細胞生物學學報;2011年11期

3 李爽;李燕舞;王蕾;阿拉木斯;林艷;;長期運動訓練對機體血清中AMPK水平的影響[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2012年24期

4 楊子初;廖q伶;;AMPK在轉(zhuǎn)化醫(yī)學研究中的意義與展望[J];中國細胞生物學學報;2013年03期

5 蔡懷秋;張改改;尹新華;;AMPK與心肌缺血-再灌注損傷[J];國際心血管病雜志;2013年01期

6 王艷;黃德強;羅志軍;;AMPK對線粒體功能的調(diào)節(jié)[J];中國細胞生物學學報;2013年10期

7 馬繼政;孫飆;;AMPK調(diào)節(jié)運動中骨骼肌細胞代謝研究進展[J];中國運動醫(yī)學雜志;2010年05期

8 賈振華;劉毅;曹銘鋒;徐靜;完強;王榮;;AMPK在高糖誘導大鼠腎小球系膜細胞Ⅳ型膠原過度表達中的作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2010年11期

9 楊航;王睿思;楊吉春;管又飛;;蛋白激酶AMPK在腎髓間質(zhì)細胞存活中的作用[J];中國病理生理雜志;2010年10期

10 張國華;;低氧運動下AMPK與體脂調(diào)節(jié)相關(guān)激素的研究進展[J];成都體育學院學報;2011年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 ;Co-commitment and Interplay between Akt and AMPK in the Regulation of Endothelial NO Synthase Phosphorylation by Reactive Oxygen Species[A];第九屆全國心血管藥理學術(shù)會議論文集[C];2007年

2 Paul M Vanhoutte;;SIRT1 and AMPK:the Seesaw Effect in Regulating Endothelial Sene-scence[A];第八屆海峽兩岸心血管科學研討會論文集[C];2011年

3 李瑾;朱海波;;新結(jié)構(gòu)類型調(diào)血脂化合物與靶蛋白AMPK分子間相互作用初步解析[A];全國第十二屆生化與分子藥理學學術(shù)會議論文集[C];2011年

4 宋海燕;李強;孫玉倩;張巾超;鄔艷慧;;AMPK結(jié)合蛋白的篩選及其與2型糖尿病的關(guān)系研究[A];2008內(nèi)分泌代謝性疾病系列研討會暨中青年英文論壇論文匯編[C];2008年

5 ;AMPK mediated an apoptotic response to combined effect of hypoxia stress and ER stress[A];2012全國發(fā)育生物學大會摘要集[C];2012年

6 ZHANG Jian-wei;MA Xiao-wei;DENG Rui-fen;DING Shan;GU Nan;GUO Xiao-hui;;Genetic variability in AMPKαl gene may have synergetic effect with smoking on risk of coronary artery disease in chinese type 2 diabetics[A];中華醫(yī)學會糖尿病學分會第十六次全國學術(shù)會議論文集[C];2012年

7 姚遠;周京軍;裴建明;;AMPK介導無鈣預處理心肌保護作用[A];中國生理學會第九屆全國青年生理學工作者學術(shù)會議論文摘要[C];2011年

8 季樂樂;Haifeng Zhang;Feng Gao;;A novel mechanism of preconditioning:Attenuating reperfusion injury through enhanced myocardial glucose uptake via insulin-stimulated Akt and AMPK activation[A];中國生理學會第十屆全國青年生理學工作者學術(shù)會議論文摘要[C];2013年

9 WU Qiao;;The orphan nuclear receptor Nur77 regulates AMPK activity through LKB1 subcellular localization in glucose metabolism[A];細胞—生命的基礎(chǔ)——中國細胞生物學學會2013年全國學術(shù)大會·武漢論文摘要集[C];2013年

10 Jia-Wei Wu;;Conserved elements in allosteric regulation of AMPK[A];中國生物化學與分子生物學會第十一次會員代表大會暨2014年全國學術(shù)會議論文集——專題報告二[C];2014年

中國重要報紙全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 黃敏;精力充沛基因決定?[N];新華每日電訊;2011年

2 實習生 程鳳;不愛鍛煉可能與基因缺失有關(guān)[N];科技日報;2011年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳雷;AMP激活的蛋白質(zhì)激酶（AMPK）調(diào)控機制的研究[D];清華大學;2010年

2 朱莉;電鏡單顆粒技術(shù)研究全長AMPK蛋白的構(gòu)架及變構(gòu)效應(yīng)[D];蘭州大學;2011年

3 符慶瑛;大腸桿菌雙雜交篩選AMPKα2相互作用蛋白[D];第三軍醫(yī)大學;2007年

4 鄧虎平;燙傷大鼠骨骼肌AMPK的活化對蛋白分解的作用及其信號轉(zhuǎn)導機制[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進修學院;2010年

5 余冰;AMPK對應(yīng)激狀態(tài)下仔豬脂質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)作用[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2003年

6 梁俊芳;AMPKα亞基對小鼠骨骼肌生長發(fā)育及宰后糖酵解過程的影響[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2013年

7 鄒豐;黃芪多糖改善2型糖尿病糖代謝及其對AMPK活性的影響[D];武漢大學;2010年

8 李澤;AMPK活性對宰后羊肉能量代謝和肉質(zhì)的影響及其機理研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2010年

9 朱曉靜;AMP激活的蛋白激酶在鹵蟲發(fā)育過程和應(yīng)激條件下的分子特征和功能研究[D];浙江大學;2008年

10 陳曉春;AMPK對產(chǎn)蛋雞膽固醇代謝的調(diào)節(jié)作用[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2006年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張遠遠;AMPK基因在2型糖尿病發(fā)病中的作用[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2011年

2 王璐;AMPK調(diào)節(jié)小鼠耐力變化的機制研究[D];北京體育大學;2012年

3 王艷;AMPK在線粒體中的分布及線粒體中AMPKα1對細胞自噬的影響[D];南昌大學;2014年

4 李曉山;膳食與大鼠肝組織AMPK表達及肥胖的關(guān)系[D];華中科技大學;2008年

5 秦玉輝;蛋雞體內(nèi)AMPK酶活分布及應(yīng)激對AMPK酶活影響研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2003年

6 宋曉彬;AMPK活性對宰后羊肉糖酵解和肉品質(zhì)的影響[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2014年

7 謝旺;AMPK在香煙煙霧提取物誘導的支氣管上皮細胞凋亡中的調(diào)節(jié)作用[D];中南大學;2014年

8 陸地;急性內(nèi)毒素血癥早期大鼠血糖變化與AMPK關(guān)系的研究[D];浙江大學;2009年

9 徐靜;高糖環(huán)境對大鼠腎小球系膜細胞AMPK表達及活性的影響[D];山東大學;2009年

10 賈振華;AMPK在高糖誘導大鼠腎小球系膜細胞Ⅳ型膠原過度表達中的作用[D];山東大學;2010年

本文編號：1090097