本文關(guān)鍵詞：亮氨酸改善非酒精性脂肪性肝病的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 非酒精性脂肪性肝病 亮氨酸 脂代謝 抗氧化能力 炎性因子 胰島素抵抗 瘦素通路

【摘要】：近年來,非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的發(fā)病率在全球范圍內(nèi)呈快速增長。NAFLD是代謝綜合征的組成部分,其發(fā)病機(jī)制尚未完全明確,Day等提出了二次打擊學(xué)說,胰島素抵抗、瘦素抵抗以及氧化應(yīng)激等在其中發(fā)揮重要作用。NAFLD目前尚無理想的防治藥物。研究表明慢性肝病患者體內(nèi)支鏈氨基酸(亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸)水平顯著低于非肝病的對照組,提示支鏈氨基酸對于慢性肝病有一定的改善作用。因此,進(jìn)一步研究支鏈氨基酸,尤其是亮氨酸對非酒精性脂肪性肝病的作用及機(jī)制是十分必要的。目的:研究不同劑量亮氨酸對NAFLD的影響,并圍繞二次打擊學(xué)說相關(guān)的因素探討其可能的作用機(jī)制。方法:1.NAFLD模型的建立及亮氨酸對肝臟脂肪變性的直接作用:5周齡雄性SD大鼠48只隨機(jī)分為4組,高脂組飼料參照Harlan實驗室開發(fā)的60%高脂飼料配方,干預(yù)組在高脂飼料基礎(chǔ)上分別添加1.5%、3%、4.5%的亮氨酸,喂養(yǎng)16周。每周記錄大鼠體重、攝食量。實驗結(jié)束時,觀察大鼠肝組織病理學(xué)改變,測定血清肝功能指標(biāo)丙氨酸轉(zhuǎn)移酶(ALT)和門冬氨酸轉(zhuǎn)移酶(AST)水平。2.亮氨酸對NAFLD模型大鼠糖脂代謝、氧化應(yīng)激以及炎癥因子的影響:16周實驗結(jié)束時,測定大鼠血清空腹血糖以及空腹胰島素(FINS),計算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。測定大鼠肝糖原,血清膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)等脂代謝指標(biāo)水平,總抗氧化能力(T-AOC)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)等氧化指標(biāo)以及大鼠血清中白細(xì)胞介素6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和C反應(yīng)蛋白(CRP)的水平。Western blot檢測肝、脂肪代謝相關(guān)蛋白固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1(SREBP1)以及腎周白色脂肪組織中過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)的表達(dá)水平。3.亮氨酸對NAFLD模型大鼠瘦素通路的影響:16周實驗結(jié)束時,測定大鼠血清瘦素水平。取下丘腦免疫組化法測定其瘦素受體表達(dá)。Western blot法進(jìn)一步檢測白色脂肪組織中瘦素受體表達(dá)以及JAK2、STAT3和SOCS3等瘦素信號通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。結(jié)果:1.NAFLD模型的建立及亮氨酸對肝臟脂肪變性的直接作用:(1)干預(yù)16周后,4組大鼠的體重、平均攝食量和主要臟器指數(shù)之間無顯著性差異。(2)肝組織病理切片觀察到高脂組大鼠肝臟呈現(xiàn)明顯的脂肪變性,證實本研究中高脂喂養(yǎng)建立了NAFLD的大鼠模型。亮氨酸的干預(yù)則逆轉(zhuǎn)了脂肪變性。同時,亮氨酸的干預(yù)也顯著降低了高脂組升高的大鼠血清ALT、AST水平。2.亮氨酸對NAFLD模型大鼠糖脂代謝、氧化應(yīng)激以及炎癥因子的影響:(1)亮氨酸組較高脂組FINS水平均顯著降低,但3個亮氨酸組之間無顯著性差異;亮氨酸的干預(yù)顯著降低了高脂組HOMA-IR指數(shù)。