本文關(guān)鍵詞：大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞膠原生成的調(diào)節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：背景：肝病治療一直是困擾醫(yī)學(xué)界的難題，近幾年，肝纖維化的研究對于慢性肝病、肝硬化的形成所擁有的重要研究價值，被醫(yī)學(xué)界所認(rèn)可，其發(fā)生的機制也得有了一定的共識。目前公認(rèn)的肝纖維化機制，是肝細(xì)胞的外基質(zhì)發(fā)生降解減少與過度的沉積所造成的。肝纖維化的研究主要圍繞膠原纖維的合成與分解，以及影響膠原合成與分解的因素，以期找到肝纖維化的早期診斷與治療的辦法。其中細(xì)胞因子介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞之間、細(xì)胞與基質(zhì)之間的相互作用所引起的肝星狀細(xì)胞激活肝纖維化過程，，是該研究的最關(guān)鍵部分，如果發(fā)生反復(fù)的肝損傷，可進(jìn)一步活化HSC。根據(jù)臨床與實驗資料，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物能更加容易地激活HSC，從而損傷肝細(xì)胞。因此，在治療的過程中使用抗氧化劑，能夠?qū)Ω螕p傷以及肝纖維化癥狀進(jìn)行減輕。在抗氧化劑中，大蒜素是非常有效的一種，憑著高度的抗氧化能力，在臨床與實驗中得到廣泛的應(yīng)用。 目的：觀察大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞(HSC-T6)增殖、凋亡的影響，探討大蒜素抗肝纖維化的作用及其機制。 方法：大鼠肝星狀細(xì)胞株HSC-T6生長于體積分?jǐn)?shù)為10%小牛血清及1×10~5IU/L的青霉素、100mg/L的鏈霉素的DMEM培養(yǎng)液中，在37℃、5%CO_2飽和蒸汽的條件下進(jìn)行培養(yǎng)。分為HSC-T6細(xì)胞空白對照組、溶劑對照組、大蒜素藥物實驗組。大蒜素藥物實驗組加入不同濃度的DATS。以不加藥物而加等體積的10%小牛血清及1×10~5IU/L的青霉素、100mg/L的鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基為試劑對照組。溶劑對照組加入1.35μl/ml二甲基亞砜。通過MTT法檢測大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞的增殖的影響；通過BrdU摻入實驗檢測大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞的增殖抑制作用；通過Hoechst33342染色及流式細(xì)胞術(shù)檢測Annexin V-FITC/PI雙染檢測大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞的凋亡作用；透射電鏡下觀察大蒜素作用后大鼠肝星狀細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)的變化；Western blot實驗鑒定大蒜素作用后大鼠肝星狀細(xì)胞的Bcl-2、MAO、TIMP-1蛋白的影響。 結(jié)果：HSC-T6大蒜素DATS各濃度處理組與空白對照組及溶劑對照組比較，增殖抑制率和細(xì)胞凋亡率明顯增高，有顯著性差異(P0.05)；并且DATS濃度增高時，HSC-T6的抑制率、凋亡率也逐漸增強；DATS高濃度實驗組（濃度含量24μg/ml DATS）的增殖抑制率和細(xì)胞凋亡率明顯高于空白對照組、試劑對照組及低濃度實驗組。大蒜素可抑制大鼠肝星狀細(xì)胞的Bcl-2、MAO、TIMP-1蛋白的生成。 結(jié)論：大蒜素可以抑制HSC-T6增殖，抑制其凋亡相關(guān)蛋白及膠原生成相關(guān)蛋白，并誘導(dǎo)其凋亡，且具有時間濃度依賴性。
【關(guān)鍵詞】：大鼠肝星狀細(xì)胞 大蒜素 凋亡 細(xì)胞增殖 肝纖維化
【學(xué)位授予單位】：石河子大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R575.2
【目錄】：

• 摘要8-10
• Abstract10-12
• 前言12-16
• 第一部分 大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞增殖的影響16-29
• 前言16-17
• 1 材料和方法17-22
• 1.1 材料17-18
• 1.2 實驗方法18-22
• 2 結(jié)果22-25
• 2.1 HSC-T6 細(xì)胞在不同濃度大蒜素作用不同時間發(fā)生的形態(tài)學(xué)改變22-23
• 2.2 MTT 法測不同濃度的大蒜素作用不同時間對 HSC-T6 細(xì)胞增殖的影響23-24
• 2.3 BrdU 試驗檢測不同濃度大蒜素作用不同時間對大鼠肝星狀細(xì)胞的增殖抑制作用24-25
• 3 討論25-29
• 第二部分 大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞凋亡的影響29-43
• 前言29-30
• 1 材料和方法30-36
• 1.1 材料30-31
• 1.2 實驗方法31-35
• 1.3 統(tǒng)計學(xué)方法35-36
• 2 實驗結(jié)果36-39
• 2.1 Hoechst 33342 染色法檢測不同濃度大蒜素作用不同時間誘導(dǎo)大鼠肝星狀細(xì)胞的凋亡的作用36-38
• 2.2 透射電鏡觀察大蒜素對 HSC-T6 超微結(jié)構(gòu)的影響38
• 2.3 流式細(xì)胞儀檢測 Annexin V-FITC/PI 雙染色測大蒜素對 HSC-T6 細(xì)胞凋亡的影響38-39
• 3 討論39-43
• 第三部分 大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞膠原相關(guān)蛋白的影響43-51
• 前言43-44
• 1 材料和方法44-48
• 1.1 材料44-45
• 1.2 實驗方法45-48
• 1.3 統(tǒng)計學(xué)方法48
• 2 實驗結(jié)果48-49
• 3 討論49-51
• 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-54
• 文獻(xiàn)綜述54-61
• 參考文獻(xiàn)59-61
• 致謝61-62
• 作者簡介62-63
• 導(dǎo)師評閱表63

【參考文獻(xiàn)】

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  本文關(guān)鍵詞：大蒜素對大鼠肝星狀細(xì)胞膠原生成的調(diào)節(jié)作用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：490351