發(fā)布時間：2023-02-05 13:59

　　研究背景肝臟在膿毒癥中是一把雙刃劍,一方面介導免疫應答清除細菌和毒素,另一方面引起炎癥、免疫抑制和器官損傷。盡管膿毒癥的治療取得了進展,但其發(fā)病率和死亡率仍然很高[1]。膿毒癥后的肝功能障礙是膿毒癥患者死亡的獨立危險因素。改善肝功能可降低膿毒癥患者的發(fā)病率和死亡率[2-5]。生長停滯特異性蛋白6(Growth arrest-specific protein 6,Gas6)是一種維生素K依賴的分泌型蛋白,由678個氨基酸組成,相對分子質(zhì)量為75k Da。它與蛋白S(Protein S,Pro S)具有43%的相同序列。其為酪氨酸激酶亞家族成員Tyro3、Axl、Mer的配體[6]。Gas6具有廣泛的抑制炎癥的功能,一方面降低TLRs信號,另一方面在炎癥恢復階段參與巨噬細胞對凋亡細胞的吞噬[7]。有大量研究表明Gas6/TAM可通過直接抑制TLRs,抑制炎癥相關基因TNF-α、IL-1β、IFN-α和NF-κB的表達而發(fā)揮抗炎作用。本項目通過LPS/D-Gal N復制小鼠急性肝損傷模型,通過分子生物學手段探究Gas6對LPS/D-Gal N急性肝損傷的作用及機制。研究內(nèi)容第一部分:LPS/...

【文章頁數(shù)】：112 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 膿毒癥急性肝損傷小鼠模型的構(gòu)建及Gas6的表達
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 實驗材料與試劑
            2.1.1 實驗動物
            2.1.2 主要使用試劑
            2.1.3 實驗使用主要儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 膿毒癥急性肝損傷模型建立
            2.2.2 標本的收集
            2.2.3 血清ALT和 AST的測定
            2.2.4 ELISA法檢測血清炎癥因子表達
            2.2.5 肝組織病理HE染色流程
            2.2.6 RT-PCR測定Gas
            2.2.7 肝臟氧化應激水平分析
            2.2.8 統(tǒng)計分析
    3 實驗結(jié)果
        3.1 動物一般狀態(tài)
        3.2 肝功能相關指標
        3.3 炎癥因子水平
        3.4 病理組織改變
        3.5 膿毒癥急性肝損傷肝組織中Gas6表達情況
        3.6 膿毒癥急性肝損傷氧化應激水平分析
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 在膿毒癥急性肝損傷中重組小鼠Gas6的肝臟保護作用研究
    1 前言
    2 實驗材料與方法
        2.1 實驗材料與試劑
            2.1.1 實驗動物
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 實驗儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 動物模型制備、分組及處理
            2.2.2 肝臟損傷標記物測定
            2.2.3 ELISA法檢測血清炎癥因子表達
            2.2.4 RT-PCR法檢測血清炎癥因子表達
            2.2.5 肝組織病理HE染色流程
            2.2.6 MPO測定
    3 實驗結(jié)果
        3.1 rmGas6對小鼠一般狀態(tài)及肝功能影響
        3.2 rmGas6對膿毒癥急性肝損傷模型小鼠的炎癥因子指標的影響
        3.3 肝臟組織病理改變
        3.4 膿毒癥急性肝損傷氧化應激水平分析
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 重組小鼠Gas6對膿毒癥急性肝損傷肝臟凋亡的影響及保護機制研究
    1.前言
    2.實驗材料與方法
        2.1 實驗材料與試劑
            2.1.1 實驗動物
            2.1.2 主要試劑
            2.1.3 實驗儀器
        2.2 實驗方法
            2.2.1 實驗動物分組
            2.2.2 western blot檢測
            2.2.3 RT-PCR檢測凋亡相關指標m RNA表達
            2.2.4 TUNEL染色
    3 實驗結(jié)果
        3.1 凋亡相關指標變化
        3.2 NF-κB相關指標
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性自我評價
參考文獻
附錄 綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3735095