目的構建丙型肝炎病毒1b型（HCV1b）非結構蛋白4B（NS4B）的真核表達載體。研究HCV1b NS4B對HepG2細胞凋亡抑制基因Bcl-xL和XIAP表達水平的影響。方法收集HCV1b RNA陽性血清;用Trizol一步法提取HCV1b RNA;RT-PCR法擴增HCV1b NS4B基因片段,將其連接入質粒pcDNA3.1（-）,構建真核表達載體pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B。用脂質體法將重組載體pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B轉染HepG2細胞,同時以轉染空載體pcDNA3.1（-）和未轉染HepG2細胞作為對照（三組細胞分別命名為: pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B組、pcDNA3.1（-）組及空白對照組）;轉染后第48 h,分別用RT-PCR法和Western blot法檢測細胞內HCV1b NS4B mRNA和蛋白的表達以及各組細胞中Bcl-xL和XIAP的mRNA及蛋白相對表達水平。結果酶切鑒定及DNA測序鑒定顯示真核表達載體pcDNA3.1（-）-HCV1bNS4B構建成功;RT-PCR及Western blot檢測到pcDNA3.1（... 

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【學位級別】：碩士

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前言
實驗材料
實驗方法
實驗結果
討論
結論
參考文獻
綜述
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附錄
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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3669921