發(fā)布時間：2022-01-05 17:12

　　目的：潰瘍性結(jié)腸炎是一種慢性腸道炎癥性疾病，其發(fā)病機(jī)理尚未完全闡明。雙歧桿菌是機(jī)體腸道內(nèi)最重要的生理性有益菌，能通過調(diào)節(jié)UC患者的腸道菌群平衡，對UC的治療效果良好。IL-10是一種負(fù)性炎癥調(diào)控的細(xì)胞因子，能降低UC腸道的炎癥級聯(lián)放大反應(yīng)，緩解UC的腸道炎癥。本實驗繼續(xù)研究前期實驗構(gòu)建的攜帶hIL-10的分泌型轉(zhuǎn)基因雙歧桿菌（BL-hIL-10）對小鼠潰瘍性結(jié)腸炎治療效應(yīng)，并探討B(tài)L-hIL-10對UC治療的可能相關(guān)機(jī)制。方法：（1）將pBADXs-hIL-10穿梭質(zhì)粒，通過電轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)入長雙歧桿菌（NCC2705）中，構(gòu)建能穩(wěn)定表達(dá)有生物活性hIL-10蛋白的BL-hIL-10菌株。（2）用5%DSS誘導(dǎo)UC小鼠模型，實驗分為Normal組、Colitis組、BL組、BL0組和BL-hIL-10治療組。治療組分別給予干預(yù)治療7天，14天后小鼠斷頸處死并進(jìn)行實驗檢測。①記錄小鼠DAI、結(jié)腸組織HE染色病理學(xué)評估、分析小鼠SI；②檢測小鼠脾臟Treg/Th17比例；ELISA法測小鼠血漿及結(jié)腸黏膜細(xì)胞因子IL-17、IL-10、IL-23、IL-6和TGF-β1表達(dá)水平；③Western b... 

【文章來源】：暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒中hIL-10基因測序圖(部分截圖)

Westernblot實驗檢測hIL-10表達(dá)情況

BL-hIL-10經(jīng)過0.2%L-Arb誘導(dǎo)不同時間hIL-10蛋白的表達(dá)水平注:a表示與各組相比，24h濃度最高且P<0.05

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[10]左歸飲對老年小鼠抗氧化作用及胸腺脾臟指數(shù)的影響[J]. 王燕,趙毅.  中國實驗方劑學(xué)雜志. 2007(03)

博士論文
[1]攜帶hIL-10基因的雙歧桿菌治療小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的研究[D]. 姚君.暨南大學(xué) 2011



本文編號：3570744