目的研究白細(xì)胞介素1β（IL-1β）和腫瘤壞死因子α（TNF-α）對SD大鼠腸平滑肌細(xì)胞（ISMC）膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（GDNF）及其受體原癌基因受體酪氨酸激酶（Ret）和GDNF家族受體α1（GFRα1）表達(dá)的影響。方法改良酶消化法分離SD大鼠ISMC,免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測觀察平滑肌細(xì)胞特異性標(biāo)志物α平滑肌肌動蛋白（α-SMA）及結(jié)蛋白（desmin）的表達(dá);單獨或聯(lián)合使用IL-1β和TNF-α處理ISMC 48 h,用實時定量PCR檢測各組GDNF、 Ret及GFRα1 mRNA相對表達(dá)水平。結(jié)果利用改良酶消化法獲得了高純度的大鼠ISMC,其α-SMA及desmin陽性率均大于95%;與空白對照組相比, TNF-α能促進(jìn)ISMC表達(dá)GDNF,抑制其表達(dá)GFRα1,而對Ret的表達(dá)無明顯影響,IL-1β能抑制ISMC表達(dá)Ret,對GDNF及GFRα1的表達(dá)無明顯影響;IL-1β聯(lián)合TNF-α能顯著促進(jìn)ISMC表達(dá)GDNF,抑制其表達(dá)Ret及GFRα1。結(jié)論 IL-1β聯(lián)合TNF-α能促進(jìn)ISMC表達(dá)GDNF,抑制其表達(dá)GDNF受體Ret及GFRα1。 

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【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 ISMC的分離、培養(yǎng)
        1.2.2 免疫細(xì)胞化學(xué)染色法檢測培養(yǎng)細(xì)胞α-SMA、 desmin、 GFAP、 CD90的表達(dá)以鑒定ISMC
        1.2.3 實時定量PCR檢測IL-1β、 TNF-α處理后, ISMC的GDNF、 Ret、 GFRα1mRNA水平
        1.2.4 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 ISMC為扁平狀呈明顯“谷-峰”樣生長
    2.2 分離的細(xì)胞表達(dá)α-SMA及desmin, 不表達(dá)GFAP及CD90, 鑒定為ISMC
    2.3 IL-1β聯(lián)合TNF-α可以促進(jìn)ISMC表達(dá)GDNF, 抑制ISMC表達(dá)GFRα1和Ret
3 討論



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