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外源性Smad-7聯(lián)合TIMP-lsiRNA對大鼠肝纖維化干預治療的實驗研究

發(fā)布時間:2023-11-08 20:10
  目的: 本研究復制肝纖維化大鼠模型,通過腹腔注射經(jīng)脂質(zhì)體包埋的重組Smad-7與TIMP-1siRNA真核細胞表達質(zhì)粒,對肝纖維化大鼠進行干預治療,分析兩種質(zhì)粒及聯(lián)合作用對大鼠肝纖維化的影響。 材料和方法: 1.四氯化碳復合因素法建立肝纖維化大鼠模型:40%四氯化碳棉籽油溶液給大鼠皮下注射,0.3 mL/100 g體重(首次劑量0.5 mL/100 g),后每隔4天注射一次,每次3ml/kg,共注射12次,20%乙醇溶液作為唯一飲用液體,并給予高脂高膽固醇飼料。設(shè)立正常對照組大鼠,同期皮下注射生理鹽水,劑量同實驗組,采用標準飼養(yǎng)方法。 2.重組質(zhì)粒的導入:各干預組及對照組采用脂質(zhì)體包埋法分別將Smad-7/pcDNA3.1 (+)、TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)重組質(zhì)粒及pcDNA3.1(+)質(zhì)粒各100μtg導入大鼠肝纖維化模型。S組采用Smad-7/pcDNA3.1 (+)質(zhì)粒;T組采用TIMP-1 SiRNA/pcDN A3.1 (+)質(zhì)粒;S+T組采用Smad-7/pcDNA3.1 (+)+TIMP-1SiRNA/pcDNA3.1(+)質(zhì)粒;空質(zhì)粒對照組給予pc...

【文章頁數(shù)】:63 頁

【學位級別】:碩士

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英文摘要
中英文縮略表
前言
第一部分 動物模型的制備及外源基因的導入
    材料與方法
        1材料與試劑
        2主要實驗儀器
        3方法
    結(jié)果
第二部分 Smad-7與TIMP-1siRNA表達質(zhì)粒聯(lián)合作用對大鼠肝纖維化的影響
    一、免疫組化法檢測各實驗組動物肝組織中Ⅲ型膠原蛋白的表達
        材料與方法
        結(jié)果
    二、RT-PCR檢測各實驗動物肝組織中Smad-2 mRNA、TIMP-1 mRNA的表達
        材料與方法
        結(jié)果
    三、Western blot檢測各組各實驗動物肝組織中Ⅰ型膠原蛋白的表達
        材料與方法
        結(jié)果
討論
結(jié)論與展望
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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