本文關(guān)鍵詞：甲基烯丙基二硫醚對(duì)炎癥性腸病的治療作用機(jī)制及固體制劑的初步研究

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【摘要】：炎癥性腸病(IBD)是一種腸道的非特異性慢性炎癥,主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(UC)和克羅恩病(CD)。炎癥性腸病是第二大最常見的炎癥性疾病,影響全球數(shù)以百萬計(jì)的人,發(fā)病率每年都在增長(zhǎng)。到目前為止,IBD的病因還沒有完全研究清楚,一般認(rèn)為是由遺傳、環(huán)境、微生物和機(jī)體免疫系統(tǒng)的相互作用造成的。目前,IBD治療所用的藥物包括氨基水楊酸鹽、糖皮質(zhì)激素、免疫調(diào)節(jié)劑和抗生素等。這些藥物治療存在許多不足,如免疫抑制劑和抗炎藥治療過程中出現(xiàn)腹瀉、痙攣、腹痛并伴有發(fā)熱和高血壓等副作用；抗生素的使用可能會(huì)改變腸道內(nèi)微生物生存的條件。同時(shí)也有研究發(fā)現(xiàn)治療IBD的部分藥物如柳氮磺吡啶、美沙拉嗪和硫唑嘌呤等可導(dǎo)致急性肝損傷,甚至肝衰竭。因此,臨床上需要治療效果好、副作用小的藥物用于預(yù)防或治療炎癥性腸病,在篩選炎癥性腸病治療藥物時(shí),降低藥物肝損傷的毒副作用的研究也是評(píng)價(jià)創(chuàng)新藥物的重要組成部分。本課題所評(píng)價(jià)的具有治療炎癥性腸病的活性化合物甲基烯丙基二硫醚(AMDS)來自大蒜。大蒜不僅具有殺菌、抗菌的作用,同時(shí)流行病學(xué)研究表明,大蒜中一些硫化物能夠降低癌癥的風(fēng)險(xiǎn),對(duì)心血管系統(tǒng)疾病也具有一定的作用。此外也有研究發(fā)現(xiàn)其中一些硫化物還具有保肝和抗炎的作用。大蒜的許多藥理作用得益于其中的硫化物,不同的硫化物具有不同的藥理作用,目前,大蒜中的一些硫化物(如大蒜素)已經(jīng)成功開發(fā)為藥物制劑。AMDS是大蒜眾多有機(jī)硫化物中的一種,但是關(guān)于AMDS對(duì)炎癥性腸病治療的藥理活性以及制劑開發(fā)方面的研究均未見報(bào)道。因此本課題首次對(duì)AMDS用于炎癥性腸病的初步治療以及固體制劑制備進(jìn)行研究,以期為AMDS用于腸道疾病的臨床應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。本課題的內(nèi)容包括四個(gè)方面。第一,AMDS的藥理活性評(píng)價(jià),主要考察AMDS對(duì)于炎癥性腸病的治療作用和作用機(jī)制以及對(duì)藥物引起的急性肝損傷的保護(hù)作用；第二,AMDS的基本性質(zhì)評(píng)價(jià)；第三,AMDS的固化工藝和腸溶制劑進(jìn)行初步研究,通過不同固體化工藝制備AMDS三種固體劑型,進(jìn)一步制備腸溶制劑并對(duì)其評(píng)價(jià)；第四,AMDS制劑生物藥劑學(xué)的初步研究,對(duì)主要代謝產(chǎn)物進(jìn)行了鑒定,并對(duì)AMDS制劑的的代謝產(chǎn)物的藥動(dòng)學(xué)過程進(jìn)行了研究。AMDS用于腸炎治療的初步體外作用及機(jī)制研究涵蓋HT-29和Caco-2體外細(xì)胞模型的構(gòu)建,細(xì)胞因子IL-8和IP-10的抑制作用評(píng)價(jià)以及NF-κB信號(hào)通路研究。采用SRB法和測(cè)定細(xì)胞上清液中乳酸脫氫酶(LDH)水平兩種方式考察AMDS對(duì)于細(xì)胞活性的影響；用ELISA實(shí)驗(yàn)考察TNF-α對(duì)兩種細(xì)胞在不同時(shí)間點(diǎn)IL-8和IP-10分泌量的影響,同時(shí)考察AMDS對(duì)于兩種細(xì)胞分泌的IL-8和IP-10影響；采用RT-PCR方法考察AMDS對(duì)于TNF-α的誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞IL-8 mRNA水平影響,采用Western blotting方法考察AMDS對(duì)于TNF-α誘導(dǎo)的NF-κB的表達(dá)情況以及用免疫熒光方法考察NF-κB-p65轉(zhuǎn)移情況。SRB法和LDH實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在0～150μM的濃度范圍內(nèi),AMDS對(duì)于細(xì)胞增殖活性沒有影響；而TNF-a對(duì)兩種細(xì)胞IL-8和IP-10影響測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn),隨著時(shí)間的延長(zhǎng)兩種細(xì)胞因子分泌量越來越多,具有時(shí)間依賴性,24h達(dá)到最大,表明TNF-a能夠誘導(dǎo)這兩種細(xì)胞產(chǎn)生炎癥細(xì)胞因子。