本文關(guān)鍵詞：殼寡糖降低體內(nèi)外非酒精性脂肪肝模型甘油三脂的作用及機制研究

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【摘要】：目的:研究殼寡糖(COS)對體內(nèi)外非酒精性脂肪模型甘油三酯(TG)的影響及作用機制。方法:在體外將1mmol/L混合脂肪酸處理的LO2細(xì)胞作為脂肪變模型組;1mmol/L混合脂肪酸及0.5mg/mL COS共同處理的細(xì)胞為COS組,同時以未處理的細(xì)胞為對照組,24 h后進(jìn)行油紅O染色,測細(xì)胞內(nèi)甘油三酯含量。用反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)及Western blot檢測各實驗組細(xì)胞固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c(SREBP-1c)、脂肪酸合成酶(FAS)和肉毒堿棕櫚�；D(zhuǎn)移酶1A(CPT1A)的mRNA以及蛋白表達(dá)情況。2mmol/L的脂肪酸誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,用Hoechst染色檢測COS對細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。在體內(nèi)將雄性C57BL/6J小鼠按體重隨機分為對照組、高脂組和COS組,分別給予不同的飼料喂養(yǎng),16周后取小鼠肝臟分別進(jìn)行HE及油紅O染色,同時測定肝臟TG含量。采用SPSS17.0軟件單因素方差分析進(jìn)行多組數(shù)據(jù)間的比較,進(jìn)一步用SNK法進(jìn)行多組的兩兩間比較。結(jié)果:(1)相較于對照組,模型組LO2肝細(xì)胞出現(xiàn)脂肪變性,細(xì)胞內(nèi)脂滴增多,TG含量升高。COS處理后可以降低細(xì)胞內(nèi)TG的含量。(2)模型組SREBP-1c、FAS mRNA的表達(dá)明顯升高(2.306±0.239對比1.010±0.174,P0.05;1.788±0.192對比1.006±0.139,P0.05),而CPT1A m RNA的水平略高(1.355±0.145對比1.010±0.176,P0.05),但差異無統(tǒng)計學(xué)意義。經(jīng)COS處理后,SREBP-1c、FAS mRNA相對表達(dá)量(1.039±0.107、1.212±0.180,P0.05)降低,CPT1A mRNA表達(dá)水平升高(1.911±0.773,P0.05),差別有統(tǒng)計學(xué)意義。(3)模型組SREBP-1c及FAS蛋白表達(dá)和對照組、COS組相比最高(0.351±0.016對比0.206±0.012、0.161±0.081,P0.05;1.238±0.051對比0.287±0.031、0.332±0.023,P0.05),差異有統(tǒng)計學(xué)意義。COS組CPT1A蛋白的相對表達(dá)量(1.014±0.033)高于對照組和模型組(0.547±0.075、0.561±0.046,P0.05)。(4)COS可以保護(hù)脂肪酸誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。(5)COS能減輕高脂飲食小鼠肝臟內(nèi)的脂質(zhì)堆積,降低TG含量。結(jié)論:COS能減輕體內(nèi)外NAFLD模型肝細(xì)胞內(nèi)TG蓄積,其可能機制與抑制SREBP-1c及其下游的FAS基因表達(dá),減少TG的合成;同時,增加CPT1A基因表達(dá),加速TG分解有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：脂肪肝 非酒精性 殼寡糖 甘油三酯 小鼠模型
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R575.5
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-7
• 引言7-9
• 第一部分 殼寡糖治療非酒精性脂肪肝體外實驗9-27
• 第1章 實驗材料9-11
• 1.1 主要儀器和設(shè)備9
• 1.2 主要試劑和器材9-10
• 1.3 液體的配制10-11
• 第2章 實驗方法11-20
• 2.1 細(xì)胞的培養(yǎng)11-13
• 2.2 非酒精性脂肪肝細(xì)胞模型構(gòu)建13
• 2.3 COS濃度的選擇13-14
• 2.4 實驗分組14
• 2.5 油紅O染色14
• 2.6 測定細(xì)胞內(nèi)的甘油三酯含量14
• 2.7 RT-PCR檢測mRNA的表達(dá)14-17
• 2.8 Western blot檢測細(xì)胞目的蛋白的表達(dá)17-19
• 2.9 Hochest熒光染色19
• 2.10 統(tǒng)計學(xué)分析19-20
• 第3章 結(jié)果20-25
• 3.1 不同濃度的脂肪酸對細(xì)胞活性的影響20
• 3.2 脂肪酸誘導(dǎo)LO2細(xì)胞脂肪變性濃度的確定20-21
• 3.3 COS對LO2細(xì)胞增殖的影響21
• 3.4 COS對LO2脂肪肝細(xì)胞模型的影響21-22
• 3.5 各組細(xì)胞內(nèi)SREBP-1c、FAS和CPT1A mRNA表達(dá)變化22-23
• 3.6 殼寡糖對LO2細(xì)胞SREBP-1c、FAS和CPT1A蛋白表達(dá)的影響23
• 3.7 COS抑制脂肪酸誘導(dǎo)肝細(xì)胞的凋亡23-25
• 第4章 討論25-27
• 第二部分 殼寡糖治療非酒精性脂肪肝體外實驗27-33
• 第1章 實驗材料27-28
• 1.1 實驗動物27
• 1.2 飼料配方27
• 1.3 主要儀器和設(shè)備27
• 1.4 主要試劑和器材27-28
• 第2章 實驗方法28-29
• 2.1 動物處理28
• 2.2 小鼠肝臟組織油紅染色28
• 2.3 小鼠肝臟組織的HE染色28
• 2.4 肝臟組織甘油三酯(TG)測定28-29
• 2.5 統(tǒng)計學(xué)處理29
• 第3章 結(jié)果29-31
• 3.1 一般情況及體質(zhì)量比較29-30
• 3.2 COS對小鼠肝臟病理學(xué)及肝臟脂質(zhì)沉積的影響30
• 3.3 COS對小鼠肝臟TG的影響30-31
• 第4章 討論31-32
• 第5章 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 綜述37-41
• 綜述參考文獻(xiàn)39-41
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果41-42
• 中英文縮略詞表42-43
• 致謝43-44

