本文關(guān)鍵詞：慢傳輸性便秘與正常乙狀結(jié)腸神經(jīng)系統(tǒng)研究

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【摘要】：目的:通過對手術(shù)切除慢傳輸型便秘患者乙狀結(jié)腸及正常乙狀結(jié)腸組織蛋白酶D及S-100蛋白進行免疫組化檢測,觀察慢傳輸型便秘乙狀結(jié)腸組織內(nèi)神經(jīng)叢數(shù)量和神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)節(jié)細胞形態(tài)學改變及數(shù)量變化以及神經(jīng)纖維改變,探尋慢傳輸型便秘患者的腸神經(jīng)系統(tǒng)病理學改變,指導臨床治療。方法:1標本取材1.1對照組選取既往無便秘及其他結(jié)腸病史的結(jié)直腸癌手術(shù)標本乙狀結(jié)腸段20例作為正常對照組,其中男性8例,女性12例,年齡范圍29 76歲,中位年齡63歲,標本取材距腫瘤邊緣5cm以外正常腸壁區(qū)域;1.2實驗組便秘診斷符合功能性便秘羅馬Ⅲ標準,術(shù)前經(jīng)結(jié)腸運輸實驗證實存在乙狀結(jié)腸慢傳輸異常,排除其他其他結(jié)腸器質(zhì)性病變病,手術(shù)切除結(jié)腸標本取乙狀結(jié)腸段20例為研究組,其中男性6例,女性14例,患者年齡范圍32-71歲,中位年齡59歲。2實驗方法手術(shù)切除標本后立即取材,取乙狀結(jié)腸全層腸壁,生理鹽水反復沖洗干凈,選取合適部位修剪成2*2cm大小,中性福爾馬林液固定24小時,撈出固定好的標本,梯度酒精脫水,二甲苯透明,石蠟包埋,手動切片機切片,厚度4um,切片脫蠟,水化,3%過氧化氫孵育,血清封閉,分別滴加一抗(CAD和S-100),滴加二抗,DAB顯色,蘇木素反藍,梯度酒精脫水,中性樹膠封片;在光學顯微鏡下觀察腸壁粘膜下層和肌間神經(jīng)叢,神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)量、形態(tài),神經(jīng)纖維形態(tài),每張切片粘膜下層和肌間分別隨機選取5個不重疊低倍(100×)視野,分別計數(shù)粘膜下層和肌間CAD染色及S-100染色神經(jīng)叢個數(shù),再轉(zhuǎn)至高倍(400×)鏡下計數(shù)神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)節(jié)細胞個數(shù),采集典型圖像。3數(shù)據(jù)分析數(shù)據(jù)采用“均數(shù)±標準差”(x±s)表示,應(yīng)用統(tǒng)計學軟件SPSS19.0對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,采用獨立樣本T檢驗,檢驗水準α=0.05。結(jié)果:1 CAD染色:對照組乙狀結(jié)腸粘膜下層和肌間可見神經(jīng)叢分布,神經(jīng)節(jié)細胞呈現(xiàn)深棕色染色,大小均勻,實驗組乙狀結(jié)腸肌間和粘膜下可見神經(jīng)叢分布,神經(jīng)節(jié)細胞呈現(xiàn)深棕色染色,神經(jīng)節(jié)細胞大小、分布不均勻,神經(jīng)叢面積、神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)量減少。2 S-100染色:對照組乙狀結(jié)腸粘膜下層和肌間神經(jīng)叢可見神經(jīng)叢,呈棕黃色染色,神經(jīng)叢中可見細胞狀“空白區(qū)”,即神經(jīng)節(jié)細胞,大小、分布規(guī)整,神經(jīng)纖維走形規(guī)則,無扭曲;實驗組乙狀結(jié)腸粘膜下層和肌間神經(jīng)叢可見神經(jīng)叢,神經(jīng)叢面積減小,神經(jīng)叢內(nèi)細胞狀“空白區(qū)”較對照組減少,大小、分布不規(guī)整,神經(jīng)纖維分布雜亂、增生、扭曲。3 CAD染色結(jié)果分析:與對照組比較,試驗組乙狀結(jié)腸粘膜下層和肌間神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)量顯著減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),神經(jīng)叢數(shù)量兩組比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。4 S-100染色結(jié)果分析:與對照組比較,試驗組乙狀結(jié)腸粘膜下層和肌間神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)量顯著減少,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),神經(jīng)叢數(shù)量兩組比較無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結(jié)論:1 CAD和S-100作為腸神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)節(jié)細胞和神經(jīng)纖維特異性標記物,應(yīng)用免疫組化方法可以反映出結(jié)腸內(nèi)神經(jīng)系統(tǒng)概況。2慢傳輸型便秘患者較正常乙狀結(jié)腸內(nèi)肌間神經(jīng)叢及粘膜下神經(jīng)叢的數(shù)量無明顯改變,神經(jīng)叢面積減小,神經(jīng)叢內(nèi)神經(jīng)節(jié)細胞數(shù)量減少,神經(jīng)纖維增生、紊亂等病理改變。
【關(guān)鍵詞】：CAD S-100 慢傳輸型便秘 慢傳輸型便秘病理機制 腸神經(jīng)系統(tǒng)
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R574.62
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• 英文縮寫9-10
• 前言10
• 材料與方法10-14
• 結(jié)果14-15
• 附圖15-19
• 附表19-20
• 討論20-25
• 結(jié)論25
• 參考文獻25-29
• 綜述 慢傳輸性便秘腸神經(jīng)系統(tǒng)標記物的研究29-38
• 參考文獻34-38
• 致謝38-39
• 個人簡歷39

【參考文獻】

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本文編號：797612