AMDS對(duì)TNF-a誘導(dǎo)兩種不同細(xì)胞中分泌的IL-8和IP-10作用結(jié)果表明,采用不同的濃度AMDS預(yù)孵育細(xì)胞3小時(shí)能顯著降低因TNF-a誘導(dǎo)升高的IL-8和IP-10水平,且具有濃度依賴性。AMDS對(duì)于TNF-a的誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞IL-8 mRNA水平的實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,AMDS能顯著的抑制TNF-a誘導(dǎo)的IL-8的mRNA的積累,而對(duì)管家基因GAPDH的mRNA水平?jīng)]有影響。Western blotting以及免疫熒光的結(jié)果表明,AMDS能抑制NF-κB中的κBα蛋白的降解及NF-κBp65蛋白的轉(zhuǎn)移。這些研究結(jié)果表明AMDS可以抑制結(jié)腸細(xì)胞炎癥細(xì)胞因子的分泌,抗炎作用調(diào)節(jié)途徑有一部分可能是通過NF-κB信號(hào)通路完成的。AMDS用于腸炎治療的作用及機(jī)制的體內(nèi)初步研究包括大鼠腸炎模型的構(gòu)建、細(xì)胞因子和抗氧化酶的評(píng)價(jià)以及NF-κB信號(hào)通路研究。采用三硝基苯磺酸(TNBS)構(gòu)建腸炎大鼠模型,考察大鼠血清中細(xì)胞因子TNF-α、IL-8及IL-10變化,同時(shí)測(cè)定結(jié)腸中的生化指標(biāo)髓過氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX),采用病理組織切片觀察結(jié)腸病變情況,免疫組化方法考察結(jié)腸中NF-κB的表達(dá)情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明TNBS模型組的大鼠血清中TNF-α、IL-8顯著升高,IL-10則顯著降低。AMDS預(yù)防組和治療組與模型組比較,TNF-α及IL-8水平均顯著下降,而IL-10水平升高。結(jié)腸中生化指標(biāo)測(cè)定結(jié)果表明AMDS對(duì)于結(jié)腸中的MPO、SOD、MDA及GSH-PX具有調(diào)節(jié)作用。AMDS能夠抑制TNBS造成的MDA和MPO水平的升高,同時(shí)TNBS造模后降低的SOD及GSH-PX的活性經(jīng)過AMDS治療后也能升高。HE染色觀察以及免疫組化的結(jié)果表明TNBS造成了大鼠結(jié)腸的炎癥和損傷,而AMDS對(duì)炎癥具有抑制作用,同時(shí)能修復(fù)損傷的結(jié)腸組織。同時(shí)免疫組化的結(jié)果也表明AMDS對(duì)于腸炎的治療作用一部分機(jī)制可能是通過NF-κB信號(hào)通路進(jìn)行調(diào)節(jié),該結(jié)果和體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果相一致。AMDS保肝作用的初步體內(nèi)研究由小鼠藥物肝損傷模型的構(gòu)建,常規(guī)肝損傷指標(biāo)的評(píng)價(jià)以及保肝作用機(jī)制研究等部分組成。本文采用對(duì)乙酰氨基酚(APAP)構(gòu)建急性肝損傷模型,考察了AMDS對(duì)小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、乳酸脫氫酶(LDH)、TNF-α和IL-6活性的影響；同時(shí)考察AMDS對(duì)肝組織中的MDA、SOD、谷胱甘肽(GSH)、GSH-PX和GSH/GSSG的水平,用組織病理切片考察肝損傷情況,用免疫組化法(IHC)觀察肝細(xì)胞的炎癥和脂質(zhì)過氧化情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn),選擇400mg/kg的劑量構(gòu)建了APAP急性肝損傷模型,AMDS顯著的抑制了血清中ALT、AST、LDH、TNF-α和IL-6活性升高；同時(shí)抑制了肝組織中MDA的升高和GSH及SOD、GSH-PX和GSH/GSSG的降低,減少了肝損傷。肝組織病理切片及免疫組化的實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示AMDS具有較好的肝保護(hù)能力。