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東方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立及研究

發(fā)布時(shí)間:2021-10-18 14:20
  目的:非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)發(fā)病率逐年增高,且有進(jìn)展到肝纖維化肝硬化的趨勢(shì),目前其確切的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。我們?cè)谝酝膶?shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)東方田鼠有易發(fā)脂肪肝的傾向,因此建立東方田鼠非酒精性脂肪肝模型,利用SMART (Switching Mechanism at 5’end of RNA Transcript, RNA5’端轉(zhuǎn)錄機(jī)制)技術(shù)構(gòu)建了東方田鼠肝臟cDNA (complementary DNA,互補(bǔ)DNA)質(zhì)粒文庫(kù),在此基礎(chǔ)上篩選與東方田鼠脂肪肝發(fā)病相關(guān)的基因,并獲得其全長(zhǎng)序列,為進(jìn)一步研究非酒精脂肪肝發(fā)病機(jī)制奠定基礎(chǔ)。方法:選取105只6周齡洞庭湖種群雄性東方田鼠,隨機(jī)分成三組,每組35只,分別為對(duì)照組、模型組1和模型組2,各組分別飼喂高纖維料(在大小鼠基礎(chǔ)料的基礎(chǔ)上加粗纖維,使粗纖維含量為10%,粗脂肪含量為3%)、高脂料(在大小鼠基礎(chǔ)料的基礎(chǔ)上加5%豬油、0.5%膽固醇和0.1%膽鹽)、大小鼠基礎(chǔ)料。各組分別于造模開始后第2、4、6、8、12周處死,稱量體重及肝重,計(jì)算肝指數(shù),采血檢測(cè)東方田鼠血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶... 

【文章來(lái)源】:復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

東方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立及研究


肝臟的組織病理學(xué)變化(HE,x20)

熔解曲線,對(duì)照組,實(shí)時(shí)熒光定量PCR,基因表達(dá)


熔解曲線均符合以上標(biāo)準(zhǔn),如CYPZEI的熔解曲線。見圖3。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的結(jié)果顯示,模型組1的CYPZEI的表達(dá)量不斷增高,在6周時(shí)較對(duì)照組顯著增高(尸<0.05),且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)量在6周時(shí)也顯著增高(P<0.05);ECHSI的表達(dá)量不斷增高,在4周時(shí)較對(duì)照組顯著增高(尸<0.05),6周突然降低,8周后又顯著增高(尸<0.05);CYPZDS的表達(dá)量不斷增高,在2周時(shí)較對(duì)照組顯著增高(尸<0.05),除4周稍降低外,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)量也顯著增高(P<0.05);CYPZa3a的表達(dá)量不斷增高,在6周時(shí)較對(duì)照組顯著增高(尸<0.05),且隨著時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)量在6周時(shí)也顯著增高(尸<0.05);PGC一1的表達(dá)量不斷增高,在4周時(shí)較對(duì)照組顯著增高(尸<0.05),除在4周顯著降低(尸<0.05)外,隨著時(shí)間的延長(zhǎng)表達(dá)量在6周后顯著增高(P<0.05);SC4MOL、Adipor和AMPK一1的表達(dá)量開始時(shí)與對(duì)照組相比升高(p<0.05),但隨著飼養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)其表達(dá)量顯著降低(P<0.05);模型組2的各基因表達(dá)趨勢(shì)不明顯。詳見圖4一11。

表示模,表達(dá)差異,實(shí)驗(yàn)組,對(duì)照組


圖4Real一timePCR檢測(cè)各組在不同時(shí)間內(nèi)CYPZEI表達(dá)差異注:*表示模烈組1與對(duì)照組相比實(shí)驗(yàn)組在0.05水平差異顯著;小寫字母不同表示同一組在不同時(shí)間段在0.05水平上差異顯著ECHSIlllllllll:::::::::::::::::::鬢鬢鬢鬢鬢鬢鬢.對(duì)照組口模型組圈模型組斤!月0工JJd憑︹J口JJ.占n︸淚排耀友爺囿喇皿46812

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