炎癥性腸�。↖nflammatory Bowel Disease，IBD）是一類非特異性腸道慢性炎癥疾病的統(tǒng)稱，主要分為克羅恩疾�。–rohn’s Disease，CD）和潰瘍性結(jié)腸炎（UlcerativeColitis，UC）兩種，可導(dǎo)致患者腹瀉、腹痛，甚至有誘發(fā)結(jié)腸癌的風(fēng)險(xiǎn)。免疫因素在該類疾病發(fā)病機(jī)制中占有重要地位，與T細(xì)胞免疫應(yīng)答過(guò)激反應(yīng)相關(guān)，出現(xiàn)免疫穩(wěn)態(tài)失衡和CD4+T細(xì)胞亞群功能紊亂被認(rèn)為是引起炎癥性腸病的重要因素。本課題以TNBS誘導(dǎo)的小鼠IBD為模型，研究新型免疫抑制劑雷帕霉素的治療作用，并探討其相關(guān)的免疫學(xué)機(jī)制，為臨床炎癥性腸病的防治提供新的思路和方向。 研究目的： 觀察免疫抑制劑雷帕霉素對(duì)TNBS誘導(dǎo)IBD的治療效果，探討其可能存在的免疫學(xué)機(jī)制；并采用替代活化巨噬細(xì)胞（AAM）過(guò)繼治療，檢測(cè)其在IBD中的作用及相關(guān)機(jī)制，為臨床IBD治療新途徑提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 研究方法： 建立TNBS誘導(dǎo)的小鼠IBD為模型，觀察免疫抑制劑雷帕霉素的治療作用。依據(jù)組織病理學(xué)檢查判斷雷帕霉素治療效果，流式細(xì)胞術(shù)測(cè)定脾臟和腸系膜淋巴結(jié)中T細(xì)胞亞群變化，RT-PCR... 

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 序言
第二章 雷帕霉素對(duì)炎癥性腸病的治療效果
    2.1 前言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 主要試劑
        2.2.3 主要儀器設(shè)備
        2.2.4 主要溶液配制
    2.3 實(shí)驗(yàn)方法
        2.3.1 TNBS 誘導(dǎo)的 IBD 模型建立
        2.3.2 RAPA 給藥治療 IBD
        2.3.3 腸組織 H&E 染色
        2.3.4 結(jié)腸炎嚴(yán)重程度評(píng)估
    2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        2.4.1 體重變化結(jié)果
        2.4.2 TNBS 腸炎 DAI 評(píng)分
        2.4.3 組織學(xué)觀察與病理評(píng)分
    2.5 討論
第三章 雷帕霉素誘導(dǎo)的調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞的在治療中的作用
    3.1 前言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        3.2.2 主要試劑
        3.2.3 主要儀器設(shè)備
        3.2.4 主要溶液配制
    3.3 實(shí)驗(yàn)方法
        3.3.1 模型建立
        3.3.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) Treg、Th1、Th2 和 Th17 細(xì)胞
        3.3.3 PCR 檢測(cè)各種細(xì)胞因子表達(dá)
    3.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.4.1 RAPA 對(duì)小鼠 Treg、Th1、Th2 和 Th17 細(xì)胞群數(shù)量的影響
        3.4.2 RAPA 對(duì)細(xì)胞因子基因表達(dá)譜的影響
    3.5 討論
第四章 雷帕霉素誘導(dǎo)替代活化巨噬細(xì)胞(AAM)的研究
    4.1 前言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        4.2.2 主要試劑
        4.2.3 主要儀器設(shè)備
        4.2.4 主要溶液配制
    4.3 實(shí)驗(yàn)方法
        4.3.1 腹腔巨噬細(xì)胞的分離
        4.3.2 RAPA 體內(nèi)誘導(dǎo) AAM
        4.3.3 RAPA 體外誘導(dǎo) AAM
        4.3.4 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) AAM 細(xì)胞
        4.3.5 體外培養(yǎng)巨噬細(xì)胞 RNA 的提取
        4.3.6 PCR 檢測(cè)各種細(xì)胞因子表達(dá)
    4.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        4.4.1 雷帕霉素體內(nèi)誘導(dǎo) AAM 的生成
        4.4.2 雷帕霉素體外誘導(dǎo) AAM 的生成
    4.5 討論
第五章 替代活化巨噬細(xì)胞（AAM）在 IBD 治療中的作用
    5.1 前言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.1 主要實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 主要試劑
        5.2.3 主要儀器設(shè)備
        5.2.4 主要溶液配制
    5.3 實(shí)驗(yàn)方法
        5.3.1. TNBS 誘導(dǎo)的 IBD 模型建立
        5.3.2. RAPA 體內(nèi)誘導(dǎo) AAM
        5.3.3. 腹腔巨噬細(xì)胞的分離
        5.3.4. AAM 過(guò)繼治療
        5.3.5. 腸組織 H&E 染色
        5.3.6. 結(jié)腸炎嚴(yán)重程度評(píng)估
        5.3.7. 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) Treg、Th1、Th2 和 Th17 細(xì)胞
        5.3.8. PCR 檢測(cè)各種細(xì)胞因子表達(dá)
    5.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        5.4.1 體重變化結(jié)果
        5.4.2 TNBS 腸炎 DAI 評(píng)分
        5.4.3 組織學(xué)觀察評(píng)分
        5.4.4 T 淋巴細(xì)胞亞群流式測(cè)定
        5.4.5 腸組織各炎性因子基因表達(dá)結(jié)果
    5.5 討論
全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
附錄 1 英文縮寫語(yǔ)中文對(duì)照
附錄 2 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]我國(guó)炎癥性腸病研究的概況和策略[J]. 歐陽(yáng)欽.  四川醫(yī)學(xué). 2005(04)



本文編號(hào)：3690511