AMDS的基本性質(zhì)評(píng)價(jià)包括結(jié)構(gòu)確證、體外含量分析方法的建立,溶解度、油水分配系數(shù)測(cè)定及穩(wěn)定性考察。利用IR、1H-NMR、13C-NMR以及GC-MS對(duì)AMDS進(jìn)行了結(jié)構(gòu)確證,建立了相關(guān)的圖譜。依據(jù)AMDS的紫外光譜特征,確定了AMDS的最大吸收波長(zhǎng),建立了測(cè)定含量的HPLC方法,方法學(xué)研究結(jié)果表明線性關(guān)系和專屬性良好,回收率、精密度等符合要求。溶解度測(cè)定結(jié)果顯示AMDS在水中的溶解度為26μg·mL-1,油水分配系數(shù)正辛醇-水中脂水分配系數(shù)1ogP為2.68,屬于溶解度較低的脂溶性化合物。不同的增溶劑,會(huì)增加AMDS的溶解度,尤其以Tween80的增溶作用最強(qiáng)。穩(wěn)定性考察結(jié)果表明,溫度對(duì)于AMDS的穩(wěn)定性有較大的影響,在低溫條件下比較穩(wěn)定,因此原料的貯存條件應(yīng)為低溫保存。當(dāng)AMDS分散在不同溶劑中,加入抗氧劑會(huì)增加AMDS在室溫條件下的穩(wěn)定性。AMDS的固體化制劑研究評(píng)價(jià)了環(huán)糊精包合物、液固系統(tǒng)制劑和固體分散體三種劑型,研究重點(diǎn)是提高穩(wěn)定性、掩蓋氣味、減少胃刺激性。結(jié)果表明,采用羥丙基-p-環(huán)糊精(HP-β-CD)以及磺丁基p-環(huán)糊精(SEB-β-CD)兩種材料制備的包合物載藥量和包封率都較p-環(huán)糊精(p-CD)低。因此選用β-CD作為包合材料,采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)并對(duì)其制備工藝進(jìn)行優(yōu)化,得到最佳的制備包合物的工藝條件為β-CD:AMDS(w/w)的投料比為6：0.7,包合溫度為40℃,包合時(shí)間為4h。采用IR、DSC和1H-NMR對(duì)包合物進(jìn)行表征,結(jié)果表明包合成功。包合物穩(wěn)定性的考察結(jié)果顯示,制備的包合物大大增加了其穩(wěn)定性。其次,采用液固制備技術(shù)制備了固體顆粒。對(duì)制備條件進(jìn)行篩選,結(jié)果表明以PEG400為非揮發(fā)性的溶劑,以微晶纖維素：乳糖(1：1)為載體,以syloid(?) FP244為涂層材料,AMDS與PEG400比例為1：1,(微晶纖維素+乳糖)與syloid(?) FP244比例10：1時(shí)制備的固體劑型的流動(dòng)性和載藥因子較好。對(duì)制備的液固劑型進(jìn)行穩(wěn)定性考察,結(jié)果表明在30℃±2℃3個(gè)月時(shí)藥物含量雖然有所降低,但與原藥相比穩(wěn)定性大大增加,長(zhǎng)期穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明低溫條件貯存穩(wěn)定。最后采用熔融法制備了AMDS的固體分散體,也提高了其穩(wěn)定性。對(duì)三種固化劑型的腸溶膠囊溶出度進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果表明在3h藥物基本能完全溶出。制備的三種固體形式可以用于其他制劑的制備。AMDS腸溶微丸制劑研究的重點(diǎn)包括素丸的制備和微丸包衣。腸溶微丸技術(shù)進(jìn)一步提高了制劑的穩(wěn)定性,降低了胃刺激性。首先考察兩種不同的制備工藝制備微丸,結(jié)果表明采用空白丸芯載藥的離心造粒制丸法載藥量高、圓整度好�？疾炝瞬煌澈蟿┓N類、藥粉供給速度以及粘合劑的噴漿速度對(duì)微丸收率的影響,結(jié)果表明采用微晶纖維素為空白丸芯,3%的HMPC E5為粘合劑,藥粉的供給速度為10～15 r/min,噴漿速度為5～10 r/min時(shí),微丸的收率較高和圓整度較好。對(duì)藥物微丸以Eudragit L30D-55水分散體為包衣材料進(jìn)行包衣,包衣液處方中添加PEG6000改善膜的通透性,加入滑石粉減少微丸的粘連。以收率和體外釋放度作評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)微丸的腸溶包衣進(jìn)行了優(yōu)化。對(duì)制備的三批腸溶微丸進(jìn)行體外釋放度考察,結(jié)果表明在酸中累計(jì)釋放率均小于7%,耐酸度良好,在pH6.8的緩沖溶液中AMDS在45 min累計(jì)釋放率達(dá)到75%以上,表明制備工藝可靠,質(zhì)量可行。腸溶微丸加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)結(jié)果顯示微丸的性狀、含量以及釋放度均未發(fā)生明顯的變化。