第一部分:雷帕霉素通過(guò)TGF-β-Smad2信號(hào)通路上調(diào)肝臟祖細(xì)胞中CTGF的表達(dá)目的:雷帕霉素是m TOR激酶抑制劑,目前作為免疫抑制劑廣泛用于器官移植術(shù)后的抗排斥反應(yīng)。最近的研究表明雷帕霉素在器官纖維化的過(guò)程中有一定的促纖維化效應(yīng),但其在肝纖維中的確切作用仍有待研究。方法:用Western blotting來(lái)檢測(cè)肝臟祖細(xì)胞中CTGF的表達(dá),m TOR信號(hào)通路,PI3K-Akt信號(hào)通路和TGF-β-Smad信號(hào)通路的變化。用雙熒光素報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)檢測(cè)CTGF啟動(dòng)子和Smad結(jié)合元件的激活情況。用慢病毒介導(dǎo)的sh RNA穩(wěn)定敲減了肝臟祖細(xì)胞中的m TOR,Raptor,Rictor,Smad2,Smad3和Smad4,用腺病毒過(guò)表達(dá)肝臟祖細(xì)胞中的Smad3,來(lái)研究這些基因在雷帕霉素誘導(dǎo)CTGF表達(dá)中的作用。使用各種激酶抑制劑來(lái)驗(yàn)證激活通路在雷帕霉素誘導(dǎo)CTGF表達(dá)中的作用。用DCFH-DA來(lái)檢測(cè)雷帕霉素處理后ROS的變化。結(jié)果:雷帕霉素可在轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)肝臟祖細(xì)胞中CTGF的表達(dá),敲減m TOR,Raptor和Rictor模擬了雷帕霉素處理的效應(yīng)。機(jī)制上,雷帕霉素通過(guò)抑制m TOR活性而導(dǎo)... 

【文章來(lái)源】：華中科技大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
縮略詞表
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 ：雷帕霉素通過(guò)TGF-β-Smad2信號(hào)通路上調(diào)肝臟祖細(xì)胞中CTGF的表達(dá)..
    摘要
    ABSTRACT
    1.引言
    2.材料和方法
    3.結(jié)果
    4.討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 ：自分泌的TGF-β/activinA-Smad信號(hào)通路誘導(dǎo)肝臟祖細(xì)胞呈現(xiàn)部分上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化狀態(tài)
    摘要
    ABSTRACT
    1.引言
    2.材料和方法
    3.結(jié)果
    4.討論
    參考文獻(xiàn)
附錄
    攻讀博士研究生期間論文發(fā)表情況
致謝



本文編號(hào)：3453092