外源性Smad-7聯(lián)合TIMP-lsiRNA對(duì)大鼠肝纖維化干預(yù)治療的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2023-11-08 20:10
目的: 本研究復(fù)制肝纖維化大鼠模型,通過(guò)腹腔注射經(jīng)脂質(zhì)體包埋的重組Smad-7與TIMP-1siRNA真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒,對(duì)肝纖維化大鼠進(jìn)行干預(yù)治療,分析兩種質(zhì)粒及聯(lián)合作用對(duì)大鼠肝纖維化的影響。 材料和方法: 1.四氯化碳復(fù)合因素法建立肝纖維化大鼠模型:40%四氯化碳棉籽油溶液給大鼠皮下注射,0.3 mL/100 g體重(首次劑量0.5 mL/100 g),后每隔4天注射一次,每次3ml/kg,共注射12次,20%乙醇溶液作為唯一飲用液體,并給予高脂高膽固醇飼料。設(shè)立正常對(duì)照組大鼠,同期皮下注射生理鹽水,劑量同實(shí)驗(yàn)組,采用標(biāo)準(zhǔn)飼養(yǎng)方法。 2.重組質(zhì)粒的導(dǎo)入:各干預(yù)組及對(duì)照組采用脂質(zhì)體包埋法分別將Smad-7/pcDNA3.1 (+)、TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)重組質(zhì)粒及pcDNA3.1(+)質(zhì)粒各100μtg導(dǎo)入大鼠肝纖維化模型。S組采用Smad-7/pcDNA3.1 (+)質(zhì)粒;T組采用TIMP-1 SiRNA/pcDN A3.1 (+)質(zhì)粒;S+T組采用Smad-7/pcDNA3.1 (+)+TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)質(zhì)粒;空質(zhì)粒對(duì)照組給予pc...
【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
中英文縮略表
前言
第一部分 動(dòng)物模型的制備及外源基因的導(dǎo)入
材料與方法
1材料與試劑
2主要實(shí)驗(yàn)儀器
3方法
結(jié)果
第二部分 Smad-7與TIMP-1siRNA表達(dá)質(zhì)粒聯(lián)合作用對(duì)大鼠肝纖維化的影響
一、免疫組化法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物肝組織中Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)
材料與方法
結(jié)果
二、RT-PCR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝組織中Smad-2 mRNA、TIMP-1 mRNA的表達(dá)
材料與方法
結(jié)果
三、Western blot檢測(cè)各組各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝組織中Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
參考文獻(xiàn)
致謝
作者簡(jiǎn)歷
在學(xué)期間發(fā)表的文章
獲獎(jiǎng)情況
導(dǎo)師評(píng)閱表
本文編號(hào):3861660
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前言
第一部分 動(dòng)物模型的制備及外源基因的導(dǎo)入
材料與方法
1材料與試劑
2主要實(shí)驗(yàn)儀器
3方法
結(jié)果
第二部分 Smad-7與TIMP-1siRNA表達(dá)質(zhì)粒聯(lián)合作用對(duì)大鼠肝纖維化的影響
一、免疫組化法檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物肝組織中Ⅲ型膠原蛋白的表達(dá)
材料與方法
結(jié)果
二、RT-PCR檢測(cè)各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝組織中Smad-2 mRNA、TIMP-1 mRNA的表達(dá)
材料與方法
結(jié)果
三、Western blot檢測(cè)各組各實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝組織中Ⅰ型膠原蛋白的表達(dá)
材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
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致謝
作者簡(jiǎn)歷
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