本文關(guān)鍵詞：腸道菌群與小細(xì)胞肺癌化療相關(guān)性腹瀉關(guān)系的研究

  更多相關(guān)文章： 小細(xì)胞肺癌 化療相關(guān)性腹瀉 PCR-DGGE 腸道菌群

【摘要】：研究背景:小細(xì)胞肺癌(Small Cell Lung Cancer,SCLC)是一種高侵襲性的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤,它具有發(fā)展迅速、早期出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、對(duì)化療高度敏感,但容易復(fù)發(fā)等特點(diǎn)[1],超過半數(shù)的患者在確診時(shí)處于廣泛期[2-3](Extensive disease,ED)。依據(jù)最新NCCN指南,SCLC的治療仍以全身化療為主[1]�；熛嚓P(guān)性腹瀉(Chemotherapy Induced Diarrhea,CID)是化療常見的并發(fā)癥,輕則會(huì)導(dǎo)致患者的體質(zhì)和生活質(zhì)量的下降,降低患者的依從性,影響化療的療效,增加治療費(fèi)用,嚴(yán)重時(shí),還可引起患者體內(nèi)水、電解質(zhì)紊亂,造成低血容量性休克,進(jìn)而危及生命[4-7]。目前關(guān)于CID的具體發(fā)病機(jī)制仍不清楚,有研究報(bào)道腫瘤CID與腸道菌群的改變有關(guān),探究腸道菌群的改變與SCLC化療相關(guān)性腹瀉的關(guān)系,對(duì)SCLC患者的治療和生存具有深遠(yuǎn)意義。目的:探索小細(xì)胞肺癌化療相關(guān)性腹瀉與腸道菌群變化的關(guān)系,為小細(xì)胞肺癌化療相關(guān)性腹瀉的防治提供新思路。方法:1、樣本收集:采集大連醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院腫瘤科18例經(jīng)病理確診為小細(xì)胞肺癌患者,化療前和化療后出現(xiàn)CID的糞便(其中10例患者經(jīng)EP方案化療,8例經(jīng)IP方案化療),放置于-80℃冰箱冷凍保存。2、樣本DNA提取:分別提取小細(xì)胞肺癌患者化療前和化療后出現(xiàn)CID糞便樣本的腸道微生物基因組DNA。3、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-變性梯度凝膠電泳(PCR-DGGE):以糞便總DNA為模板,細(xì)菌16S r DNA V3區(qū)特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物行1.5%的瓊脂糖凝膠電泳,以檢測目的條帶,進(jìn)一步行DGGE,對(duì)所得DGGE指紋圖譜進(jìn)行分析,對(duì)差異比較明顯的條帶進(jìn)行切膠測序,以分析其種屬類別,探索小細(xì)胞肺癌患者化療前與化療后出現(xiàn)CID的腸道菌群變化。結(jié)果:1、DNA提取情況:18例SCLC患者化療前和化療后出現(xiàn)CID的糞便均可提取出DNA,各DNA樣本濃度高低不同。2、EP方案化療組的腸道菌群特征:由聚類分析和PCA主成分分析圖可以看出,化療前組與化療后組形成了兩個(gè)聚類群,差異顯著。與化療前組相比,化療后組腸道細(xì)菌豐度增加(P0.05);多樣性指數(shù)升高(P0.05),差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)化療后亮度明顯增高的1、2、3條帶進(jìn)行切膠測序,結(jié)果顯示,條帶1、2可能為普氏糞桿菌(Faecalibacterium prausnitzii),同源性分別為85%和93%;條帶3為肺炎克雷伯菌(Klebsiella quasipneumoniae),同源性為99%。3、IP方案化療組的腸道菌群特征:由聚類分析和PCA主成分分析圖可以看出,化療前組與化療后組形成了兩個(gè)聚類群,差異顯著。與化療前組相比,化療后組腸道細(xì)菌豐度降低(P0.05),差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;多樣性指數(shù)降低(P0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)化療后亮度明顯降低的4、5條帶進(jìn)行切膠測序,結(jié)果顯示,條帶4可能為桿菌屬(Prevotella stercorea),同源性為94%;條帶5可能為Uncultured bacterium,同源性為81%。結(jié)論:1、EP方案所致的小細(xì)胞肺癌CID化療前后的腸道菌群差異不顯著。2、IP方案所致的小細(xì)胞肺癌CID患者腸道菌群的多樣性比化療前降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。3、EP方案化療后患者的腸道可能更易于肺炎克雷伯菌的定植生長,腸道內(nèi)肺炎克雷伯菌的數(shù)量增加可能與EP方案導(dǎo)致的CID有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：小細(xì)胞肺癌 化療相關(guān)性腹瀉 PCR-DGGE 腸道菌群
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R734.2;R574.62
【目錄】：