AMDS制劑的生物藥劑學(xué)研究包括主要代謝產(chǎn)物檢測(cè)和代謝動(dòng)力學(xué)研究組成。體內(nèi)代謝研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)AMDS在體內(nèi)代謝很快,沒有檢測(cè)到藥物原形,而是檢測(cè)到兩種主要的代謝產(chǎn)物AMSO和AMSO2。在多次給藥后,進(jìn)行藥物代謝產(chǎn)物動(dòng)力學(xué)分析發(fā)現(xiàn),與油性分散劑相比,給予AMDS腸溶微丸后能使其代謝產(chǎn)物AMSO2在大鼠體內(nèi)的Cmax和AUC0→∞分別提高至119%和173%,體內(nèi)滯留時(shí)間MRT延長(zhǎng)為134%,提示制備成微丸后可以延長(zhǎng)AMSO2的代謝時(shí)間。本文首次通過體內(nèi)、體外實(shí)驗(yàn)對(duì)AMDS對(duì)炎癥性腸病的治療作用及作用機(jī)制進(jìn)行了初步研究,同時(shí)通過體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究了AMDS對(duì)于藥物引起的急性肝損傷的保護(hù)作用。結(jié)果表明AMDS不僅具有治療炎癥性腸病的作用而且具有保肝作用。將AMDS進(jìn)行液體藥物固體化,并進(jìn)一步制備成腸溶微丸,能夠掩蔽氣味、減少胃刺激性、增加藥物穩(wěn)定性、提高治療靶向性。本文的研究成果為AMDS的臨床應(yīng)用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和理論基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】：甲基烯丙基二硫醚 炎癥性腸病 急性肝損傷 腸溶微丸 體內(nèi)代謝
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R574
【目錄】：

• 中文摘要18-23
• Abstract23-29
• 符號(hào)說明29-33
• 前言33-40
• 1. 大蒜中的硫化物及生物學(xué)作用33-34
• 1.1 大蒜中的硫化物33
• 1.2 生物學(xué)作用33-34
• 2. 炎癥性腸病概述34-37
• 3. 液體藥物固體化技術(shù)37-38
• 4. 微丸簡(jiǎn)述38-39
• 5. 本課題設(shè)計(jì)思路39-40
• 第一章 AMDS通過NF-κB信號(hào)通路抑制TNF-α對(duì)結(jié)腸細(xì)胞促炎作用研究40-57
• 一. 試劑與儀器40-42
• 1. 細(xì)胞與藥物40-41
• 2. 儀器設(shè)備41
• 3. 試劑41-42
• 二. 方法和結(jié)果42-54
• 1. 細(xì)胞的培養(yǎng)42
• 2. 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析42
• 3. SRB法檢測(cè)細(xì)胞的增殖活性42-43
• 4. AMDS對(duì)LDH活性的影響43-44
• 5. 細(xì)胞上清液中IL-8,IP-10的測(cè)定44-47
• 5.1 TNF-α誘導(dǎo)HT-29和Caco-2細(xì)胞中IL-8的分泌44-45
• 5.2 AMDS對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的兩種不同細(xì)胞中IL-8分泌的影響45-46
• 5.3 AMDS對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的兩種不同細(xì)胞中IP-10分泌的影響46-47
• 6. RT-PCR法測(cè)定HT-29細(xì)胞中IL-8的表達(dá)47-50
• 6.1 總RNA提取47
• 6.2 RT-PCR擴(kuò)增IL-847-49
• 6.3 AMDS對(duì)TNF-α誘導(dǎo)HT-29細(xì)胞IL-8 mRNA的影響49-50
• 7. HT-29細(xì)胞中IκBα的Western blot的分析50-52
• 7.1 細(xì)胞中蛋白的提取50
• 7.2 蛋白的濃度的測(cè)定50-51
• 7.3 SDS-PAGE凝膠電泳51
• 7.4 AMDS對(duì)TNF-α誘導(dǎo)的NF-κB激活的抑制作用51-52
• 8. HT-29細(xì)胞中NF-κBp65核轉(zhuǎn)移的免疫熒光分析52-54
• 8.1 免疫熒光分析方法52-53
• 8.2 AMDS對(duì)HT-29細(xì)胞中NF-κB p65分布的影響53-54
• 三. 討論54-56
• 四. 小結(jié)56-57
