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多重媒介探針熔解曲線分析技術(shù)在胃腸道病原體診斷中的應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2023-05-11 00:17
  感染性腹瀉(infectious diarrhea)是指由細(xì)菌、病毒、真菌以及寄生蟲而引起的腹瀉。由于腹瀉病人的臨床癥狀極為相似,難以根據(jù)癥狀鑒定出導(dǎo)致腹瀉的病原體,使得臨床醫(yī)生無法擬定針對性的治療方案。目前已經(jīng)報(bào)道的文獻(xiàn)中少有同時(shí)檢測細(xì)菌和病毒的相關(guān)研究。本論文采用媒介探針結(jié)合熔解曲線分析技術(shù),建立了一管檢測12種細(xì)菌、6種病毒以及一種血清型的快速分析方法。在第一章中,第一節(jié)介紹了感染性腹瀉的背景、臨床表現(xiàn)、發(fā)病機(jī)制以及抗菌藥物的治療;第二節(jié)介紹了檢測胃腸道病原體常用診斷技術(shù);第三節(jié)介紹了多重媒介探針結(jié)合熔解曲線分析技術(shù)的原理以及胃腸道病原體靶標(biāo)基因的選擇。第二章為材料與方法部分包括所用的儀器與試劑、質(zhì)粒的構(gòu)建、引物及探針的設(shè)計(jì)、單重及多重體系的建立、靈敏度考察、特異性考察、重復(fù)性考察、混合感染識別能力考察以及臨床評價(jià)。第三章介紹了本體系的性能考察以及標(biāo)本的檢測結(jié)果。本論文以細(xì)菌和病毒為檢測對象,建立了一管5色29重體系。檢測的靈敏度可以達(dá)到50拷貝/反應(yīng),部分對象可達(dá)5拷貝/反應(yīng)。體系的重復(fù)性好,熔點(diǎn)的CV值最大為0.78%,其他均小于0.5%。本體系檢測了深圳疾病預(yù)防控制中心收集...

【文章頁數(shù)】:70 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
    第一節(jié) 感染性腹瀉和胃腸道病原體
        1.1 感染性腹瀉概述
        1.2 感染性腹瀉臨床表現(xiàn)
        1.3 感染性腹瀉發(fā)病機(jī)制
        1.4 感染性腹瀉抗菌藥物治療
    第二節(jié) 胃腸道病原體常用診斷技術(shù)
        2.1 分離培養(yǎng)法
        2.2 電鏡法
        2.3 免疫學(xué)檢測技術(shù)
        2.4 TOF MS技術(shù)
        2.5 PCR檢測技術(shù)
    第三節(jié) 本論文的研究目的和內(nèi)容
        3.1 多重媒介探針熔解曲線分析技術(shù)原理
        3.2 胃腸道病原體靶標(biāo)基因的選擇
第二章 材料與方法
    第一節(jié) 儀器與試劑
        1.1 儀器
        1.2 試劑
    第二節(jié) 多重媒介探針熔解曲線技術(shù)在胃腸道病原體診斷中的體系建立
        2.1 質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的構(gòu)建
        2.2 引物和探針設(shè)計(jì)
        2.3 單重檢測體系的建立
        2.4 多重檢測體系的建立
        2.5 分析靈敏度考察
        2.6 特異性考察
        2.7 重復(fù)性考察
        2.8 混合感染識別能力考察
        2.9 臨床評價(jià)
第三章 結(jié)果與分析
    第一節(jié) 一管五色檢測體系的設(shè)計(jì)
    第二節(jié) 單重檢測體系的建立
    第三節(jié) 多重檢測體系的建立
    第四節(jié) 多重媒介探針熔解曲線技術(shù)在胃腸道病原體診斷中的性能考察
        4.1 分析靈敏度考察
        4.2 特異性考察
        4.3 重復(fù)性考察
        4.4 混合感染識別能力考察
        4.5 臨床標(biāo)本評價(jià)
        4.6 討論
參考文獻(xiàn)
附表
英文縮寫索引
致謝



本文編號:3813776

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