IL-22改善脂多糖誘導(dǎo)的Caco-2單層腸上皮緊密連接損傷
發(fā)布時(shí)間:2022-02-09 06:32
目的緊密連接(TJ)屏障功能障礙在炎癥性腸。↖BD)中起重要作用。據(jù)報(bào)道IL-22對(duì)IBD有直接的保護(hù)作用。研究IL-22對(duì)TJ屏障功能的保護(hù)作用。方法選擇腸上皮Caco-2單層細(xì)胞,分為對(duì)照組、脂多糖(LPS)組、IL-22組、LPS+IL-22組。采用LPS(100μg/mL)或IL-22(100 ng/mL)處理腸上皮Caco-2單層細(xì)胞0、12、24、48 h。Western blot檢測(cè)IL-22受體IL-22R1和TJ蛋白(ZO-1和Occludin)表達(dá)。檢測(cè)Caco-2單層細(xì)胞膜跨膜電阻(TEER)。分析Caco-2單層細(xì)胞被LPS、IL-22處理48 h后的細(xì)胞膜TEER、TJ蛋白變化和免疫熒光方法觀察TJ蛋白在細(xì)胞膜的分布。結(jié)果LPS可上調(diào)Caco-2細(xì)胞中IL-22R1的表達(dá)。LPS可顯著降低Caco-2單層細(xì)胞膜TEER(刺激24 h,下降水平接近50%),差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.001)。IL-22組ZO-1、Occludin表達(dá)水平高于LPS組、LPS+IL-22組,差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P <0.01)。LPS+IL-22組ZO-1、...
【文章來源】:生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2020,24(04)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
LPS或IL-22刺激Caco-2單層細(xì)胞后IL-22R1表達(dá)的電泳圖
LPS顯著降低TEER,刺激24 h,下降水平接近50%;而IL-22并沒有改變Caco-2單分子層中TEER。見圖2。2.2.2 緊密連接蛋白表達(dá)比較
Western blot分析顯示,LPS可導(dǎo)致TJ蛋白ZO-1和Occludin表達(dá)降低(灰度值的比值:ZO-1組0.894、0.677、0.532、0.417,Occludin組0.784、0.502、0.471、0.422);而IL-22對(duì)ZO-1和Occludin蛋白表達(dá)的影響微弱(灰度值的比值:ZO-1組0.899、0.854、0.893、0.917,Occludin組0.938、0.951、0.996、0.979),即IL-22單獨(dú)對(duì)TJ屏障功能幾乎無影響。見圖3。2.3 IL-22與脂多糖對(duì)上皮細(xì)胞的相互作用分析
本文編號(hào):3616527
【文章來源】:生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2020,24(04)
【文章頁數(shù)】:6 頁
【部分圖文】:
LPS或IL-22刺激Caco-2單層細(xì)胞后IL-22R1表達(dá)的電泳圖
LPS顯著降低TEER,刺激24 h,下降水平接近50%;而IL-22并沒有改變Caco-2單分子層中TEER。見圖2。2.2.2 緊密連接蛋白表達(dá)比較
Western blot分析顯示,LPS可導(dǎo)致TJ蛋白ZO-1和Occludin表達(dá)降低(灰度值的比值:ZO-1組0.894、0.677、0.532、0.417,Occludin組0.784、0.502、0.471、0.422);而IL-22對(duì)ZO-1和Occludin蛋白表達(dá)的影響微弱(灰度值的比值:ZO-1組0.899、0.854、0.893、0.917,Occludin組0.938、0.951、0.996、0.979),即IL-22單獨(dú)對(duì)TJ屏障功能幾乎無影響。見圖3。2.3 IL-22與脂多糖對(duì)上皮細(xì)胞的相互作用分析
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