目的:明確TGF-β1是否誘導(dǎo)了人肝星狀細胞LX-2中HMGA1基因的表達,是否活化ERK1/2和Akt信號通路,TGF-β1是否通過ERK1/2和(或)Akt通路促進HMGA1基因的表達。方法:1、以體外培養(yǎng)的LX-2作為研究對象,經(jīng)血清饑餓處理后,加入終濃度分別為0ng/ml、1ng/ml、5ng/ml、10ng/ml的TGF-β1孵育,24小時后收集細胞,提取LX-2細胞的總RNA,用Realtime-qPCR法檢測各組細胞中HMGA1和HMGA2的mRNA表達情況。2、以5ng/ml的TGF-β1及ERK1/2和Akt通路抑制劑(分別為PD98059和MK2206)處理LX-2細胞,設(shè)正常對照組、TGF-β1刺激組、TGF-β1+DMSO陰性對照組、TGF-β1+PD98059(MK2206)處理組,采用western blot檢測各組細胞中pERK1/2、pAkt、ERK1/2、Akt的蛋白表達情況。3、用5ng/ml的TGF-β1及PD98059和MK2206處理LX-2細胞,設(shè)正常對照組、TGF-β1刺激組、TGF-β1+DMSO陰性對照組、TGF-β1+MK2206處理...

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
中英文縮略詞表
第1章 前言
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 主要試劑和材料
        2.1.3 主要儀器設(shè)備
    2.2 實驗方法
        2.2.1 主要試劑的配制方法
        2.2.2 人肝星狀細胞株LX-2 的培育
        2.2.3 TGF-β1 濃度梯度對HMGA1及HMGA2表達的影響
        2.2.4 TGF-β1 對ERK1/2 和Akt通路的活化作用
        2.2.5 TGF-β1 通過ERK1/2 通路促進HMGA1的表達
        2.2.6 Realtime-qPCR檢測
        2.2.7 WesternBlot檢測
        2.2.8 統(tǒng)計學(xué)方法
第3章 結(jié)果
    3.1 TGF-β1 對LX-2 細胞中HMGA1和HMGA2的mRNA表達的影響
    3.2 TGF-β1 對LX-2 細胞中p-ERK1/2 和p-Akt信號通路的活化作用
    3.3 TGF-β1 通過ERK1/2 信號通路促進了HMGA1基因的表達
第4章 討論
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻



本文編號：3827625