發(fā)布時(shí)間：2023-02-05 13:59

　　研究背景肝臟在膿毒癥中是一把雙刃劍,一方面介導(dǎo)免疫應(yīng)答清除細(xì)菌和毒素,另一方面引起炎癥、免疫抑制和器官損傷。盡管膿毒癥的治療取得了進(jìn)展,但其發(fā)病率和死亡率仍然很高[1]。膿毒癥后的肝功能障礙是膿毒癥患者死亡的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。改善肝功能可降低膿毒癥患者的發(fā)病率和死亡率[2-5]。生長停滯特異性蛋白6(Growth arrest-specific protein 6,Gas6)是一種維生素K依賴的分泌型蛋白,由678個(gè)氨基酸組成,相對(duì)分子質(zhì)量為75k Da。它與蛋白S(Protein S,Pro S)具有43%的相同序列。其為酪氨酸激酶亞家族成員Tyro3、Axl、Mer的配體[6]。Gas6具有廣泛的抑制炎癥的功能,一方面降低TLRs信號(hào),另一方面在炎癥恢復(fù)階段參與巨噬細(xì)胞對(duì)凋亡細(xì)胞的吞噬[7]。有大量研究表明Gas6/TAM可通過直接抑制TLRs,抑制炎癥相關(guān)基因TNF-α、IL-1β、IFN-α和NF-κB的表達(dá)而發(fā)揮抗炎作用。本項(xiàng)目通過LPS/D-Gal N復(fù)制小鼠急性肝損傷模型,通過分子生物學(xué)手段探究Gas6對(duì)LPS/D-Gal N急性肝損傷的作用及機(jī)制。研究內(nèi)容第一部分:LPS/...

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 膿毒癥急性肝損傷小鼠模型的構(gòu)建及Gas6的表達(dá)
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要使用試劑
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)使用主要儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 膿毒癥急性肝損傷模型建立
            2.2.2 標(biāo)本的收集
            2.2.3 血清ALT和 AST的測定
            2.2.4 ELISA法檢測血清炎癥因子表達(dá)
            2.2.5 肝組織病理HE染色流程
            2.2.6 RT-PCR測定Gas
            2.2.7 肝臟氧化應(yīng)激水平分析
            2.2.8 統(tǒng)計(jì)分析
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 動(dòng)物一般狀態(tài)
        3.2 肝功能相關(guān)指標(biāo)
        3.3 炎癥因子水平
        3.4 病理組織改變
        3.5 膿毒癥急性肝損傷肝組織中Gas6表達(dá)情況
        3.6 膿毒癥急性肝損傷氧化應(yīng)激水平分析
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 在膿毒癥急性肝損傷中重組小鼠Gas6的肝臟保護(hù)作用研究
    1 前言
    2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 動(dòng)物模型制備、分組及處理
            2.2.2 肝臟損傷標(biāo)記物測定
            2.2.3 ELISA法檢測血清炎癥因子表達(dá)
            2.2.4 RT-PCR法檢測血清炎癥因子表達(dá)
            2.2.5 肝組織病理HE染色流程
            2.2.6 MPO測定
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 rmGas6對(duì)小鼠一般狀態(tài)及肝功能影響
        3.2 rmGas6對(duì)膿毒癥急性肝損傷模型小鼠的炎癥因子指標(biāo)的影響
        3.3 肝臟組織病理改變
        3.4 膿毒癥急性肝損傷氧化應(yīng)激水平分析
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 重組小鼠Gas6對(duì)膿毒癥急性肝損傷肝臟凋亡的影響及保護(hù)機(jī)制研究
    1.前言
    2.實(shí)驗(yàn)材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)材料與試劑
            2.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.2 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
            2.2.2 western blot檢測
            2.2.3 RT-PCR檢測凋亡相關(guān)指標(biāo)m RNA表達(dá)
            2.2.4 TUNEL染色
    3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.1 凋亡相關(guān)指標(biāo)變化
        3.2 NF-κB相關(guān)指標(biāo)
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
附錄 綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號(hào)：3735095