• 第二章 AMDS對(duì)腸炎大鼠的治療作用研究57-73
• 一. 材料和儀器57-58
• 1. 藥品57
• 2. 試劑57
• 3. 儀器57-58
• 4. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物58
• 二. 方法和結(jié)果58-68
• 1. 大鼠腸炎模型建立58
• 2. 大鼠實(shí)驗(yàn)分組及流程58-59
• 3. 動(dòng)物樣本采集59
• 4. 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理59-60
• 5. 大鼠的狀態(tài)、體重及結(jié)腸病變情況60-61
• 5.1 大鼠狀態(tài)及結(jié)腸組織評(píng)分60
• 5.2 大鼠體重變化情況60-61
• 6. 各種生化指標(biāo)的測(cè)定61-66
• 6.1 大鼠血清中TNF-α、IL-8和IL-10的檢測(cè)61-62
• 6.2 結(jié)腸組織中MPO水平的測(cè)定62-63
• 6.3 SOD的測(cè)定63-64
• 6.4 腸勻漿中MDA的測(cè)定64-65
• 6.5 谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)的測(cè)定65-66
• 7. 結(jié)腸組織HE染色分析66-67
• 8. 免疫組化實(shí)驗(yàn)67-68
• 三. 討論68-72
• 四. 小結(jié)72-73
• 第三章 AMDS對(duì)急性肝損傷保護(hù)作用研究73-86
• 一. 材料與試劑74
• 1. 儀器74
• 2. 試劑74
• 二. 方法和結(jié)果74-82
• 1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組74-75
• 2. 組織樣品的制備及蛋白濃度的測(cè)定75
• 3. AMDS對(duì)ALT與AST活性的影響75-76
• 4. LDH的測(cè)定76-77
• 5. AMDS對(duì)血清及肝組織中TNF-α和IL-6的影響77-78
• 6. AMDS對(duì)SOD和MDA的影響78-79
• 7. AMDS對(duì)肝中GSH、GSH-PX和GSSG/GSH的影響79-80
• 8. 病理組織分析80-81
• 9. 免疫組化實(shí)驗(yàn)81-82
• 三. 討論82-84
• 四. 小結(jié)84-86
• 第四章 AMDS體外分析方法的建立及基本性質(zhì)評(píng)價(jià)86-103
• 一. 試劑和儀器86
• 1. 藥品與試劑86
• 2. 實(shí)驗(yàn)儀器86
• 二. 實(shí)驗(yàn)方法與結(jié)果86-101
• 1. AMDS的結(jié)構(gòu)確證86-89
• 1.1 IR確證86-87
• 1.2 ~1H-NMR87
• 1.3 ~(13)C-NMR87-88
• 1.4 GC-MS確證88-89
• 2. AMDS分析方法建立89-93
• 2.1 液相色譜條件89
• 2.2 標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液的制備89
• 2.3 吸收波長(zhǎng)的確定89-90
• 2.4 專屬性試驗(yàn)90-91
• 2.5 AMDS標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備91
• 2.6 精密度考察91-92
• 2.7 回收率考察92-93
• 2.8 最低檢測(cè)限93
• 2.9 溶液穩(wěn)定性93
• 3. 體外溶出度方法的建立93-97
• 3.1 溶出度測(cè)定的方法93-94
• 3.2 溶出介質(zhì)的選擇94
• 3.3 專屬性試驗(yàn)94-95
• 3.4 溶出介質(zhì)中線性關(guān)系考察95
• 3.5 溶出樣品的穩(wěn)定性95-96
• 3.6 轉(zhuǎn)速的考察96-97
• 4. AMDS理化性質(zhì)考察97-99
• 4.1 性狀97
• 4.2 溶解度的測(cè)定97
• 4.3 油水分配系數(shù)的測(cè)定97-99
• 4.4 增溶劑對(duì)溶解度的影響99
• 5. AMDS穩(wěn)定性考察99-101
• 5.1 溫度的影響99-100
• 5.2 抗氧劑對(duì)AMDS穩(wěn)定性的影響100-101
• 5.3 不同儲(chǔ)存溫度對(duì)AMDS穩(wěn)定性影響101
• 三. 討論101-102
• 四. 小結(jié)102-103
• 第五章 AMDS固化工藝的研究103-123
• 一. 材料和儀器103-104
• 1. 試劑103
