目的:本實(shí)驗(yàn)探討脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）/Toll 樣受體 4（Toll-like receptor-4,TLR4）信號通路對肝星狀細(xì)胞（hepatic stellate cell,HSC）活化及增殖的作用機(jī)制,為以HSC作為靶標(biāo)治療非酒精性脂肪肝纖維化提供新思路。方法:HSC分4組:①空白組;②對照組;③樣本組1（100ng/ml LPS）④樣本組2（200ng/mlLPS）,每組5個(gè)復(fù)孔,繼續(xù)培養(yǎng)24h、48h、72h、96h,采用MTT法測定HSC存活率。另分3組:①對照組;②100ng/ml LPS組;③200ng/ml LPS組,每組各5個(gè)培養(yǎng)皿,再繼續(xù)培養(yǎng)12h、24h、36h、48h,分別留取細(xì)胞提取總RNA,采用Real-Time PCR法測定 100ng/ml LPS 組第 12h、24h、36h 的 TLR4、type I collagen、MMP-13,2、TIMP-1,2、BAMBI mRNA水平;用第48h的細(xì)胞,提取蛋白質(zhì),采用蛋白免疫印跡法測定α-SMA和TLR4表達(dá)水平;另分3組:①對照組;②LPS組、③TLR4中和抗體組;... 

【文章來源】：延邊大學(xué)吉林省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：71 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖ILPS對HSC細(xì)胞活化的作用

差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意（＊／＊＜〇．０１）；與同期對照組相比，經(jīng)??ＬＰＳ處理后增殖率明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＃Ｐ＜０．０１）?，?ＬＰＳ??濃度越高增殖率也越大，見圖２。??Ｃｏｎ?ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍｌ）?ＬＰＳ（２００ｎｇ／ｍｌ）??■ＨＩ??■■Ｈ??圖１?ＬＰＳ對ＨＳＣ細(xì)胞活化的作用（ＭＯＯ）??１６??

圖４?ＬＰＳ?（?１００ｎｇ／ｍｌ）刺激后ＨＳＣ表達(dá)ＴＬＲ４ｍＲＮＡ的變化??注：ｎ＝５，與同期對照組比較，＊ｐ＜０．０１：與ＬＰＳ－Ｏｈ比較，＃／？＜０．０１。??３．３?ＬＰＳ刺激對ＨＳＣ?ａ?－ＳＭＡ表達(dá)的影響??ＬＰＳ添加后４８ｈ測定ａ?－ＳＭＡ。ａ?－ＳＭＡ為ＨＳＣ活化的重要標(biāo)志??，本研究通過蛋白免疫印跡法檢測，結(jié)果顯示：對照組ＨＳＣ低水平??１８??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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