• 中文摘要7-9
• 英文摘要9-12
• 前言12-14
• 材料和方法14-20
• 1. 材料14-16
• 1.1 實(shí)驗(yàn)樣本收集14
• 1.2 實(shí)驗(yàn)試劑14-15
• 1.3 實(shí)驗(yàn)儀器15-16
• 1.4 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)分析軟件16
• 2. 方法16-20
• 2.1 糞便樣本DNA提取及濃度檢測16-17
• 2.2 PCR-DGGE分析17-19
• 2.3 統(tǒng)計(jì)分析19-20
• 結(jié)果20-29
• 1. DNA樣本提取情況20-21
• 2. 樣本DNA PCR擴(kuò)增情況21
• 3. A組樣本化療前與化療后出現(xiàn)CID的腸道菌群變化21-25
• 3.1 A組樣本化療前后腸道菌群DGGE分析21-25
• 3.2 切膠測序25
• 4. B組樣本化療前與化療后出現(xiàn)CID的腸道菌群變化25-29
• 4.1 B組樣本化療前后腸道菌群DGGE分析25-28
• 4.2 切膠測序28-29
• 討論29-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-34
• 綜述 伊立替康化療相關(guān)性腹瀉的研究進(jìn)展34-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 致謝42-43

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 馬麗霞;陳艷;楊長良;姜慧;朱晶;程穎;;尿苷二磷酸葡醛酰轉(zhuǎn)移酶1A1基因多態(tài)性與伊立替康治療廣泛期小細(xì)胞肺癌不良反應(yīng)的相關(guān)性[J];中華腫瘤雜志;2015年01期

2 趙曉光;宋明霞;徐潔;王玉潔;;UGT1A1基因多態(tài)性與小細(xì)胞肺癌伊立替康化療毒性和療效的研究[J];河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2014年09期

3 張秀萍;;益生菌防治化療相關(guān)性腹瀉的臨床現(xiàn)狀及其作用機(jī)制[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2013年32期

4 Yan Wang;Lin Shen;Nong Xu;Jin-Wan Wang;Shun-Chang Jiao;Ze-Yuan Liu;Jian-Ming Xu;;UGT1A1 predicts outcome in colorectal cancer treated with irinotecan and fluorouracil[J];World Journal of Gastroenterology;2012年45期

5 焦嬌;;腫瘤化療相關(guān)性腹瀉患者檢測腸道菌群分布的臨床價(jià)值[J];中國實(shí)用醫(yī)藥;2011年26期

6 姚成云;黃新恩;;化療相關(guān)性腹瀉的防治[J];腫瘤基礎(chǔ)與臨床;2009年04期

7 楊立學(xué);馬韜;張俊;葉正寶;項(xiàng)明;朱正綱;;伊立替康化學(xué)治療的不良反應(yīng)與UGT1A1*28基因多態(tài)性的關(guān)系[J];內(nèi)科理論與實(shí)踐;2009年04期

8 方青芳;;化療相關(guān)性腹瀉的發(fā)生機(jī)制和治療策略[J];中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué);2009年03期

9 常方芝;孫方利;馬文香;張圣林;高偉;吳軍;;消化道腫瘤化療相關(guān)性腹瀉的治療研究[J];上海醫(yī)藥;2007年11期

10 陳春華;邱立華;;消化道腫瘤化療相關(guān)性腹瀉的菌群分布及治療研究[J];臨床消化病雜志;2006年02期

，

本文編號(hào)：982921