第一部分HBx缺失突變體轉(zhuǎn)化人肝細(xì)胞的機制目的:慢性乙型肝炎病毒感染和HBx基因整合與肝細(xì)胞癌（HCC）的發(fā)生密切相關(guān)。整合的HBx基因通常發(fā)生缺失或點突變。一些研究已表明HBx突變體具有完全不同于野生型HBx的生物學(xué)功能,它可能在HBV相關(guān)性HCC發(fā)生中發(fā)揮重要作用。我們的前期研究也已顯示,與野生型HBx比較,HBx缺失突變體能明顯促進肝細(xì)胞的增殖和惡性轉(zhuǎn)化。但其具體的分子機制仍未闡明,基于蛋白質(zhì)組學(xué)方法在研究癌變機制方面的優(yōu)勢,本課題擬應(yīng)用蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)從蛋白質(zhì)整體水平了解HBx缺失突變體致癌機制。而MicroRNA（miRNA）是一類在轉(zhuǎn)錄或翻譯水平調(diào)控基因表達(dá)的小RNA分子,參與發(fā)育、細(xì)胞增殖、分化、凋亡等多種生物學(xué)過程。miRNA表達(dá)出現(xiàn)異常,可能導(dǎo)致人類疾病的發(fā)生包括腫瘤。因此本課題又通過microRNA芯片技術(shù)分析轉(zhuǎn)染HBx缺失突變體和野生型HBx基因的肝細(xì)胞之間的miRNA的差異表達(dá),為進一步研究miRNA在HBV相關(guān)HCC發(fā)病機制中的作用打下基礎(chǔ)。方法:（1）前期實驗我們已建立穩(wěn)定表達(dá)HBx缺失突變體和野生型HBx蛋白的人肝細(xì)胞株（即QSG7701-HBx-d382和... 

【文章來源】：中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

二維電泳凝膠中數(shù)字化蛋白質(zhì)點的像素示意圖

蛋白質(zhì)斑點檢測完成之后，為了比較和分析不同凝膠中蛋白質(zhì)斑點的改變，進一步應(yīng)用PDQuest軟件建立一個Matchaet，它包含實驗中凝膠的 FilteredImage和 GaussianImage。如圖1一3所示，整個Matchset用單個窗口來表示，其中的亞窗口分別用來表示成員膠圖像和標(biāo)準(zhǔn)圖像(左邊第一個亞窗口)。其中標(biāo)準(zhǔn)圖像是一個合成圖像，包含Matchset中所有成員膠的蛋白質(zhì)斑點數(shù)據(jù)，所有的蛋白質(zhì)斑點之間的比較和分析便通過標(biāo)準(zhǔn)圖像來完成的，并且不同的Matchset能夠被組織成更高級的成組的Matchset以便進一步分析。東 東‘崢崢，_一幸 幸 111東梢 梢一一渭 渭 兮 iii_+參 參井紛檬多 多

蛋白質(zhì)斑點檢測完成之后，為了比較和分析不同凝膠中蛋白質(zhì)斑點的改變，進一步應(yīng)用PDQuest軟件建立一個Matchaet，它包含實驗中凝膠的 FilteredImage和 GaussianImage。如圖1一3所示，整個Matchset用單個窗口來表示，其中的亞窗口分別用來表示成員膠圖像和標(biāo)準(zhǔn)圖像(左邊第一個亞窗口)。其中標(biāo)準(zhǔn)圖像是一個合成圖像，包含Matchset中所有成員膠的蛋白質(zhì)斑點數(shù)據(jù)，所有的蛋白質(zhì)斑點之間的比較和分析便通過標(biāo)準(zhǔn)圖像來完成的，并且不同的Matchset能夠被組織成更高級的成組的Matchset以便進一步分析。東 東‘崢崢，_一幸 幸 111東梢 梢一一渭 渭 兮 iii_+參 參井紛檬多 多

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3508186