三七總皂苷對大鼠重癥急性胰腺炎鈣超載與NF-κB因子的影響
發(fā)布時間:2017-09-19 10:19
本文關(guān)鍵詞:三七總皂苷對大鼠重癥急性胰腺炎鈣超載與NF-κB因子的影響
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【摘要】:[目的]:觀察三七總皂苷注射液干預(yù)重癥急性胰腺炎模型胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)鈣超載與胰腺組織NF-κB因子水平的變化;并探討鈣超載與NF-κB因子兩者間的相互關(guān)系。[方法]:健康成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠90只,體重約200-250g,隨機將其分成三組:假手術(shù)組(SO組)、重癥急性胰腺炎組(SAP組)、三七總皂苷干預(yù)組(PNS組),每組各30只:①假手術(shù)組(SO組):開腹后,只翻動十二指腸和胰腺,并關(guān)腹;②重癥急性胰腺炎組(SAP組):開腹后,將5%;悄懰徕c(1.0mL/kg)采用逆行胰膽管注射法誘導(dǎo)建立SAP模型,逐層關(guān)腹。③三七總皂苷干預(yù)組(PNS組):在進(jìn)行胰腺炎模型建模前,將三七總皂苷注射液(50 mg/ml血塞通注射液(0.1ml/100g))注射入腹腔,注射1h后,同SAP組法建立重癥急性胰腺炎模型。三組大鼠分別于術(shù)后8h、12h、24h采用乙醚麻醉處死,并收集腹水、血清及胰腺標(biāo)本。并計算腹水量;采用生化方法檢測血清淀粉酶(AMS)活性;HE染色胰腺組織,在光鏡下觀察胰腺組織并作病理學(xué)評分;免疫組化S-P法檢測胰腺組織內(nèi)NF-κB因子的表達(dá)量;采用流式細(xì)胞儀技術(shù)(Flow Cytometry/Financal Capacity Model, FCM)檢測胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)Ca2+的熒光強度(Fluorescence Intensity, FI),通過熒光強度來反應(yīng)腺泡細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度。采用統(tǒng)計學(xué)方法Spearman法分析胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度與胰腺組織NF-κB因子表達(dá)量的相關(guān)性。[結(jié)果]:1.血清淀粉酶(AMS):三組大鼠血清AMS在8h、12h、24h三個時間點之間均有顯著差異(P0.05),與SO組相比,SAP組和PNS組均顯著升高,比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);與SAP組相比,各時間點PNS組血清AMS均顯著降低,比較有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。2.腹水量:實驗研究中,SAP組及PNS組兩組建模后在8h、12h、24h三個時間點打開腹腔均可見大量血性腹水產(chǎn)生。與SO組相比,SAP組和PNS組腹水量均顯著升高,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與SAP組相比,PNS組各時間點均顯著降低,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.胰腺組織病理學(xué)損傷:與SO組相比,SAP組和PNS組均顯著升高,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與SAP組相比,PNS組各時間點均顯著降低,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。4.胰腺細(xì)胞內(nèi)Ca2+熒光強度:采用熒光顯微鏡觀察,可見胰腺腺泡細(xì)胞內(nèi)鈣離子呈綠色光顯影。通過細(xì)胞內(nèi)Ca2+的熒光強度(Fluorescence Intensity, FI)來反映胰腺細(xì)胞內(nèi)Ca2+的濃度大小。在8h、12h、24h三個時間點,三組大鼠胰腺細(xì)胞內(nèi)Ca2+的熒光強度之間均有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05);與SO組相比,SAP組和PNS組其熒光強度均顯著升高,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與SAP組相比,PNS組各時間點均顯著降低,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.胰腺組織NF-κB因子水平變化:胰腺組織通過免疫組化處理后,在光鏡下呈現(xiàn)棕黃色,在Image pro plus圖像軟件下處理,8h、12h、24h三個時間點,與SO組相比,SAP組和PNS組均顯著升高,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);與SAP組相比,PNS組各時間點均顯著降低,比較具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。6.相關(guān)性分析:應(yīng)用Spearman相關(guān)分析顯示:在各時間點大鼠胰腺細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度均與大鼠胰腺組織NF-κB因子水平呈正相關(guān)性(P0.05),細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升高與NF-κB因子水平變化具有相關(guān)性。[結(jié)論]1.胰腺細(xì)胞內(nèi)鈣超載與NF-κB因子的水平在重癥急性胰腺炎時明顯激活,呈高水平表達(dá);2.腺泡細(xì)胞內(nèi)鈣超載與NF-κB因子的水平變化之間呈正相關(guān),這提示細(xì)胞內(nèi)鈣超載可能引起急性胰腺炎過程中NF-κB因子的高表達(dá),從而引起一系列炎癥反應(yīng);3.三七總皂苷可以抑制細(xì)胞內(nèi)的鈣超載,進(jìn)一步減輕炎癥反應(yīng),有助于治療急性胰腺炎。
【關(guān)鍵詞】:三七總皂苷 重癥急性胰腺炎 鈣超載 NF-κB
【學(xué)位授予單位】:昆明醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R576
【目錄】:
- 縮略詞表(以字母順序排列)5-7
- 中文摘要7-9
- 英文摘要9-12
- 前言12-15
- 材料與方法15-25
- 結(jié)果25-36
- 討論36-47
- 結(jié)論47-48
- 參考文獻(xiàn)48-54
- 綜述54-62
- 參考文獻(xiàn)59-62
- 攻讀學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果62-63
- 致謝63
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本文編號:881064
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