本實驗原代分離培養(yǎng)小鼠肝臟Kupffer細胞,采用特異性煙堿型乙酰膽堿受體激動劑——煙堿,觀察膽堿能性抗炎通路激活后對小鼠肝臟Kupffer細胞的影響,并以生存率為指標,評估煙堿對肝臟Kupffer細胞的影響及全身炎癥反應(yīng)的治療作用。第一部分,采用密度梯度離心的方法原代分離培養(yǎng)小鼠肝臟Kupffer細胞,經(jīng)苔盼藍染色和流氏細胞儀對細胞活性和純度進行鑒定;第二部分,采用熒光共聚焦顯微鏡和Western的方法,檢測小鼠肝臟Kupffer細胞中是否存在α7-乙酰膽堿受體（α7-ACh受體）;第三部分,采用Elisa方法,測定給予LPS后,原代分離培養(yǎng)的小鼠肝臟Kupffer細胞上清液和BALB/c小鼠血清中TNF-α、IL-10和HMGB-1的濃度變化;第四部分,將100只BALB/c小鼠（6-8周,雄性）隨機分為四組（LPS組、LPS+Nic組、LPS+Nic+GdCl3組和LPS+Nic+左側(cè)迷走神經(jīng)切斷組）,給予致死量的LPS 15mg/kg,觀察72小時內(nèi)動物死亡率的變化。本實驗結(jié)果證實,小鼠肝臟Kupffer細胞中存在α7-ACh受體,并探討了小鼠肝臟Kupffer細胞在膽堿能性抗... 

【文章來源】：中國人民解放軍海軍軍醫(yī)大學上海市211工程院校

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
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前言
第一部分 小鼠肝臟 Kupffer 細胞的原代分離培養(yǎng)及鑒定
    一、材料與方法
    二、結(jié)果
    三、討論
第二部分 原代分離培養(yǎng)的小鼠肝臟Kupffer細胞中α7-乙酰膽堿受體鑒定
    一、材料與方法
    二、結(jié)果
    三、討論
第三部分 LPS 刺激下小鼠肝臟Kupffer 細胞α7-乙酰膽堿受體對炎癥反應(yīng)的調(diào)控作用
    一、材料與方法
    二、結(jié)果
    三、討論
第四部分 小鼠肝臟Kupffer 細胞及其α7-乙酰膽堿受體對內(nèi)毒素血癥小鼠死亡率的影響
    一、材料與方法
    二、結(jié)果
    三、討論
全文小結(jié)
參考文獻
文獻綜述
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致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]膽堿能抗炎通路對失血性休克大鼠保護作用的研究[J]. 李建國,胡正芳,杜朝暉,周青,賈寶輝,彭周荃,葉小豐,李蓓.  中國危重病急救醫(yī)學. 2005(01)
[4]炎性反應(yīng)反射—膽堿能抗炎通路[J]. 王金榮,王宏偉.  中華神經(jīng)醫(yī)學雜志. 2004(04)
[5]BALB/c鼠枯否細胞的分離培養(yǎng)與鑒定[J]. 張森,萬德森,肖錫賓.  大腸肛門病外科雜志. 2003(02)
[6]肝移植病人術(shù)中低游離型Ca2+血癥及治療探討[J]. 陳杰.  國外醫(yī)學.麻醉學與復蘇分冊. 2001(04)



本文編號：3643497