目的：研究油酸在非酒精性脂肪變性肝細(xì)胞模型中誘導(dǎo)水甘油通道蛋白（aquaglyceroporins）AQP3、AQP9表達(dá)改變的相關(guān)信號分子機制。方法：采用不同濃度油酸干預(yù)人肝癌HepG2細(xì)胞構(gòu)建非酒精性脂肪變性肝細(xì)胞模型，油紅O染色及OD值測定分析肝細(xì)胞脂肪變性程度，實時熒光定量PCR與Western blot方法確定油酸誘導(dǎo)AQP3、AQP9表達(dá)變化的最佳濃度，然后以油酸最佳干預(yù)濃度以及不同信號通路抑制劑分別聯(lián)合誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞，以常規(guī)培養(yǎng)的HepG2細(xì)胞為對照組，利用qRT-PCR和Western blot方法檢測分析參與油酸鈉誘導(dǎo)AQP3、AQP9表達(dá)水平改變的相關(guān)信號分子機制。結(jié)果：油紅O染色及其OD值測定結(jié)果顯示隨著油酸誘導(dǎo)濃度的升高（0-500mol/L），脂肪變性程度逐漸加重，有顯著統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。qRT-PCR和Western blot方法檢測結(jié)果表明油酸的刺激可以下調(diào)AQP3的表達(dá)量而上調(diào)AQP9的表達(dá)，其作用均呈劑量依賴性，確定500mol/L作為油酸干預(yù)的最佳刺激濃度。qRT-PCR檢測不同信號通路抑制劑干預(yù)對油酸誘導(dǎo)AQPs表達(dá)改變的結(jié)果表... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

油紅O染色檢測不同濃度油酸鈉誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞內(nèi)脂滴含量

不同濃度油酸鈉誘導(dǎo)AQPs表達(dá)水平的改變A．實時熒光定量PCR檢測結(jié)果；B．Westernblot檢測結(jié)果；C．半定量分析結(jié)果；a，b：P<0.05，與對照組（OA0M）相比較

不同信號通路抑制劑對油酸鈉誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞內(nèi)AQPsmRNA水平改變的影響

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]水甘油通道蛋白在非酒精性脂肪變性肝細(xì)胞模型中的表達(dá)及意義[J]. 邱烈旺,顧陸昀,呂琳,王奎,梅浙川.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報. 2012(07)
[2]叉頭轉(zhuǎn)錄因子1基因沉默對水通道蛋白9在正常人肝細(xì)胞中表達(dá)的影響[J]. 肖瀟,梅浙川,邱烈旺,劉卉,呂琳.  中國生物制品學(xué)雜志. 2011(10)
[3]胰島素對人肝細(xì)胞L02水通道蛋白9表達(dá)的影響及其調(diào)控通路[J]. 劉卉,梅浙川,肖瀟.  中華肝臟病雜志. 2010 (06)
[4]Foxa2與2型糖尿病肝臟胰島素抵抗的分子病因?qū)W——解讀2006年美國糖尿病學(xué)會（ADA）“杰出科學(xué)成就獎”演講報告[J]. 楊金奎.  國際內(nèi)分泌代謝雜志. 2006(05)
[5]水通道蛋白調(diào)節(jié)的研究進展[J]. 路煒,漆洪波.  國外醫(yī)學(xué).婦幼保健分冊. 2005(01)

碩士論文
[1]慢病毒載體介導(dǎo)的過表達(dá)FOXO1對人肝癌細(xì)胞HepG2中水通道蛋白9表達(dá)的影響[D]. 邱烈旺.重慶醫(yī)科大學(xué) 2012



本文編號：3554753