(2)干預(yù)16周后,4組大鼠的肝糖原之間的差異無顯著性,3個劑量的亮氨酸干預(yù)都顯著降低了大鼠血清TC、TG和LDL-C水平,3.0%和4.5%亮氨酸顯著升高肝臟T-SOD和GSH-Px水平,4.5%亮氨酸還顯著降低了肝臟MDA水平。(3)高脂組大鼠肝組織中SREBP1蛋白表達(dá)量由于亮氨酸的干預(yù)顯著降低,而腎周白色脂肪組織中的PPARγ蛋白表達(dá)量則在亮氨酸的作用下顯著上升。3.亮氨酸對NAFLD模型大鼠瘦素通路的影響:(1)單純高脂組和添加亮氨酸3組的血清瘦素水平分別為2.31±0.23,1.69±0.26,1.87±0.27和1.91±0.29 ng/m L,亮氨酸組顯著低于高脂組,且亮氨酸組之間無顯著性差異。(2)免疫組化染色結(jié)果顯示,4組大鼠肝組織瘦素受體的相對含量為22.70±3.21,54.33±3.06,39.50±2.08和36.00±3.51。亮氨酸組的相對含量均顯著高于高脂組,其中1.5%亮氨酸組效果最為顯著。和肝臟相似,亮氨酸組的大鼠下丘腦的瘦素受體也高于對照組。(3)亮氨酸的干預(yù)顯著升高了高脂組大鼠下丘腦中瘦素受體蛋白和腎周白色脂肪組織中JAK2和STAT3的表達(dá)量。降低了SOCS3的表達(dá)量。其中,1.5%亮氨酸組效果最好。結(jié)論:1.亮氨酸能夠改善肝臟功能以及肝臟脂肪變性,從而具有改善非酒精性脂肪性肝病的作用。2.亮氨酸改善了高脂喂養(yǎng)的大鼠的糖脂類代謝、提高抗氧化能力、降低血清及組織中的炎性因子。3.亮氨酸降低血中瘦素水平,增加中樞和外周組織瘦素受體和JAK2、STAT3等瘦素信號通路相關(guān)的蛋白表達(dá),同時降低起負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用的SOCS3蛋白表達(dá)。提示亮氨酸能改善瘦素抵抗。4.總之,亮氨酸能夠改善非酒精性脂肪性肝病,其可能機(jī)制是抑制了對肝臟的二次打擊,即改善胰島素抵抗和瘦素抵抗、提高機(jī)體抗氧化能力、降低炎性因子。本研究側(cè)重于亮氨酸預(yù)防非酒精性脂肪性肝病及其機(jī)制的探討,但從指標(biāo)來看,亮氨酸同樣對2型糖尿病、心血管疾病、代謝綜合征的危險因子也起到了預(yù)防作用。
【關(guān)鍵詞】：非酒精性脂肪性肝病 亮氨酸 脂代謝 抗氧化能力 炎性因子 胰島素抵抗 瘦素通路
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R575.5
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-11
• 引言11-13
• 第一部分 NAFLD模型的建立及亮氨酸對肝臟脂肪變性的直接作用13-21
• 1. 材料與方法13-17
• 2 結(jié)果17-20
• 3.討論20-21
• 第二部分 亮氨酸對NAFLD模型大鼠糖脂代謝、氧化應(yīng)激以及炎癥因子的影響 .. 1121-33
• 1. 材料與方法21-26
• 2 結(jié)果26-29
• 3.討論29-33
• 第三部分 亮氨酸對NAFLD模型大鼠瘦素通路的影響33-42
• 1. 材料與方法33-35
• 2.結(jié) 果35-39
• 3.討論39-42
• 結(jié)論42-43
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 綜述49-56
• 參考文獻(xiàn)53-56
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的文章及科研經(jīng)歷56-57
• 英文縮略詞表57-58
• 致謝58-60

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 姜玲玲,厲有名,黃偉,周華麗;非酒精性脂肪肝及其危險因素調(diào)查[J];中國公共衛(wèi)生;2005年03期

2 陳世清;黎華;劉杞;;高脂飲食對大鼠脂肪肝胰島素受體底物1、2表達(dá)的影響[J];中國糖尿病雜志;2008年07期

，

本文編號：943487