【背景】非酒精性脂肪性肝病(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)以肝臟內(nèi)甘油三酯(Triglyceride,TG)含量增加為主,可以進(jìn)展為肝炎、肝纖維化、肝硬化甚至肝癌。在美國(guó)非酒精性脂肪性肝炎是導(dǎo)致肝硬化的一個(gè)很重要的原因,其相關(guān)的肝硬化也已經(jīng)成為目前肝移植的第二大指征。在我國(guó)NAFLD發(fā)病率逐年升高,且呈現(xiàn)出年輕化趨勢(shì)。NAFLD患者主要表現(xiàn)出肝臟中TG、膽固醇等脂類以脂滴的形式大量堆積而導(dǎo)致的脂肪變性,同時(shí)伴或不伴有外周血中TG、膽固醇等升高。脂肪變性的主要原因是肝細(xì)胞脂肪酸的攝取和TG的合成增加,TG分解和脂肪酸輸出、氧化減少。因此,以脂滴形式儲(chǔ)存的TG、膽固醇等脂質(zhì)的分解障礙在NAFLD疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中扮演重要角色。傳統(tǒng)的脂滴分解主要指脂酶的脂解作用。而近年來(lái)自噬在脂解中的作用已被越來(lái)越多的研究證實(shí)。2009年自噬與脂滴脂解之間的聯(lián)系首次被證實(shí),研究發(fā)現(xiàn),無(wú)論是在體內(nèi)還是體外試驗(yàn)中,抑制自噬能夠增加細(xì)胞內(nèi)TG和脂滴的含量,自噬功能的喪失能夠減少TG的分解。自噬主要包括大自噬、分子伴侶介導(dǎo)的自噬(chaperone-mediated...

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
縮略語(yǔ)表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻(xiàn)回顧
第一部分 Lamp2a與Plin5在脂肪性肝病中的表達(dá)存在負(fù)相關(guān)
    1 材料
        1.1 蘇木素-伊紅染色相關(guān)試劑
        1.2 蛋白定量、Western-blot相關(guān)的試劑
        1.3 免疫組化相關(guān)試劑
        1.4 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        1.5 標(biāo)本來(lái)源
        1.6 主要儀器
    2 方法
        2.1 蘇木素-伊紅染色(H&E染色)
        2.2 組織蛋白提取
        2.3 Western-blot
        2.4 免疫組織化學(xué)
    3 結(jié)果
    4 討論
第二部分 Lamp2a影響Plin5的降解及脂滴的分解
    1 材料
        1.1 蛋白定量、Western-blot相關(guān)的試劑
        1.2 免疫組化相關(guān)的試劑
        1.3 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        1.4 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)材料
        1.5 細(xì)胞株
        1.6 主要儀器
    2 方法
        2.1 蛋白定量、Western-blot
        2.2 免疫組織化學(xué)
        2.3 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.4 細(xì)胞蛋白提取
        2.5 蛋白濃度測(cè)定
        2.6 油酸的配制
        2.7 Bodipy熒光染色
    3 結(jié)果
    4 討論
第三部分 Plin5通過(guò)CMA途徑降解
    1 材料
        1.1 蛋白定量、Western-blot相關(guān)試劑
        1.2 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)試劑
        1.3 qRT-PCR相關(guān)試劑
        1.4 免疫共沉淀(Co-IP)相關(guān)試劑
        1.5 主要儀器
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞蛋白提取
        2.3 細(xì)胞蛋白濃度測(cè)定
        2.4 Western-blot
        2.5 Trizol法提取細(xì)胞 RNA
        2.6 RNA濃度測(cè)定
        2.7 反轉(zhuǎn)錄
        2.8 qRT-PCR
        2.9 免疫共沉淀(Co-IP)
    3 結(jié)果
    4 討論
小結(jié)
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷和研究成果
致謝



本文編號(hào)：3752418