目的探討miR-194-5p對LX-2細(xì)胞增殖、遷移、活化能力的影響以及可能的分子機(jī)制。方法1實(shí)驗(yàn)分為TGF-β₁處理組即刺激組,TGF-β₁未處理組即Ctrl組,qRT-PCR實(shí)驗(yàn)檢測miR-29a-3p、miR-194-5p、miR-22-3p的相對表達(dá)水平。2實(shí)驗(yàn)分為mimics NC組,miR-194-5p mimics組,inhibitor NC組,miR-194-5p inhibitor組,經(jīng)脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染LX-2細(xì)胞,qRT-PCR檢測miR-194-5p的相對表達(dá)水平。3 CCK-8實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞集落形成實(shí)驗(yàn)檢測miR-194-5p對LX-2細(xì)胞增殖能力的影響。4劃痕實(shí)驗(yàn)檢測miR-194-5p對LX-2細(xì)胞遷移能力的影響。5 qRT-PCR檢測miR-194-5p對LX-2細(xì)胞中的α-SMA、Collagen I的mRNA相對表達(dá)水平的影響。6通過Targetscan、miRanda、miRDB三個生物信息學(xué)網(wǎng)絡(luò)網(wǎng)站篩選預(yù)測miR-194-5p的侯選靶基因。7 qRT-PCR檢測miR-194-5p對LX-2細(xì)胞中wnt5a mRN... 

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
英文縮略表
引言
第1章 實(shí)驗(yàn)研究
    1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞、實(shí)驗(yàn)儀器和實(shí)驗(yàn)試劑
        1.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞
        1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        1.1.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
        1.2.1 細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代以及細(xì)胞凍存
        1.2.2 TGF-β1 體外誘導(dǎo)LX-2 細(xì)胞活化
        1.2.3 qRT-PCR檢測miRNAs的相對表達(dá)水平
        1.2.4 qRT-PCR檢測miR-194-5p的轉(zhuǎn)染效率
        1.2.5 CCK-8 實(shí)驗(yàn)檢測miR-194-5p對 LX-2 細(xì)胞增殖能力的影響
        1.2.6 集落形成實(shí)驗(yàn)檢測miR-194-5p對 LX-2 細(xì)胞集落形成的影響
        1.2.7 劃痕實(shí)驗(yàn)檢測miR-194-5p對 LX-2 細(xì)胞遷移能力的影響
        1.2.8 qRT-PCR檢測miR-194-5p對 α-SMA、Collagen I mRNA相對表達(dá)水平的影響
        1.2.9 miR-194-5p靶基因的篩選
        1.2.10 qRT-PCR檢測mi R-194-5p對 wnt5a mRNA相對表達(dá)水平的影響..
        1.2.11 統(tǒng)計(jì)分析
    1.3 結(jié)果
        1.3.1 TGF-β1 誘導(dǎo)LX-2 細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化
        1.3.2 TGF-β1 誘導(dǎo)的LX-2 細(xì)胞中mi RNAs的相對表達(dá)水平
        1.3.3 qRT-PCR檢測miR-194-5p的轉(zhuǎn)染效率
        1.3.4 miR-194-5p對 LX-2 細(xì)胞增殖能力的影響
        1.3.5 miR-194-5p對 LX-2 細(xì)胞集落形成能力的影響
        1.3.6 miR-194-5p對 LX-2 細(xì)胞遷移能力的影響
        1.3.7 miR-194-5p對 α-SMA和 collagenI mRNA相對表達(dá)水平的影響
        1.3.8 miR-194-5p候選靶基因的篩選
        1.3.9 miR-194-5p對 wnt5a mRNA相對表達(dá)水平的影響
    1.4 討論
    參考文獻(xiàn)
第2章 綜述 miRNA與肝纖維化的研究進(jìn)展
    2.1 肝纖維化現(xiàn)狀
    2.2 HSCs與肝纖維化
    2.3 miRNA簡介
    2.4 miRNA與肝纖維化
    2.5 miRNA與肝纖維化信號通路的調(diào)節(jié)
        2.5.1 miRNA參與Gas6/ Axl途徑信號通路
        2.5.2 miRNA參與TGF-β/Smad信號通路
        2.5.3 miRNA參與Wnt信號通路
        2.5.4 其他調(diào)節(jié)機(jī)制
    2.6 討論
    參考文獻(xiàn)
結(jié)論
致謝
導(dǎo)師簡介
作者簡介
學(xué)位論文數(shù)據(jù)集


【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號：3681366