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條

1 蘇冬梅;李健;諸葛麗;李軍祥;;健脾疏肝方對非酒精性脂肪性肝炎大鼠ADP、TNF-α的影響[J];北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2011年12期

2 李延杰;張忠泉;楊新波;楊璐;劉青川;黃正明;;羅丹調(diào)脂膠囊對高脂血癥大鼠脂肪肝的治療作用[J];解放軍藥學(xué)學(xué)報;2013年03期

3 周慶;;慢性肝病的中醫(yī)藥治療優(yōu)勢與前景探討[J];廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2011年06期

4 楊婉鳳;齊艷平;李曼;孫學(xué)華;朱曉駿;高月求;;參葛方對單純高脂飲食誘導(dǎo)的非酒精性脂肪性肝病大鼠脂質(zhì)代謝的影響[J];上海中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報;2012年01期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 路麗芹;馬玉忠;徐麗娜;孫立云;金東航;;丹參對脂肪變性奶牛肝細(xì)胞的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會獸醫(yī)外科學(xué)分會第20次學(xué)術(shù)研討會暨第5次奶牛疾病學(xué)術(shù)會議論文集[C];2013年

2 李延杰;張忠泉;楊新波;楊璐;劉青川;黃正明;;調(diào)脂2號膠囊對高脂血癥大鼠脂肪肝的治療作用[A];中國醫(yī)藥教育論壇-中國醫(yī)藥教育協(xié)會第三屆三次理事大會暨學(xué)術(shù)年會論文專輯[C];2013年

3 唐外姣;周本杰;;護(hù)肝清脂片對非酒精性脂肪肝模型大鼠肝臟蛋白質(zhì)合成及膽汁代謝的影響[A];2014年廣東省藥師周大會論文集[C];2014年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 賈彥紅;扶正化瘀復(fù)方對非酒精性脂肪性肝纖維化防治作用的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2012年

2 劉瑩;茵陳蒿湯及其拆方治療非酒精性脂肪性肝炎的實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2013年

3 劉小芳;刺參營養(yǎng)成分的地域性差異分析及其磷脂的活性研究[D];中國海洋大學(xué);2014年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 田會萍;蒙醫(yī)“三根調(diào)節(jié)法”對非酒精性脂肪肝模型大鼠的治療作用及其機制研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

2 馬蘭;獨一味顆粒抗大鼠非酒精性脂肪性肝炎肝纖維化的實驗研究[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2011年

3 盧勝家;超微脂康飲治療非酒精性脂肪性肝病的實驗研究[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2012年

4 張利利;非酒精性脂肪肝大鼠Kupffer細(xì)胞表型及抗原提呈功能研究[D];揚州大學(xué);2012年

5 王璞;15d-PGJ_2對非酒精性脂肪性肝病大鼠的治療作用及機制探討[D];石河子大學(xué);2013年

6 易園驪;腸道菌群變化與非酒精性脂肪性肝病發(fā)病的相關(guān)性研究[D];新疆醫(yī)科大學(xué);2013年

7 程聰;蔥白提取物對非酒精性脂肪性肝病脂質(zhì)過氧化影響的臨床觀察和實驗研究[D];湖北中醫(yī)藥大學(xué);2013年

8 李丹;柴胡疏肝散對非酒精性脂肪肝胰島素抵抗大鼠的防治作用及機制研究[D];廣東藥學(xué)院;2014年

9 吳曉艷;GLUT4和UCP2在非酒精性脂肪性肝病中的作用以及小檗堿對GLUT4和UCP2表達(dá)的影響[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2014年

10 季玲;ChREBP及其靶基因PNPLA3在非酒精性脂肪性肝病發(fā)病中的作用[D];瀘州醫(yī)學(xué)院;2014年

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本文編號：692584