目的構(gòu)建丙型肝炎病毒1b型（HCV1b）非結(jié)構(gòu)蛋白4B（NS4B）的真核表達(dá)載體。研究HCV1b NS4B對(duì)HepG2細(xì)胞凋亡抑制基因Bcl-xL和XIAP表達(dá)水平的影響。方法收集HCV1b RNA陽(yáng)性血清;用Trizol一步法提取HCV1b RNA;RT-PCR法擴(kuò)增HCV1b NS4B基因片段,將其連接入質(zhì)粒pcDNA3.1（-）,構(gòu)建真核表達(dá)載體pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B。用脂質(zhì)體法將重組載體pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞,同時(shí)以轉(zhuǎn)染空載體pcDNA3.1（-）和未轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞作為對(duì)照（三組細(xì)胞分別命名為: pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B組、pcDNA3.1（-）組及空白對(duì)照組）;轉(zhuǎn)染后第48 h,分別用RT-PCR法和Western blot法檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)HCV1b NS4B mRNA和蛋白的表達(dá)以及各組細(xì)胞中Bcl-xL和XIAP的mRNA及蛋白相對(duì)表達(dá)水平。結(jié)果酶切鑒定及DNA測(cè)序鑒定顯示真核表達(dá)載體pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B構(gòu)建成功;RT-PCR及Western blot檢測(cè)到pcDNA3.1（... 

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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中文摘要
Abstract
前言
實(shí)驗(yàn)材料
實(shí)驗(yàn)方法
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄
感謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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