東方田鼠非酒精性脂肪肝模型的建立及研究
發(fā)布時間:2021-10-18 14:20
目的:非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)發(fā)病率逐年增高,且有進展到肝纖維化肝硬化的趨勢,目前其確切的發(fā)病機制尚不清楚。我們在以往的實驗中發(fā)現(xiàn)東方田鼠有易發(fā)脂肪肝的傾向,因此建立東方田鼠非酒精性脂肪肝模型,利用SMART (Switching Mechanism at 5’end of RNA Transcript, RNA5’端轉(zhuǎn)錄機制)技術(shù)構(gòu)建了東方田鼠肝臟cDNA (complementary DNA,互補DNA)質(zhì)粒文庫,在此基礎(chǔ)上篩選與東方田鼠脂肪肝發(fā)病相關(guān)的基因,并獲得其全長序列,為進一步研究非酒精脂肪肝發(fā)病機制奠定基礎(chǔ)。方法:選取105只6周齡洞庭湖種群雄性東方田鼠,隨機分成三組,每組35只,分別為對照組、模型組1和模型組2,各組分別飼喂高纖維料(在大小鼠基礎(chǔ)料的基礎(chǔ)上加粗纖維,使粗纖維含量為10%,粗脂肪含量為3%)、高脂料(在大小鼠基礎(chǔ)料的基礎(chǔ)上加5%豬油、0.5%膽固醇和0.1%膽鹽)、大小鼠基礎(chǔ)料。各組分別于造模開始后第2、4、6、8、12周處死,稱量體重及肝重,計算肝指數(shù),采血檢測東方田鼠血清丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶...
【文章來源】:復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
肝臟的組織病理學(xué)變化(HE,x20)
熔解曲線均符合以上標(biāo)準,如CYPZEI的熔解曲線。見圖3。實時熒光定量PCR的結(jié)果顯示,模型組1的CYPZEI的表達量不斷增高,在6周時較對照組顯著增高(尸<0.05),且隨著時間的延長表達量在6周時也顯著增高(P<0.05);ECHSI的表達量不斷增高,在4周時較對照組顯著增高(尸<0.05),6周突然降低,8周后又顯著增高(尸<0.05);CYPZDS的表達量不斷增高,在2周時較對照組顯著增高(尸<0.05),除4周稍降低外,隨著時間的延長表達量也顯著增高(P<0.05);CYPZa3a的表達量不斷增高,在6周時較對照組顯著增高(尸<0.05),且隨著時間的延長表達量在6周時也顯著增高(尸<0.05);PGC一1的表達量不斷增高,在4周時較對照組顯著增高(尸<0.05),除在4周顯著降低(尸<0.05)外,隨著時間的延長表達量在6周后顯著增高(P<0.05);SC4MOL、Adipor和AMPK一1的表達量開始時與對照組相比升高(p<0.05),但隨著飼養(yǎng)時間的延長其表達量顯著降低(P<0.05);模型組2的各基因表達趨勢不明顯。詳見圖4一11。
圖4Real一timePCR檢測各組在不同時間內(nèi)CYPZEI表達差異注:*表示模烈組1與對照組相比實驗組在0.05水平差異顯著;小寫字母不同表示同一組在不同時間段在0.05水平上差異顯著ECHSIlllllllll:::::::::::::::::::鬢鬢鬢鬢鬢鬢鬢.對照組口模型組圈模型組斤!月0工JJd憑︹J口JJ.占n︸淚排耀友爺囿喇皿46812
【參考文獻】:
期刊論文
[1]PGC-1α與非酒精性脂肪肝病關(guān)系的研究進展[J]. 方詩蓉,傅玉才,周小輝. 國際消化病雜志. 2009(06)
[2]SREBPs的調(diào)節(jié)及在非酒精性脂肪肝形成機制中的研究進展[J]. 杜嬈,謝梅林. 中國藥理學(xué)通報. 2009(11)
[3]非酒精性脂肪肝的實驗研究進展[J]. 翁小剛,朱曉新,楊慶,李玉潔. 中國實驗方劑學(xué)雜志. 2009(11)
[4]非酒精性脂肪性肝病患者血清IL-18、IL-8水平變化及意義[J]. 程勇,趙亞敏,蘇劍,尹體英. 山東醫(yī)藥. 2009(39)
[5]全長cDNA文庫構(gòu)建方法及應(yīng)用研究[J]. 朱利軍,長孫東亭,羅素蘭. 海南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2009(02)
[6]獲取基因全長c DNA策略及應(yīng)用[J]. 邵玨,邵玉鎖,曹明富. 健康研究. 2009(02)
[7]瘦素對非酒精性脂肪肝病的影響[J]. 范挺. 內(nèi)江科技. 2009(02)
