目的:觀察二氫楊梅素（Dihydromyrieetin,DMY）對檸檬酸鐵胺（ferric ammonium citrate,FAC）誘導(dǎo)大鼠肝星狀細(xì)胞系HSC-T6細(xì)胞活化的影響及機(jī)制,為肝纖維化的防治提供新的思路和線索。方法:培養(yǎng)大鼠肝星狀細(xì)胞系HSC-T6細(xì)胞,先用細(xì)胞自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素（100 nmol/L）預(yù)處理HSC-T6細(xì)胞0.5 h,再用含F(xiàn)AC（400μmol/L）和不同濃度的DMY（10、20、40、80、160和320μg/mL）處理HSC-T6細(xì)胞24 h。實(shí)驗(yàn)分為以下各組:空白對照組、FAC組、不同濃度的DMY干預(yù)組、FAC組+不同濃度DMY組、雷帕霉素預(yù)處理組。采用MTT法檢測細(xì)胞活力,普魯士藍(lán)染色觀察細(xì)胞內(nèi)鐵沉積,采用ELISA法檢測細(xì)胞培養(yǎng)液上清中透明質(zhì)酸（Hyaluronic acid,HA）、層粘連蛋白（Laminin,LN）、三型前膠原（ProcollagenⅢ,PCⅢ）和IV型膠原（Collagen IV,IV-C）水平,采用比色法檢測細(xì)胞內(nèi)總鐵水平,采用透射電鏡觀察HSC-T6的超微結(jié)構(gòu)。采用Western Blot檢測HSC-T6細(xì)胞中NCO... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

DMY、FAC和細(xì)胞自噬誘導(dǎo)劑雷帕霉素對HSC-T6細(xì)胞活力的影響

DMY 對 FAC 誘導(dǎo)肝星狀細(xì)胞活化的影響用 10、20、40、80、160 和 320 μg/mL DMY 和 400 μmol/L 檸檬酸鐵胺（ HSC-T6 細(xì)胞 24 h。采用 Western bolt 檢測肝星狀細(xì)胞活化的標(biāo)記蛋白肌動蛋白（α-SMA）的表達(dá)。結(jié)果如圖 3-2 和表 3-2 所示：與空白對照FAC 組細(xì)胞中 α-SMA 蛋白表達(dá)顯著性增加（P<0.05）；與 FAC 組比 （20、40、80、160 和 320 μg/mL）+FAC 組細(xì)胞中 α-SMA 蛋白表達(dá)低（P<0.05）。DMY （10 μg/mL）+FAC 組與 FAC 組比較細(xì)胞中 α-表達(dá)沒有顯著性差異（P>0.05）。與空白對照組比較，DMY（10、2060 和 320 μg/mL）處理也沒有明顯影響細(xì)胞中 α-SMA 蛋白表達(dá)（P>0

3.4 DMY 對 FAC 誘導(dǎo) HSC-T6 細(xì)胞鐵過載的影響3.4.1 DMY 對 FAC 誘導(dǎo) HSC-T6 細(xì)胞內(nèi)鐵沉積的影響用 10、20、40、80、160 和 320 μg/mL DMY 和 400 μmol/L 檸檬酸鐵胺（FAC）處理 HSC-T6 細(xì)胞 24 h。采用普魯士藍(lán)染色觀察細(xì)胞內(nèi)鐵沉積的情況。結(jié)果如圖3-3 所示：與空白對照組比較，F(xiàn)AC 組細(xì)胞內(nèi)鐵沉積水平（染成藍(lán)色的鐵顆粒）明顯增加；與 FAC 組比較，DMY （20、40、80、160 和 320 μg/mL）+FAC 組細(xì)胞內(nèi)鐵沉積水平顯著性降低。DMY （10 μg/mL）+FAC 組與 FAC 組比較細(xì)胞內(nèi)鐵沉積水平?jīng)]有明顯差異。與空白對照組比較，DMY（10、20、40、80、160和 320 μg/mL）處理也沒有明顯影響細(xì)胞內(nèi)鐵沉積水平。

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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