人胃黏膜抗幽門螺桿菌益生菌的篩選及培養(yǎng)方法研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-14 22:39
目的:幽門螺桿菌(Helicobacte pylori,Hp)是一種常見的胃腸道致病菌,與慢性胃炎、消化性潰瘍、胃黏膜相關(guān)淋巴組織淋巴瘤和胃癌的發(fā)病密切相關(guān)。隨著抗生素耐藥率逐漸增加,傳統(tǒng)Hp根除治療方案的效果逐漸下降。益生菌的抗Hp作用得到大量科學(xué)研究的證實(shí),但目前益生菌主要來源為腸道、乳制品,且其抗Hp效果并不理想。本研究通過選擇性乳酸桿菌分離培養(yǎng)技術(shù)及瓊脂糖微包埋技術(shù)對(duì)人體胃黏膜細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)、鑒定,尋找潛在抗Hp益生菌,探討其益生菌特性及抗Hp作用的潛在機(jī)制。方法:采用乳酸桿菌選擇性分離培養(yǎng)技術(shù)在厭氧條件下對(duì)人體胃黏膜細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)、通過菌落形態(tài)、革蘭氏染色結(jié)果、16S rRNA序列分析及進(jìn)化樹構(gòu)建鑒定菌株。采用酸生存實(shí)驗(yàn),在體外pH2條件下分別培養(yǎng)30min,60min,120min,評(píng)估加氏乳桿菌在低pH條件下的生存能力。采用全基因組測(cè)序技術(shù),對(duì)加氏乳桿菌的基因組一般特性及抗菌肽基因與Hp相關(guān)性進(jìn)行分析。采用瓊脂糖微包埋技術(shù)在有氧條件下,通過過濾、熒光計(jì)數(shù)等方法按1:10比例包埋單個(gè)細(xì)菌,在腦心浸液培養(yǎng)基(Brian Heart Infusion,BHI)培養(yǎng)48h。提...
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一章 胃黏膜加氏乳桿菌的幽門螺桿菌抑制作用
1 材料與方法
1.1 研究對(duì)象
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
1.3 方法
1.3.1 加氏乳桿菌菌株分離培養(yǎng)及鑒定
1.3.2 加氏乳桿菌體外酸生存實(shí)驗(yàn)
1.3.3 加氏乳桿菌基因組測(cè)序
1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 加氏乳桿菌菌株分離及鑒定
2.2 加氏乳桿菌與Hp的相關(guān)性
2.3 加氏乳桿菌的酸耐受特性
2.4 加氏乳桿菌全基因組分析
3 討論
第二章 應(yīng)用瓊脂糖微包埋方法培養(yǎng)胃黏膜菌群
1 材料與方法
1.1 研究對(duì)象
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
1.3 方法
1.3.1 胃黏膜標(biāo)本過濾
1.3.2 制備瓊脂糖乳化微球包埋細(xì)菌
1.3.3 細(xì)菌培養(yǎng)
1.3.4 細(xì)菌鑒定
2 結(jié)果
2.1 瓊脂糖乳化微球包埋細(xì)菌
2.2 細(xì)菌鑒定
2.3 鑒定細(xì)菌分類屬性分析
3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表(附錄)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Participation of microbiota in the development of gastric cancer[J]. Li-Li Wang,Xin-Juan Yu,Shu-Hui Zhan,Sheng-Jiao Jia,Zi-Bin Tian,Quan-Jiang Dong. World Journal of Gastroenterology. 2014(17)
[2]Adjuvant probiotics improve the eradication effect of triple therapy for Helicobacter pylori infection[J]. Yi-Qi Du, Tun Su, Jian-Gao Fan, Yu-Xia Lu, Ping Zheng, Xing-Hua Li, Chuan-Yong Guo, Ping Xu, Yan-Fang Gong, Zhao-Shen Li, Department of Gastroenterology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China, Department of Gastroenterology, Xinhua Hospital, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China, Department of Gastroenterology, Tongji Hospital, Tong Ji University, Shanghai 200092, China, Department of Gastroenterology, Shanghai First People’s Hospital, Shanghai 201620, China, Department of Gastroenterology, Shanghai Eighth People’s Hospital, Shanghai 210035, China , Department of Gastroenterology, Shanghai Tenth People’s Hospital, Shanghai 200072, China, Department of Gastroenterology, Shanghai Songjiang Centeral Hospital, Shanghai 201100, China. World Journal of Gastroenterology. 2012(43)
本文編號(hào):3625396
【文章來源】:青島大學(xué)山東省
【文章頁數(shù)】:68 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一章 胃黏膜加氏乳桿菌的幽門螺桿菌抑制作用
1 材料與方法
1.1 研究對(duì)象
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
1.3 方法
1.3.1 加氏乳桿菌菌株分離培養(yǎng)及鑒定
1.3.2 加氏乳桿菌體外酸生存實(shí)驗(yàn)
1.3.3 加氏乳桿菌基因組測(cè)序
1.3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
2.1 加氏乳桿菌菌株分離及鑒定
2.2 加氏乳桿菌與Hp的相關(guān)性
2.3 加氏乳桿菌的酸耐受特性
2.4 加氏乳桿菌全基因組分析
3 討論
第二章 應(yīng)用瓊脂糖微包埋方法培養(yǎng)胃黏膜菌群
1 材料與方法
1.1 研究對(duì)象
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
1.3 方法
1.3.1 胃黏膜標(biāo)本過濾
1.3.2 制備瓊脂糖乳化微球包埋細(xì)菌
1.3.3 細(xì)菌培養(yǎng)
1.3.4 細(xì)菌鑒定
2 結(jié)果
2.1 瓊脂糖乳化微球包埋細(xì)菌
2.2 細(xì)菌鑒定
2.3 鑒定細(xì)菌分類屬性分析
3 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
綜述參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
縮略詞表(附錄)
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Participation of microbiota in the development of gastric cancer[J]. Li-Li Wang,Xin-Juan Yu,Shu-Hui Zhan,Sheng-Jiao Jia,Zi-Bin Tian,Quan-Jiang Dong. World Journal of Gastroenterology. 2014(17)
[2]Adjuvant probiotics improve the eradication effect of triple therapy for Helicobacter pylori infection[J]. Yi-Qi Du, Tun Su, Jian-Gao Fan, Yu-Xia Lu, Ping Zheng, Xing-Hua Li, Chuan-Yong Guo, Ping Xu, Yan-Fang Gong, Zhao-Shen Li, Department of Gastroenterology, Changhai Hospital, Second Military Medical University, Shanghai 200433, China, Department of Gastroenterology, Xinhua Hospital, Shanghai Jiao Tong University, Shanghai 200240, China, Department of Gastroenterology, Tongji Hospital, Tong Ji University, Shanghai 200092, China, Department of Gastroenterology, Shanghai First People’s Hospital, Shanghai 201620, China, Department of Gastroenterology, Shanghai Eighth People’s Hospital, Shanghai 210035, China , Department of Gastroenterology, Shanghai Tenth People’s Hospital, Shanghai 200072, China, Department of Gastroenterology, Shanghai Songjiang Centeral Hospital, Shanghai 201100, China. World Journal of Gastroenterology. 2012(43)
本文編號(hào):3625396
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