本文關(guān)鍵詞：利用反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導等溫擴增技術(shù)檢測丙型肝炎病毒

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【摘要】：鑒于丙型肝炎病毒(HCV)危害著人類健康,本研究擬用反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導等溫擴增(RT-LAMP)建立一種簡易檢測方法。收集并用FQ-PCR(金標準)檢測臨床樣本。根據(jù)HCV保守5'非編碼區(qū)設(shè)計4條通用引物,然后用Taq DNA聚合酶優(yōu)化傳統(tǒng)RT-LAMP體系,通過酶切和交叉實驗以評價RT-LAMP的特異性,通過和反轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR)同時檢測倍比稀釋的模板以評價RT-LAMP的靈敏度。同時判斷鈣黃綠素和羥基萘芬藍(HNB)染色法是否與電泳法的結(jié)果相同。結(jié)果顯示,Taq DNA聚合酶可提高擴增效率,RT-LAMP的特異性好,酶切片段與預(yù)期相一致(216bp)且只有HCV被擴增,靈敏度為10IU/tube,比RT-PCR高10倍。另外,兩種染料和電泳法的檢測結(jié)果相同。RT-LAMP和RT-PCR檢測75例臨床樣本的一致性差(P0.05,Kappa=0.375),和FQ-PCR的一致性好(P0.05,Kappa=0.762)。綜上所述,RT-LAMP簡易、特異、靈敏,適用于基層醫(yī)療機構(gòu)。
【作者單位】： 中國人民解放軍白求恩國際和平醫(yī)院全軍肝病診治中心;承德醫(yī)學院病原生物學實驗中心;
【關(guān)鍵詞】： 丙型肝炎病毒 反轉(zhuǎn)錄環(huán)介導等溫擴增 快速檢測
【基金】：全軍醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金資助項目(CBJ14C010)
【分類號】：R512.63;R440
【正文快照】： 引言丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染呈世界分布,全球丙肝感染人數(shù)達1.3~1.7億,我國HCV感染人數(shù)經(jīng)推算有1 000萬,并有部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌[1]。目前丙型肝炎(簡稱丙肝)的療效不佳,并且患者使用干擾素或利巴韋林的副作用較明顯,如失眠、抑郁、脫發(fā)、貧血等

【相似文獻】

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本文編號：796939