發(fā)布時(shí)間：2024-01-30 20:58

　　自身免疫性胰腺炎(AIP)是一種IgG4相關(guān)性疾病,往往伴有血清IgG4水平增高和胰腺外器官損傷,占所有慢性胰腺疾病的2%左右。由于胰頭腫大和膽道后壁擴(kuò)張,臨床上多表現(xiàn)為梗阻性黃疸。血清IgG4是目前唯一公認(rèn)的診斷自身免疫性胰腺炎的血清學(xué)標(biāo)志物。當(dāng)前,自身免疫性胰腺炎的發(fā)病原因及IgG4在疾病中的作用仍不清楚。精典抗體理論認(rèn)為：一個(gè)成熟的漿細(xì)胞能夠產(chǎn)生一種由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈(κ鏈或λ鏈)組成的完全對(duì)稱性的抗體分子。在過去的10年中,越來越多的研究證明,IgG4是一種動(dòng)態(tài)的抗體分子,能夠通過“半分子”(通過二硫鍵連結(jié)的一條重輕鏈對(duì))交換的作用形成具有兩種抗原結(jié)合位點(diǎn)的非對(duì)稱性抗體。最近的一項(xiàng)研究表明,正常人血清中含有大量的IgG4亞型構(gòu)成的κ/λ雜合抗體,這種分子由兩條IgG4類型的重鏈和一條κ輕鏈和一條λ輕鏈組成。因?yàn)樽陨砻庖咝砸认傺淄ǔ０橛醒錓gG4濃度的升高,所以我們嘗試研究雜合抗體對(duì)于AIP的診斷以及與胰腺癌的鑒別診斷價(jià)值。我們建立了一種檢測(cè)人血清雜合抗體的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法。首先,利用抗人λ輕鏈的單克隆抗體包被ELISA板,再利用過氧化...

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖３．用于雜合抗體檢測(cè)的雙抗體夾也酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)??

３．用于雜合抗體檢測(cè)的雙抗體夾也酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)??ｄｏｕｂｌｅ－ａｎｔｉｂｏｄｙ?ｓａｎｄｗｉｃｈ?ｅｎｚｙｍｅ－ｌｉｎｋｅｄ?ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ?ａｓｓａｙｔｅｃｔｉｏｎ??件下巧測(cè)１０例健康體檢者和１０例ＡＩＰ血清雜合抗體??酸鹽包被緩沖液稀釋抗人ｌａｍｂｄａ單克隆....

圖４．競(jìng)爭(zhēng)抑制實(shí)驗(yàn)??Ａ：不同濃度的未標(biāo)記抗ｋａｐｐａ抗體作為競(jìng)爭(zhēng)抑制分子與ＨＲＰ標(biāo)記的抗ｋａｐｐａ抗體??

信號(hào)降低越明顯。如果ａｎｔｉ－ｋａｐｐａ－ＨＲＰ僅能夠與ｋａｐｐａ輕鏈反應(yīng)，不能夠與ｌａｍｂｄａ??輕鏈反應(yīng)（即不與ｌａｍｂｄａ輕鏈存在交叉反應(yīng)），則加入游離的ａｎｔｉ－ｌａｍｂｄａ抗體不??能夠?qū)z測(cè)信號(hào)帶來影響�；驹硪妶D４。??化?Ｉ?人木柄?ｌｉ?化?／?＼?化?Ｉ、料....

圖６．不同包被緩沖液對(duì)雜合抗體吸光度值影響的曲線圖??注：橫坐標(biāo)：血清稀釋度；縱坐標(biāo)：吸光度值（ＯＤ４５０／６２０ｍｎ）??

抗人ｌａｍｂｄａ抗體分別用Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ緩沖液（０．０１Ｍ，ｐＨ８．５）、憐酸鹽包被緩沖??液（０．０１Ｍ，ｐＨ７．４）和碳酸鹽包被緩沖液（０．０５Ｍ，ｐＨ９．６）包被后進(jìn)行陽性血清??雜合抗體檢測(cè)，結(jié)果如表７和圖６所示，Ｈ種包被緩沖液的包被效果差異不大，碳??酸鹽包被緩沖液（....

圖７．不同封閉液對(duì)雜合抗體吸光度影響的曲線圖??注：橫坐標(biāo)：血清稀釋度；縱坐標(biāo)：吸光度值（〇Ｄ４５０／６２０ｎｍ）??

２．２．２最佳封閉液的確定??選用３種不同的封閉液封閉效果均較理想，１％ＢＳＡ／ＰＢＳ和２０％小牛血清／ＰＢＳ??封閉液的封閉效果略優(yōu)于１％明膠／ＰＢＳ封閉液（見表８和

本文編號(hào)：3890384