HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞Ras/ERK通路的激活及對MMP-2、TIMP-1表達(dá)的影響
發(fā)布時間:2021-12-01 18:47
目的觀察肝素結(jié)合性表皮生長因子樣生長因子(HB-EGF)激活肝星狀細(xì)胞(HSC)過程中Ras/ERK信號通路的變化和對金屬基質(zhì)蛋白酶(MMP)及其抑制物的影響。方法傳代培養(yǎng)HSC-T6細(xì)胞,分空白對照組、HB-EGF處理組(20,40,80ng/mL),采用QRT-PCR法檢測MMP-2、金屬蛋白酶組織抑制劑-1(TIMP-1)及表皮生長因子受體(EGFR)mRNA的表達(dá),并確定HB-EGF刺激HSC-T6Ras/ERK通路(ERK1、ERK2、P38MAPK)活化的最佳濃度及最佳時間,檢測該通路活化情況。結(jié)果 QRT-PCR檢測提示,MMP-2的表達(dá)隨HB-EGF干預(yù)時間的延長增加,TIMP-1的表達(dá)隨干預(yù)時間的延長遞減;40ng/mL HB-EGF培養(yǎng)HSC-T6 48h后,EGFR mRNA的表達(dá)較空白對照組明顯上調(diào)(P<0.05);選擇40ng/mL HB-EGF培養(yǎng)48h為最佳刺激時間與濃度,該處理組ERK1mRNA的表達(dá)較空白對照組明顯上調(diào)(P<0.05),但ERK2、P38MAPK的變化無統(tǒng)計學(xué)意義;Western-blot檢測提示該處理組ERK1蛋白的表達(dá)較...
【文章來源】:福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016,50(02)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
1.2.2 細(xì)胞接種與分組
1.2.3 檢測HSC-T6的TIMP-1、MMP-2的表達(dá)
1.2.3.1 QRT-PCR法
1.2.3.2 Western-blot法
1.2.4 QRT-PCR法檢測HSC-T6EGFR的表達(dá)
1.2.5 QRT-PCR法、Western-blot法檢測HSC-T6ERK1、ERK2的表達(dá)
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞中MMP-2、TIMP-1表達(dá)的影響
2.2 HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞中EGFR表達(dá)、Ras/ERK信號通路的影響
2.3 HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞中Ras/ERK信號通路的影響
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]高胰島素對肝星狀細(xì)胞HSC-T6增殖及MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 mRNA轉(zhuǎn)錄的影響[J]. 常遠(yuǎn)鴻,萇新明,任莉. 陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2012(05)
[2]HSCs表型轉(zhuǎn)化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其阻斷劑的研究進(jìn)展[J]. 楊斌,曾維政,吳曉玲. 世界華人消化雜志. 2009(22)
[3]Dynamic expression of extracellular signal-regulated kinase in rat liver tissue during hepatic fibrogenesis[J]. Xiao-Lan Zhang, Jin-Ming Liu, Chang-Chun Yang, Yi-Lin Zheng, Li Liu, Zhan-Kui Wang, Hui-Qing Jiang, Department of Gastroenterology, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, Hebei Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2006(39)
[4]Cytokines,STATs and Liver Disease[J]. Bin Gao~(1,2) ~1Section on Liver Biology,Laboratory of Physiologic Studies,National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism,National Institutes of Health,Bethesda,MD 20892,USA;. Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)
[5]Ras/Raf/ERK信號通路與肝臟疾病[J]. 周慶南. 醫(yī)學(xué)文選. 2004(06)
[6]HB-EGF的研究現(xiàn)狀[J]. 王建中. 國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊. 1995(04)
碩士論文
[1]肝素結(jié)合性表皮生長因子對肝星狀細(xì)胞膠原代謝及遷移的影響[D]. 丁倩.河北醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號:3526863
【文章來源】:福建醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2016,50(02)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 材料
1.2 方法
1.2.1 細(xì)胞傳代培養(yǎng)
1.2.2 細(xì)胞接種與分組
1.2.3 檢測HSC-T6的TIMP-1、MMP-2的表達(dá)
1.2.3.1 QRT-PCR法
1.2.3.2 Western-blot法
1.2.4 QRT-PCR法檢測HSC-T6EGFR的表達(dá)
1.2.5 QRT-PCR法、Western-blot法檢測HSC-T6ERK1、ERK2的表達(dá)
1.3 統(tǒng)計學(xué)處理
2 結(jié)果
2.1 HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞中MMP-2、TIMP-1表達(dá)的影響
2.2 HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞中EGFR表達(dá)、Ras/ERK信號通路的影響
2.3 HB-EGF對HSC-T6細(xì)胞中Ras/ERK信號通路的影響
3 討論
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]高胰島素對肝星狀細(xì)胞HSC-T6增殖及MMP-2、TIMP-1、TIMP-2 mRNA轉(zhuǎn)錄的影響[J]. 常遠(yuǎn)鴻,萇新明,任莉. 陜西醫(yī)學(xué)雜志. 2012(05)
[2]HSCs表型轉(zhuǎn)化的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路及其阻斷劑的研究進(jìn)展[J]. 楊斌,曾維政,吳曉玲. 世界華人消化雜志. 2009(22)
[3]Dynamic expression of extracellular signal-regulated kinase in rat liver tissue during hepatic fibrogenesis[J]. Xiao-Lan Zhang, Jin-Ming Liu, Chang-Chun Yang, Yi-Lin Zheng, Li Liu, Zhan-Kui Wang, Hui-Qing Jiang, Department of Gastroenterology, the Second Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050000, Hebei Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2006(39)
[4]Cytokines,STATs and Liver Disease[J]. Bin Gao~(1,2) ~1Section on Liver Biology,Laboratory of Physiologic Studies,National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism,National Institutes of Health,Bethesda,MD 20892,USA;. Cellular & Molecular Immunology. 2005(02)
[5]Ras/Raf/ERK信號通路與肝臟疾病[J]. 周慶南. 醫(yī)學(xué)文選. 2004(06)
[6]HB-EGF的研究現(xiàn)狀[J]. 王建中. 國外醫(yī)學(xué).免疫學(xué)分冊. 1995(04)
碩士論文
[1]肝素結(jié)合性表皮生長因子對肝星狀細(xì)胞膠原代謝及遷移的影響[D]. 丁倩.河北醫(yī)科大學(xué) 2014
本文編號:3526863
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