[8]飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝病大鼠脂聯(lián)素受體2基因的表達及其意義[J]. 王彥,施雪清,王琳琳,趙赫男. 大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2008(06)
[9]非酒精性脂肪性肝病和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c[J]. 王光麗,周小輝,傅玉才. 肝臟. 2008(03)
[10]SMART技術(shù)構(gòu)建亞麻韌皮部全長cDNA文庫[J]. 龍松華,陳信波,鄧欣,高原. 中國麻業(yè)科學(xué). 2008(03)
本文編號:3442951
【文章來源】:復(fù)旦大學(xué)上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:71 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
肝臟的組織病理學(xué)變化(HE,x20)
熔解曲線均符合以上標(biāo)準,如CYPZEI的熔解曲線。見圖3。實時熒光定量PCR的結(jié)果顯示,模型組1的CYPZEI的表達量不斷增高,在6周時較對照組顯著增高(尸<0.05),且隨著時間的延長表達量在6周時也顯著增高(P<0.05);ECHSI的表達量不斷增高,在4周時較對照組顯著增高(尸<0.05),6周突然降低,8周后又顯著增高(尸<0.05);CYPZDS的表達量不斷增高,在2周時較對照組顯著增高(尸<0.05),除4周稍降低外,隨著時間的延長表達量也顯著增高(P<0.05);CYPZa3a的表達量不斷增高,在6周時較對照組顯著增高(尸<0.05),且隨著時間的延長表達量在6周時也顯著增高(尸<0.05);PGC一1的表達量不斷增高,在4周時較對照組顯著增高(尸<0.05),除在4周顯著降低(尸<0.05)外,隨著時間的延長表達量在6周后顯著增高(P<0.05);SC4MOL、Adipor和AMPK一1的表達量開始時與對照組相比升高(p<0.05),但隨著飼養(yǎng)時間的延長其表達量顯著降低(P<0.05);模型組2的各基因表達趨勢不明顯。詳見圖4一11。
圖4Real一timePCR檢測各組在不同時間內(nèi)CYPZEI表達差異注:*表示模烈組1與對照組相比實驗組在0.05水平差異顯著;小寫字母不同表示同一組在不同時間段在0.05水平上差異顯著ECHSIlllllllll:::::::::::::::::::鬢鬢鬢鬢鬢鬢鬢.對照組口模型組圈模型組斤!月0工JJd憑︹J口JJ.占n︸淚排耀友爺囿喇皿46812
【參考文獻】:
期刊論文
[1]PGC-1α與非酒精性脂肪肝病關(guān)系的研究進展[J]. 方詩蓉,傅玉才,周小輝. 國際消化病雜志. 2009(06)
[2]SREBPs的調(diào)節(jié)及在非酒精性脂肪肝形成機制中的研究進展[J]. 杜嬈,謝梅林. 中國藥理學(xué)通報. 2009(11)
[3]非酒精性脂肪肝的實驗研究進展[J]. 翁小剛,朱曉新,楊慶,李玉潔. 中國實驗方劑學(xué)雜志. 2009(11)
[4]非酒精性脂肪性肝病患者血清IL-18、IL-8水平變化及意義[J]. 程勇,趙亞敏,蘇劍,尹體英. 山東醫(yī)藥. 2009(39)
[5]全長cDNA文庫構(gòu)建方法及應(yīng)用研究[J]. 朱利軍,長孫東亭,羅素蘭. 海南大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2009(02)
[6]獲取基因全長c DNA策略及應(yīng)用[J]. 邵玨,邵玉鎖,曹明富. 健康研究. 2009(02)
[7]瘦素對非酒精性脂肪肝病的影響[J]. 范挺. 內(nèi)江科技. 2009(02)
[8]飲食誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝病大鼠脂聯(lián)素受體2基因的表達及其意義[J]. 王彥,施雪清,王琳琳,趙赫男. 大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2008(06)
[9]非酒精性脂肪性肝病和固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白1c[J]. 王光麗,周小輝,傅玉才. 肝臟. 2008(03)
[10]SMART技術(shù)構(gòu)建亞麻韌皮部全長cDNA文庫[J]. 龍松華,陳信波,鄧欣,高原. 中國麻業(yè)科學(xué). 2008(03)
本文編號:3442951
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