PI3K/AKT上調(diào)的ASIC1a表達(dá)及ERS在PDGF誘導(dǎo)的HSC-T6活化中的作用及機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-25 01:36
酸敏感離子通道1a(acid-sensing ion channels 1a,ASIC1a)是一類能被胞外H+所激活的陽離子通道,通道的開放讓胞外的鈣離子內(nèi)流,使得細(xì)胞內(nèi)鈣離子穩(wěn)態(tài)發(fā)生改變,從而引起一系列的生理病理現(xiàn)象。有研究表明PI3K/AKT信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)ASIC1a的表達(dá)和活化。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是重要的Ca2+儲(chǔ)存站并參與胞質(zhì)內(nèi)Ca2+信號(hào)的調(diào)節(jié),在信號(hào)通路中起著重要作用。鈣離子紊亂會(huì)影響內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白質(zhì)的合成和折疊功能,包括對(duì)蛋白的翻譯修飾,從而誘發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(endoplasmic reticulum stress,ERS)的發(fā)生和激活未折疊蛋白反應(yīng)(unfolded protein response,UPR)。UPR可以在短時(shí)間和較輕的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激刺激下提高細(xì)胞的存活率,嚴(yán)重的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可以通過激活下游細(xì)胞凋亡信號(hào)分子誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。UPR主要有三條通路:蛋白激酶RNA樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶(protein kinase RNA-like endoplasmic reticulum kinase,PERK),激活轉(zhuǎn)錄因子6(activ...
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
1.前言
2.實(shí)驗(yàn)材料
2.1 病人組織樣本
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.3 細(xì)胞株
2.4 藥物與試劑
2.5 儀器與設(shè)備
2.6 主要溶液及試劑的配制
3.實(shí)驗(yàn)方法
3.1 動(dòng)物分組與模型建立
3.2 組織病理學(xué)檢查
3.3 細(xì)胞培養(yǎng)
3.4 MTT法篩選LY294002、4-PBA最佳作用濃度
3.5 細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)ASIC1a的表達(dá)及定位
3.6 ASIC1a-ShRNA轉(zhuǎn)染
3.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HSC-T6細(xì)胞中相關(guān)因子的mRNA表達(dá)水平
3.8 激光共聚焦檢測(cè)HSC-T6中[Ca2+]i
3.9 WesternBlot法檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5.討論
6.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
參考文獻(xiàn)
本文編號(hào):3456388
【文章來源】:安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省
【文章頁數(shù)】:76 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞
中文摘要
英文摘要
1.前言
2.實(shí)驗(yàn)材料
2.1 病人組織樣本
2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.3 細(xì)胞株
2.4 藥物與試劑
2.5 儀器與設(shè)備
2.6 主要溶液及試劑的配制
3.實(shí)驗(yàn)方法
3.1 動(dòng)物分組與模型建立
3.2 組織病理學(xué)檢查
3.3 細(xì)胞培養(yǎng)
3.4 MTT法篩選LY294002、4-PBA最佳作用濃度
3.5 細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)ASIC1a的表達(dá)及定位
3.6 ASIC1a-ShRNA轉(zhuǎn)染
3.7 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)HSC-T6細(xì)胞中相關(guān)因子的mRNA表達(dá)水平
3.8 激光共聚焦檢測(cè)HSC-T6中[Ca2+]i
3.9 WesternBlot法檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)
3.10 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
5.討論
6.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
綜述
參考文獻(xiàn)
本文編號(hào):3456388
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