【目的】 腸道真菌群落是人類腸道功能器官的重要組成部分,對于調(diào)節(jié)腸道健康狀態(tài)發(fā)揮重要作用。肝臟與腸道之間存在著密切的解剖及生理學(xué)關(guān)系,肝臟的功能直接影響腸道功能。本研究從分子水平研究不同乙肝狀態(tài)下腸道真菌菌群的分子生態(tài)結(jié)構(gòu)變化,揭示乙肝患者腸道中真菌菌群的多樣性,以及不同乙肝狀態(tài)下腸道真菌的定性、定量關(guān)系,明確真菌菌群結(jié)構(gòu)變化與乙肝發(fā)展歷程的相關(guān)性,探索腸道真菌菌群失衡與腸道內(nèi)源性感染及肝病重癥化的關(guān)系,為進(jìn)一步研究影響肝病進(jìn)程的關(guān)鍵作用機(jī)制,尋找干預(yù)和阻斷肝病重癥化發(fā)展過程的措施奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 【方法】 1.以乙肝肝硬化患者、慢性乙型肝炎患者、HBV攜帶者、和健康志愿者作為研究對象,采用QIAamp(?)DNA糞便試劑盒-玻璃珠擊打法分別抽提各組研究對象的糞便總DNA,真菌18S rDNA通用引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行18S rRNA基因克隆,構(gòu)建真菌18S rDNA克隆文庫,利用限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)技術(shù)篩選陽性克隆子并進(jìn)行序列分析,利用MEGA4.0等軟件構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹,分析各組研究對象腸道真菌菌群的多樣性和結(jié)構(gòu)特征。 2.建立一種準(zhǔn)確、可靠的監(jiān)測腸道真菌的實(shí)時熒...

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
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目錄
引言
第一部分 乙肝患者腸道真菌菌群多樣性分析
    材料和方法
    結(jié)果
    結(jié)論
第二部分 乙肝患者腸道常見真菌菌種核酸定量分析
    材料和方法
    結(jié)果
    結(jié)論
討論
參考文獻(xiàn)
綜述 分子生物學(xué)技術(shù)在真菌感染診斷中的應(yīng)用
作者簡歷及在學(xué)期間所取得的科研成果



本文編號：3742583