研究背景腸道損傷與腸粘膜屏障功能改變密切相關(guān)，特別是腸粘膜生物屏障及免疫屏障日漸受到重視。炎癥性腸�。↖nflammatory Bowl Desease，IBD）包括克羅恩�。–rohn’s disease，CD）和潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC）的發(fā)病與遺傳背景、免疫調(diào)節(jié)失控和個(gè)體差異以及環(huán)境因素等多方面原因有關(guān)，但最終表現(xiàn)為腸粘膜對(duì)腸道微生物抗原免疫反應(yīng)失常而導(dǎo)致腸粘膜損傷和破壞。資料顯示，IBD發(fā)病率逐年增高，已成為嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量的常見疾病。IBD的傳統(tǒng)治療主要是針對(duì)腸道微生物感染和免疫系統(tǒng)的激活，以非特異性抗炎藥物和免疫抑制劑為主，并輔以抗菌藥物。臨床觀察發(fā)現(xiàn)，上述療法存在明顯的藥物毒性反應(yīng)和全身性副作用，特別是針對(duì)頑固性CD的治療仍缺乏有效的措施，不能改變CD的自然病程。近年來的研究表明，CD的生物是調(diào)整各種炎癥因子水平的有效方法，但確切療效及生物安生性尚待關(guān)注。新近研究顯示，CD發(fā)生的機(jī)制可能與腸道先天免疫反應(yīng)缺陷以及中性粒細(xì)胞、巨噬細(xì)胞功能受損有關(guān)；重組人粒細(xì)胞集落刺激因子（rhG-CSF）、重組人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子（rhGM-C... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：98 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

乳鏈菌表達(dá)系統(tǒng)示意圖

將離心管倒置于濾紙上lmin，以去除殘留的上清。加入冰預(yù)冷的0.lmol幾CaelZ150林l懸浮菌體，置于一700C冰箱備用。2.1.3.2基因拼接:參照我們以前的方法l’21，見圖1一3。具體步驟如下:(l)將22條hGM一CSF寡核昔酸混合按 200nM的終濃度加入 PCRmix中

1乳鏈菌表達(dá)系統(tǒng)pPus的構(gòu)建結(jié)果 1.1PUS基因拼接產(chǎn)物第2次PCR反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng) 1.0%的瓊脂糖凝膠電泳后，發(fā)現(xiàn)有50Obp左右的DNA目的片段，與設(shè)計(jì)的預(yù)期片段相符合。見圖1一5。500bP200bP圖1一 5PUS基因拼接產(chǎn)物電泳圖。 F191一 5ElectroPhoresisofPUS ProductsofPCRassembly M3DNAmarkerladder PUSTheProduetofPUS.圖1一6PUSTA克隆產(chǎn)物EeoRI酶切鑒定電泳圖。 F191一 6ElectroPhoresisoftheTA eolonyProduetsofPUSafter EcoRIexcision 1DNAmarker3，ZThePositive coloniesofPUS， 3Thenegative eo!oniesofPUS.

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]粒-巨噬細(xì)胞集落刺激因子與綠色熒光蛋白融合基因慢病毒載體構(gòu)建[J]. 李先茂,沈麗佳,朱梅剛,李祖國,趙彤.  中國病理生理雜志. 2005(07)
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[3]重組人粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子活性測定標(biāo)準(zhǔn)品的研制[J]. 趙陽,饒春明,張翊,郭瑩,丁有學(xué),王軍志.  中國腫瘤生物治療雜志. 2001(03)
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本文編號(hào)：3610199