慢性重型乙型肝炎(Chronic severe hepatitis B, CSHB)是在慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B, CHB)基礎(chǔ)上出現(xiàn)肝細胞大量炎性壞死引起的肝衰竭,又稱為慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure),發(fā)病兇險、病情危重,搶救治療難度大,可引起各種并發(fā)癥,死亡率高。慢性重型乙型肝炎發(fā)病是病毒和機體兩方面相互作用失衡的結(jié)果,但具體機制尚未闡明。乙型肝炎病毒(hepatitis B virus, HBV)的前C/基本核心啟動子(basal core promoter, BCP)區(qū)變異可以影響病毒e抗原(HBeAg)和病毒的復(fù)制力,有研究者認為與慢性乙型肝炎的重癥化相關(guān),但也有不同的結(jié)果。由于以往研究的樣本量較小(均小于70例)和方法的敏感性不夠,得出的結(jié)論難以明確。本實驗的目的是通過大樣本分析CHB和CSHB患者樣本,明確HBV前C/BCP區(qū)變異特點,并分析這些位點變異對乙型肝炎重癥化的影響。研究方法為提取患者血清DNA,用自己建立的巢式PCR方法擴增目標基因片段,PCR產(chǎn)物純化后直接測序,分析了10個熱點變異位...

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 引言
    1.1 HBV 結(jié)構(gòu)與復(fù)制過程
    1.2 慢性重型乙型肝炎簡介
    1.3 慢性重型乙型肝炎研究進展
    1.4 實驗過程與目的
2 材料與方法
    2.1 實驗研究對象
    2.2 HBV DNA 的提取
    2.3 HBV 前 C/BCP 區(qū)序列擴增
    2.4 HBV DNA 的基因型測定
    2.5 實驗注意事項
    2.6 統(tǒng)計學(xué)處理
3 結(jié)果與分析
    3.1 HBV 前 C/BCP 區(qū)序列擴增方法的敏感性和重復(fù)性
    3.2 不同病情患者外周血 HBV DNA 前C/BCP區(qū)10個位點變異情況比較
    3.3 不同病情10 位點非特異性突變情況
    3.4 不同病情10 位點插入/缺失情況
    3.5 不同病情患者前 C/BCP 區(qū)多聯(lián)變異分析
    3.6 不同病情組中10 個位點發(fā)生突變樣品的HBEAG(+)和HBEAG(-)百分率比較
    3.7 10 個突變位點在不同病情組中基因型分布結(jié)果
    3.8 不同病情中10 個位點發(fā)生突變樣品的 HBV DNA 載量比較結(jié)果
    3.9 不同病情中10 個位點發(fā)生突變樣品的 ALT 水平比較結(jié)果
    3.10 不同病情患者中10 個位點發(fā)生突變樣品的TBIL 水平比較結(jié)果
    3.11 不同病情患者中10 個位點發(fā)生突變樣品的PTA 水平比較結(jié)果
    3.12 不同病情患者 HBV DNA 的 A1762T、G1764A 和 G1896A 位點聯(lián)合突變在 HBEAG 陰性患者中的分布
    3.13 HBEAG 陰性不同病情患者三個常見位點聯(lián)合突變時 HBV DNA 比較結(jié)果
    3.14 HBV DNA 為 B 和 C 基因型患者不同病情三個常見位點聯(lián)合突變情況比較
4 討論與結(jié)論
    4.1 討論
    4.2 結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介



本文編號：3766604