本文關(guān)鍵詞：CMKLR1過表達(dá)在大鼠非酒精性脂肪性肝炎脂肪組織中的作用及意義，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:高脂飲食喂養(yǎng)的SD雄性大鼠為研究對象,觀察慢病毒介導(dǎo)的CMKLR1過表達(dá)在SD大鼠非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis,NASH)脂肪組織中的作用以及意義。方法:提前制作攜帶有大鼠趨化因子樣受體1(chemokine-like receptor 1,CMKLR1)基因慢病毒載體的構(gòu)建以及評定。雄性SD大鼠42只,在動(dòng)物房適應(yīng)飼養(yǎng)7天后,隨機(jī)將所有大鼠分成四個(gè)組:?對照12只;?模型12只;?轉(zhuǎn)染12只;④空轉(zhuǎn)染6只,對照組普通飲食喂養(yǎng),其余高脂肪含量飲食喂養(yǎng)。在實(shí)驗(yàn)第1天,對照及模型組于尾靜脈注射磷酸鹽緩沖液(phosphate-buffered saline,PBS)100ul,轉(zhuǎn)染組于尾靜脈注射病毒液100ul,空轉(zhuǎn)染組于尾靜脈注射空病毒液100ul。在實(shí)驗(yàn)第7、14、20天空轉(zhuǎn)染組各取2只處死,評價(jià)轉(zhuǎn)染效率。每周記錄大鼠體重;實(shí)驗(yàn)第8、12周,各組隨機(jī)取6只老鼠禁飲食12小時(shí)后,水合氯醛腹腔麻醉,迅速剪開腹腔,觀察肝臟形態(tài)學(xué)變化,腹主動(dòng)脈取血,取腎周脂肪組織,置液氮中冷凍,然后轉(zhuǎn)移至-80℃冰箱凍存,保存肝組織行蘇木精-伊紅(hematoxylin and eosin staining,HE)染色;檢測血中凱莫瑞、脂聯(lián)素含量;RT-PCR法檢測脂肪組織中CMKLR1、脂聯(lián)素m RNA的含量;蛋白免疫印跡法測各組大鼠脂肪組織中CMKLR1和脂聯(lián)素的蛋白含量。結(jié)果:(1)模型大鼠與同時(shí)期對照和轉(zhuǎn)染大鼠體重及肝指數(shù)相比明顯升高(P0.05)。(2)肝臟HE結(jié)果顯示:對照組大鼠的肝細(xì)胞按一定的順序排列、肝細(xì)胞條索結(jié)構(gòu)清楚、放射狀排列;模型組8周出現(xiàn)了單純性脂肪肝,肝細(xì)胞體積變大,肝細(xì)胞紊亂排列,未見肝竇出現(xiàn),肝小葉周邊的肝臟細(xì)胞呈現(xiàn)局灶脂肪變性的表現(xiàn);12周呈現(xiàn)了肝臟重度脂肪肝,視線內(nèi)絕大多數(shù)的肝細(xì)胞呈現(xiàn)大泡脂滴為主的混合脂肪變改變,可以看到炎性細(xì)胞的出現(xiàn)及點(diǎn)狀壞死,已發(fā)展到NASH;轉(zhuǎn)染組較同期模型大鼠病理程度減輕,與對照組接近。(3)模型組比同期對照組大鼠血清中凱莫瑞水平上升(P0.05),轉(zhuǎn)染組比同期模型組血清中凱莫瑞水平上升(P0.05)。(4)8周時(shí)模型組比同期對照大鼠循環(huán)血中脂聯(lián)素水平降低(P0.05),12周時(shí)進(jìn)一步降低,轉(zhuǎn)染組較同期模型組循環(huán)血中脂聯(lián)素水平上升。(5)PCR提示,同時(shí)期的模型組與對照組相比,脂肪組織中CMKLR1 m RNA含量上升(P0.05),轉(zhuǎn)染組比同期模型大鼠CMKLR1 m RNA含量明顯增多(P0.05);模型組與同期對照組相比脂肪組織中脂聯(lián)素m RNA含量下降,轉(zhuǎn)染組比同期模型組相比增多(P0.05)。(6)蛋白免疫印跡結(jié)果提示,同時(shí)期的模型組與對照組大鼠相比,脂肪組織中CMKLR1蛋白含量上升(P0.05),轉(zhuǎn)染組與同期模型組相比含量明顯增加(P0.05);模型組大鼠與同時(shí)期對照組相比脂肪組織脂聯(lián)素蛋白含量表達(dá)下降,轉(zhuǎn)染組與同時(shí)期模型大鼠相比明顯增高(P0.05)。結(jié)論:用高脂肪含量的飼料喂養(yǎng)12周成功創(chuàng)建了SD大鼠非酒精性脂肪性肝炎的模型;慢病毒介導(dǎo)的大鼠脂肪組織中CMKLR1過表達(dá)可顯著改善SD大鼠非酒精性脂肪性肝炎時(shí)肝組織學(xué)改變。
【關(guān)鍵詞】：非酒精性脂肪性肝炎 趨化因子樣受體1 凱莫瑞 脂聯(lián)素
【學(xué)位授予單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R575.1
【目錄】：

• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 常用縮寫詞中英文對照表10-11
• 前言11-13
• 1 材料與方法13-18
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物13
• 1.2 動(dòng)物分組及處理13
• 1.3 指標(biāo)檢測的主要試劑、儀器和方法13-17
• 1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法17-18
• 2 結(jié)果18-21
• 2.1 大鼠體重、肝指數(shù)的變化18
• 2.2 大鼠肝組織形態(tài)學(xué)變化18
• 2.3 大鼠血清中凱莫瑞、脂聯(lián)素變化18-19
• 2.4 大鼠脂肪組織中CMKLR1、脂聯(lián)素基因的表達(dá)變化19
• 2.5 大鼠脂肪組織中CMKLR1、脂聯(lián)素蛋白含量的變化19-21
• 3 討論21-25
• 3.1 非酒精性脂肪性肝炎動(dòng)物模型的建立21
• 3.2 CMKLR1 過表達(dá)在大鼠NASH時(shí)脂肪組織中的作用及意義21-25
• 4 結(jié)論25-26
• 參考文獻(xiàn)26-29
• 綜述29-34
• 參考文獻(xiàn)32-34
• 附圖34-38
• 致謝38-39
• 在學(xué)期間承擔(dān)/參與的科研課題與研究成果39-40
• 個(gè)人簡歷40

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 吳靜;盧慧玲;胡秀芬;梁曉燕;林漢華;王宏偉;;3T3-L1前脂肪細(xì)胞煙堿樣膽堿能受體α7亞型功能狀態(tài)對chemerin及其受體chemerinR基因表達(dá)的影響[J];中國動(dòng)脈硬化雜志;2008年06期

2 段曉燕;范建高;;2010歐洲肝病學(xué)會非酒精性脂肪性肝病專家共識簡介[J];中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版);2012年07期

  本文關(guān)鍵詞：CMKLR1過表達(dá)在大鼠非酒精性脂肪性肝炎脂肪組織中的作用及意義，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：390479