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化濁解毒平潰煎對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠TNF-α、GLN及MCP-1的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-05-10 15:11

  本文關(guān)鍵詞:化濁解毒平潰煎對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠TNF-α、GLN及MCP-1的影響,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的: 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)大鼠的一般狀態(tài)、病理學(xué)改變、疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)評(píng)分、血清腫瘤壞死因子(TNF-α)、谷氨酰胺(GLN)含量以及結(jié)腸組織中單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)表達(dá)的影響,分析化濁解毒平潰煎治療UC的作用機(jī)制,為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法: 將60只清潔級(jí)健康雄性Wistar大鼠(體重250g-300g),適應(yīng)性喂養(yǎng)7天后隨機(jī)分為空白對(duì)照組(CK)、模型組(MG)、美沙拉嗪組(MSG)、化濁解毒平潰煎高劑量組(HDG)、化濁解毒平潰煎中劑量組(MDG)、化濁解毒平潰煎低劑量組(LDG)。每組10只,給予正常飲食飲水。除空白對(duì)照組外,其余5組采用2,4,6,-三硝基苯磺酸(2,4,6 trini-trobenzeneesulfonic acid,TNBS)致敏和乙醇誘導(dǎo)的復(fù)合灌腸法制造大鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎模型。造模后第3天,CK組大鼠正常喂養(yǎng),MG組大鼠給予0.9%氯化鈉溶液灌胃,MSG組大鼠采用美沙拉嗪混懸液灌胃,其余中藥治療組采用相應(yīng)藥物灌胃。連續(xù)治療2周,觀察大鼠在各個(gè)時(shí)期的精神狀態(tài)、體重、飲食飲水、糞便性狀等情況。治療結(jié)束后,各組大鼠禁食不禁水24h,斷頭法處死并取血,用放射免疫法檢測(cè)血清TNF-α含量,生化法測(cè)GLN的含量,免疫組化法測(cè)MCP-1的表達(dá)。采血后快速剖腹,取出結(jié)腸,取肉眼觀察病變明顯的部位切取少許腸組織,進(jìn)行常規(guī)固定,石蠟包埋及連續(xù)4um做病理切片,一部分進(jìn)行HE染色后在光鏡下觀察結(jié)腸組織病理學(xué)改變,另一部分按免疫組化說(shuō)明書操作,半定量法測(cè)定MCP-1的表達(dá)。 結(jié)果: 1大鼠的一般情況觀察 NG組大鼠精神佳,毛色光澤,飲食進(jìn)水正常,活動(dòng)佳,二便可,體重逐漸增加。其余5組大鼠造模后出現(xiàn)精神萎靡不振,,嗜蜷臥,進(jìn)食量及活動(dòng)量顯著減少,喜扎堆,體毛凌亂無(wú)光澤,并出現(xiàn)稀便,墊料污穢。MG組大鼠隨實(shí)驗(yàn)天數(shù)增加可見(jiàn)癥狀逐漸加重,嚴(yán)重的大鼠肛周肉眼觀察可見(jiàn)血便,稱體質(zhì)量均有不同程度的減輕。其余4組治療組大鼠經(jīng)藥物干預(yù)后,大鼠的精神、皮毛色澤、活動(dòng)狀態(tài)、體重等一般狀況均有好轉(zhuǎn),其中HDG大鼠好轉(zhuǎn)最快,一般狀況接近NG;MDG與MSG略差,但仍高于LDG,且MDG與MSG之間無(wú)明顯差別;LDG大鼠比MG大鼠一般狀況略好。 2DAI評(píng)分 疾病活動(dòng)指數(shù)評(píng)分方面,各治療組HDG(0.402±0.286)、MDG(0.892±0.362)、MSG(0.903±0.297)、LDG(1.328±0.255)與MG(2.489±0.245)比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中MSG與MDG之間比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。詳見(jiàn)Table.3。 3結(jié)腸粘膜肉眼與組織病理學(xué)觀察 肉眼觀察MG情況最差,HDG接近CK組,MDG與MSG略好,且MSG好于MDG,LDG略好于MG。 組織病理學(xué)觀察:NG粘膜光滑色澤正常,為正常粘膜;MG大鼠粘膜退變壞死,大量炎細(xì)胞彌漫浸潤(rùn),充血、水腫,潰瘍形成明顯,LDG組次之。HDG大鼠腸粘膜基本完整,接近NG,MDG大鼠腸粘膜次于HDG,MSG介于HDG與MDG之間,好于LDG。詳見(jiàn)附圖Fig.1-Fig.6。 4血清TNF-α檢測(cè)結(jié)果 與MG(2.69±0.42)比較,各治療組大鼠血清TNF-α含量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。HDG(1.34±0.04)低于MDG(1.68±0.05),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),MDG(1.68±0.05)略高于MSG(1.52±0.06),差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 5血清GLN含量檢測(cè)結(jié)果 與MG(1.65±0.24)比較,各治療組大鼠血清GLN含量的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中MDG(2.37±0.09)比MSG(2.24±0.05)值略高,但兩者之間差異不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。CK(3.21±0.29)與各治療組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。 6結(jié)腸組織MCP-1表達(dá)檢測(cè)結(jié)果 與MG(0.33±0.10)比較,各治療組大鼠MCP-1表達(dá)的平均光密度值均有降低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);HDG(0.13±0.01)分別與MDG(0.15±0.02)、MSG(0.17±0.01)、LDG(0.20±0.01)比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);MSG與MDG之間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),LDG與MDG比較,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。詳見(jiàn)Table.2。 結(jié)論: 1化濁解毒平潰煎能有效地改善UC大鼠的一般狀況,降低DAI評(píng)分,減輕病理?yè)p傷,而且其療效與該方劑劑量存在一定的量-效關(guān)系。 2化濁解毒平潰煎治療UC的作用機(jī)制可能是通過(guò)降低促炎因子TNF-α含量,下調(diào)MCP-1在結(jié)腸組織中的表達(dá)水平,同時(shí)提高血清中GLN含量,以達(dá)到抑制炎性細(xì)胞浸潤(rùn),修復(fù)受損腸粘膜的作用,從而有效治療UC。
【關(guān)鍵詞】:潰瘍性結(jié)腸炎 化濁解毒平潰煎 中醫(yī)藥 實(shí)驗(yàn)研究 TNF-α MCP-1 GLN
【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R574.62
【目錄】:
  • 中文摘要4-7
  • ABSTRACT7-11
  • 前言11-12
  • 材料與方法12-15
  • 結(jié)果15-18
  • 附圖18-28
  • 附表28-30
  • 討論30-38
  • 結(jié)論38
  • 參考文獻(xiàn)38-41
  • 綜述 TNF-α、GLN 及 MCP-1 與潰瘍性結(jié)腸炎的關(guān)系41-54
  • 參考文獻(xiàn)50-54
  • 致謝54-55
  • 個(gè)人簡(jiǎn)歷55

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):355017

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