研究目的: 通過不同基因型的幽門螺桿菌（Helicobacter Pylori,H.pylori）培養(yǎng)上清作用人胃黏膜上皮細(xì)胞（GES-1）,研究細(xì)胞形態(tài)、凋亡和增殖及P21WAF1、Bax、PTEN、PI3K、p-Akt表達(dá)的變化,從而在體外探討H. pylori對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞的影響及其機(jī)制,為H.pylori相關(guān)疾病的分子治療提供新的靶點(diǎn)和方向。 研究方法: 根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,分組如下:（1）不同濃度NCTC11637 H.pylori上清液的實(shí)驗(yàn)組,濃度分別為A組（1.3875mg/ml）,B組（2.775mg/ml）,C組（5.55mg/ml）;（2）不同濃度NCTC11639H.pylori上清液的實(shí)驗(yàn)組,濃度分別為A（1.875mg/ml）,B（3.75mg/ml）,C（7.5mg/ml）;（3）陰性對(duì)照組（H.pylori培養(yǎng)液）。各組作用GES-1細(xì)胞時(shí)間均為24h、48h、72h,用倒置顯微鏡和透射電子顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài);用四唑藍(lán)（MTT）比色試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率;用RT-PCR檢測(cè)mRNA的表達(dá);用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)蛋白的表達(dá)。 ... 

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 細(xì)胞株和菌株
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 方法
        2.2.1 GES-1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 H.pylori 培養(yǎng)及 H.pylori 培養(yǎng)上清液的制備
        2.2.3 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液作用 GES-1 細(xì)胞
        2.2.4 MTT 法檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制率
        2.2.5 透射電鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)
        2.2.6 RT-PCR 檢測(cè) PTEN、Bax、P21~(WAF1)m RNA
        2.2.7 免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè) PTEN、PI3K、p-AKT、Bax 蛋白(PV-9000 二步法 免疫組化檢測(cè)試劑)
        2.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) GES-1 細(xì)胞形態(tài)的影響
    3.2 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) GES-1 細(xì)胞增殖的影響
    3.3 不同基因型H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì)PTEN、Bax 及P21~(WAF1)mRNA 表達(dá)的影響
    3.4 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) PTEN、PI3K、磷酸化 Akt、 Bax 蛋白表達(dá)的影響
第4章 討論
    4.1 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) GES-1 細(xì)胞增殖及凋亡的影響
    4.2 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清液對(duì) GES-1 細(xì)胞內(nèi) P21~(WAF1) 的影響
    4.3 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清對(duì) GES-1 細(xì)胞內(nèi) Bax 的影響
    4.4 不同基因型 H.pylori 培養(yǎng)上清對(duì) GES-1 細(xì)胞內(nèi) PI3K/Akt 信號(hào)通 路的影響
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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