• 2. 儀器103-104
• 二. 方法和結(jié)果104-121
• 1. AMDS包合物的制備104-111
• 1.1 HP-β-CD和SEB-β-CD包合物的制備104
• 1.2 β-CD包合物的制備104
• 1.3 不同包合物載藥量和包封率的測(cè)定104-105
• 1.4 β-CD包合物制備條件的優(yōu)化105-107
• 1.5 β-CD包合物的表征107-110
• 1.6 包合物穩(wěn)定性的考察110-111
• 1.7 包合物溶出度考察111
• 2. 液固系統(tǒng)-制劑的制備及評(píng)價(jià)111-118
• 2.1 制備方法111
• 2.2 液固系統(tǒng)評(píng)價(jià)指標(biāo)111-112
• 2.3 制備條件的選擇112-116
• 2.4 優(yōu)化后處方制劑制備116
• 2.5 穩(wěn)定性考察116-117
• 2.6 溶出度測(cè)定117-118
• 3. 固體分散體的制備及評(píng)價(jià)118-121
• 3.1 固體分散體制備118-119
• 3.2 固體分散體初步穩(wěn)定性測(cè)定119-120
• 3.3 固體分散體溶出度的測(cè)定120-121
• 三. 討論121-122
• 四. 小結(jié)122-123
• 第六章 AMDS腸溶微丸的制備123-145
• 一. 材料和儀器123
• 1. 試劑123
• 2. 儀器123
• 二. 方法和結(jié)果123-143
• 1. AMDS素丸的制備123-125
• 1.1 素丸質(zhì)量評(píng)價(jià)方法及指標(biāo)123-124
• 1.2 不同制備工藝的比較124-125
• 1.2.1 擠出滾圓法制丸124
• 1.2.2 離心造粒法制丸124-125
• 1.2.3 質(zhì)量對(duì)比125
• 2. AMDS素丸制備條件考察125-128
• 2.1 粘合劑的種類125-126
• 2.2 供粉速率的影響126
• 2.3 噴漿速度的影響126-127
• 2.4 拋光時(shí)間的影響127
• 2.5 AMDS素丸制備工藝127-128
• 2.6 工藝驗(yàn)證128
• 3. 素丸包衣128-138
• 3.1 腸溶微丸的制備128
• 3.2 包衣處方的優(yōu)化128-138
• 3.3 腸溶微丸釋放度的測(cè)定138
• 4. 腸溶微丸的穩(wěn)定性考察138-143
• 4.1 影響因素試驗(yàn)139-141
• 4.2 加速實(shí)驗(yàn)141-142
• 4.3 長(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)142-143
• 三. 討論143-144
• 四. 小結(jié)144-145
• 第七章 AMDS制劑體內(nèi)代謝的研究145-160
• 一、材料與動(dòng)物145
• 1. 儀器145
• 2. 試劑145
• 3. 動(dòng)物145
• 二. 方法與結(jié)果145-158
• 1. GC-MS色譜條件145-146
• 2. 兩種代謝產(chǎn)物GC-MS檢測(cè)146-147
• 3. AMSO和AMSO_2分析方法的建立147-155
• 3.1 樣品的前處理147
• 3.2 方法專屬性147-149
• 3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線與線性范圍149-150
• 3.4 精密度與準(zhǔn)確度實(shí)驗(yàn)150-153
• 3.5 提取回收率實(shí)驗(yàn)153-154
• 3.6 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)154-155
• 3.7 定量下限155
• 4. 給藥后代謝產(chǎn)物檢測(cè)155-158
• 4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組及給藥155-156
• 4.2 取樣方法與取樣點(diǎn)安排156
• 4.3 AMSO及AMSO_2代謝檢測(cè)結(jié)果156-158
• 三. 討論158-159
• 四. 小結(jié)159-160
• 全文結(jié)論160-163
• 參考文獻(xiàn)163-179
• 致謝179-180
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文目錄180-182
• 學(xué)位論文評(píng)閱及答辯情況表182

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本文編號(hào)：786553