目的緊密連接（TJ）屏障功能障礙在炎癥性腸病（IBD）中起重要作用。據(jù)報道IL-22對IBD有直接的保護作用。研究IL-22對TJ屏障功能的保護作用。方法選擇腸上皮Caco-2單層細(xì)胞,分為對照組、脂多糖（LPS）組、IL-22組、LPS+IL-22組。采用LPS（100μg/mL）或IL-22（100 ng/mL）處理腸上皮Caco-2單層細(xì)胞0、12、24、48 h。Western blot檢測IL-22受體IL-22R1和TJ蛋白（ZO-1和Occludin）表達(dá)。檢測Caco-2單層細(xì)胞膜跨膜電阻（TEER）。分析Caco-2單層細(xì)胞被LPS、IL-22處理48 h后的細(xì)胞膜TEER、TJ蛋白變化和免疫熒光方法觀察TJ蛋白在細(xì)胞膜的分布。結(jié)果LPS可上調(diào)Caco-2細(xì)胞中IL-22R1的表達(dá)。LPS可顯著降低Caco-2單層細(xì)胞膜TEER（刺激24 h,下降水平接近50%）,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.001）。IL-22組ZO-1、Occludin表達(dá)水平高于LPS組、LPS+IL-22組,差異有顯著統(tǒng)計學(xué)意義（P <0.01）。LPS+IL-22組ZO-1、... 

【文章來源】：生物醫(yī)學(xué)工程與臨床. 2020,24(04)

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

LPS或IL-22刺激Caco-2單層細(xì)胞后IL-22R1表達(dá)的電泳圖

LPS顯著降低TEER，刺激24 h，下降水平接近50%；而IL-22并沒有改變Caco-2單分子層中TEER。見圖2。2.2.2 緊密連接蛋白表達(dá)比較

Western blot分析顯示，LPS可導(dǎo)致TJ蛋白ZO-1和Occludin表達(dá)降低（灰度值的比值：ZO-1組0.894、0.677、0.532、0.417,Occludin組0.784、0.502、0.471、0.422）；而IL-22對ZO-1和Occludin蛋白表達(dá)的影響微弱（灰度值的比值：ZO-1組0.899、0.854、0.893、0.917,Occludin組0.938、0.951、0.996、0.979），即IL-22單獨對TJ屏障功能幾乎無影響。見圖3。2.3 IL-22與脂多糖對上皮細(xì)胞的相互作用分析


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