Wnt信號通路在腸上皮細(xì)胞的增殖與分化過程中起著重要的調(diào)控作用,Lgr4作為一個(gè)經(jīng)典的七次跨膜蛋白,是新鑒定出來的Rspondin蛋白家族的受體之一,并能夠激活Wnt信號通路。但是Lgr4在動物體內(nèi)是如何通過Wnt信號通路調(diào)節(jié)腸上皮的自穩(wěn)態(tài)維持目前仍然不清楚。利用gene-trap小鼠模型,我們發(fā)現(xiàn)Lgr4主要在腸上皮隱窩中表達(dá)并且在小腸隱窩底部潘氏細(xì)胞（Paneth細(xì)胞）中表達(dá)較高。通過對Lgr4基因敲除小鼠腸組織學(xué)分析發(fā)現(xiàn)其Paneth細(xì)胞及Lgr5腸干細(xì)胞數(shù)目大大減少,Bmil腸干細(xì)胞數(shù)目也顯著降低了。利用DSS誘導(dǎo)腸炎性疾病（Inflammatory bowel diseas）模型,Lgr4基因敲除鼠相對于野生型小鼠表現(xiàn)出劇烈的炎癥反應(yīng)及高致死率。對其分子機(jī)理進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn),Lgr4基因敲除鼠中Wnt/β-catenin信號通路顯著下調(diào)導(dǎo)致其腸上皮細(xì)胞在炎癥損傷過程修復(fù)缺陷,最終引起腸上皮屏障被嚴(yán)重破壞。通過與APCmin小鼠雜交或者注射GSK3β抑制劑SB216763在Lgr4基因敲除鼠中激活Wnt信號通路,Paneth細(xì)胞的數(shù)目得到了部分的回復(fù)并且DSS誘導(dǎo)的炎癥癥狀明顯減輕... 

【文章來源】：華東師范大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：130 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 前言
第二部分 實(shí)驗(yàn)試劑、材料與實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 主要實(shí)驗(yàn)試劑、材料與儀器
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)方法
    2.3 主要軟件與數(shù)據(jù)庫
第三部分 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
    第一章 Lgr4在小鼠腸道中的表達(dá)分析及Lgr4基因敲除后腸道表型分析
        一 引言
        二 結(jié)果與討論
            2.1 Lgr4基因在小腸及結(jié)腸隱窩細(xì)胞中表達(dá)
            2.2 Lgr4基因敲除鼠的腸上皮細(xì)胞增殖降低
        三小結(jié)
    第二章 Lgr4基因敲除后影響腸上皮Paneth細(xì)胞的分化
        一 引言
        二 結(jié)果與討論
            2.1 Lgr4基因敲除鼠中Paneth細(xì)胞的標(biāo)記基因表達(dá)下調(diào)
            2.2 Lgr4基因敲除鼠中Paneth細(xì)胞的數(shù)目減少
            2.3 Lgr4基因敲除鼠中Goblet細(xì)胞及Enteroendocrine細(xì)胞數(shù)目沒有明顯變化
        三 小結(jié)
    第三章 Lgr4基因敲除后引起腸上皮干細(xì)胞減少
        一 引言
        二 結(jié)果與討論
            2.1 Lgr4基因敲除鼠中表達(dá)Lgr5腸干細(xì)胞數(shù)目減少
            2.2 Lgr4基因敲除鼠中表達(dá)Bmi1腸干細(xì)胞數(shù)目減少
        三 小結(jié)
    第四章 Lgr4基因通過Wnt信號通路調(diào)節(jié)腸上皮細(xì)胞自穩(wěn)態(tài)的維持
        一 引言
        二 結(jié)果與討論
            2.1 Lgr4基因敲除鼠中Wnt信號通路活性下調(diào)
            2.2 Lgr4基因敲除后,Rspondin1不能激活Wnt信號通路
            2.3 在Lgr4基因敲除鼠中注射GSK3β蛋白的抑制劑能部分恢復(fù)Lgr4基因敲除鼠的表型
            2.4 與APC~(min)小鼠雜交后Lgr4~(-/-)基因敲除鼠的表型部分回復(fù)
        三 小結(jié)
    第五章 Lgr4基因敲除鼠對DSS誘導(dǎo)的腸炎模型極其敏感
        一 引言
        二 結(jié)果與討論
            2.1 Lgr4基因敲除鼠對DSS誘導(dǎo)的腸炎模型極其敏感
            2.2 Lgr4基因敲除鼠的炎癥表型主要由于腸上皮的缺陷造成
            2.3 DSS誘導(dǎo)的Lgr4基因敲除鼠的腸上皮細(xì)胞增殖水平明顯降低
            2.4 注射GSK3β抑制劑SB216763后,Lgr4基因敲除鼠炎癥癥狀減輕
        三 小結(jié)
    第六章 Lgr5腸干細(xì)胞對DSS誘導(dǎo)炎癥過程中的應(yīng)答
        一 引言
        二 結(jié)果與討論
            2.1 Lgr5腸干細(xì)胞在炎癥發(fā)生的早期細(xì)胞的增殖加快
            2.2 在DSS誘導(dǎo)炎癥發(fā)生的后期Lgr5腸干細(xì)胞的數(shù)目減少
        三 小結(jié)
第四部分 結(jié)語
綜述
    一 引言
    二 Wnt信號通路的簡史
    三 Wnt配體的分泌
    四 在大多數(shù)情況下,Wnt信號傳遞的距離很短
    五 Wnt信號通路的受體是一種異源二聚體
    六 天然的Wnt的抑制因子通過多種途徑作用于Wnt的受體
    七 Wnt受體及拮抗因子的突變會引起骨相關(guān)的疾病
    八 Norrin和Rspondins作為Wnt信號通路的激活劑在疾病中也起著重要的作用
    九 Lgr是Rspondin蛋白的受體并能夠激活Wnt信號通路
    十 APC/Axin降解復(fù)合物通過控制β-catenin蛋白的穩(wěn)定來調(diào)節(jié)Wnt信號通路
    十一 Wnt的靶基因受到TCF/β-catenin蛋白復(fù)合體的調(diào)節(jié)
    十二 Wnt信號通路與干細(xì)胞的自我更新
    十三 Wnt信號通路與癌癥
    十四 Wnt信號通路的激活突變不僅僅引發(fā)腸癌癥
    十五 Wnt信號通路與代謝相關(guān)疾病
    十六 調(diào)節(jié)Wnt信號通路的小分子
    十七 問題與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
后記



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