高遷移率族蛋白-1和Toll樣受體4在腸道缺血/再灌注損傷中的作用
發(fā)布時(shí)間:2021-09-25 01:58
背景:腸道是具有重要的免疫、內(nèi)分泌和屏障功能的器官。腸道缺血再灌注(ischemia/reperfusion, I/R)損傷被認(rèn)為是引起急性肺損傷(Acute lung injury,ALI)、全身炎癥反應(yīng)綜合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)和多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome,MODS)的重要原因,但是其具體機(jī)制仍存在很多的爭(zhēng)議。傳統(tǒng)的細(xì)菌移位理論并不能解釋許多疑問(wèn),己備受質(zhì)疑!澳c-淋巴”途經(jīng)理論已越來(lái)越受到關(guān)注,腸淋巴液的成分還不是很明確。Toll樣受體4(Toll like receptor4,TLR4)與腸道I/R損傷關(guān)系密切,抑制Toll樣受體4介導(dǎo)的信號(hào)通路激活可能會(huì)對(duì)腸道I/R的原位損傷和其所致的遠(yuǎn)隔組織損傷具有一定保護(hù)作用。目的:本研究通過(guò)基因缺陷的動(dòng)物模型,研究腸系膜淋巴液中的成分以及TLR4信號(hào)傳導(dǎo)通路在腸道I/R損傷中的作用。方法:首先測(cè)定測(cè)定腸道I/R大鼠淋巴液的內(nèi)毒素和HMGB1水平,并測(cè)定血漿游離氨基酸水平和腸道黏膜高度和容貌厚度變化。4...
【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略詞表(Abbreviation)
前言
實(shí)驗(yàn)材料
1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
1.1 內(nèi)毒素試劑盒
1.2 細(xì)胞因子測(cè)定試劑盒
1.3 HE染色試劑盒
1.4 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)
1.5 RT-PCR檢測(cè)基因表達(dá)
2 一般耗材
3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)耗材和手術(shù)器械
3.1 實(shí)驗(yàn)耗材
3.2 手術(shù)器械
4 主要儀器設(shè)備
4.1 一般儀器
4.2 HE染色中用到的儀器
4.3 ELISA檢測(cè)相關(guān)
4.4 Western Blot檢測(cè)相關(guān)儀器
4.5 RT-PCR檢測(cè)儀器
研宄內(nèi)容和方法
1 研究設(shè)計(jì)
2 大鼠腸道缺血再灌注及淋巴液和血清收集
2.1 動(dòng)物分組
2.2 腸道缺血再灌注
2.3 取材
3 小鼠TLR4與HMGB1及下游信號(hào)途徑的研宄
3.1 動(dòng)物分組
3.2 術(shù)前準(zhǔn)備
3.3 尾靜脈注射
3.4 取材
4 檢測(cè)指標(biāo)與方法
4.1 鱟試劑法內(nèi)毒素測(cè)定
4.2 血清中細(xì)胞因子測(cè)定
4.3 氨基酸分析
4.4 HE染色和腸道形態(tài)觀察
4.5 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)水平
4.6 RT-PCR檢測(cè)目的基因水平
5 統(tǒng)計(jì)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1 腸道I/R大鼠淋巴液和血清測(cè)定及組織變化
1.1 腸道I/R大鼠淋巴液中內(nèi)毒素水平
1.2 腸道I/R大鼠淋巴液中HMGBl水平
1.3 血漿游離氨基酸
1.4 腸道粘膜形態(tài)
2 TLR4與HMGB1及下游信號(hào)途徑的研究
2.1 腸道組織學(xué)變化
2.1.1 小鼠腸道HE染色情況
2.1.2 小鼠腸道粘膜變化
2.1.3 小鼠腸道粘膜評(píng)分
2.2 小鼠血清中內(nèi)毒素水平
2.3 小鼠血清中細(xì)胞因子變化
2.4 小鼠體內(nèi)HMGB1水平狀況
2.4.1 小鼠血清中HMGB1水平
2.4.2 小鼠腸道組織中HMGB1蛋白表達(dá)水平
2.4.3 小鼠腸道組織HMGB1基因表達(dá)水平
2.5 小鼠腸道TLR4傳導(dǎo)通路情況
2.5.1 小鼠腸道MyD88水平
2.5.2 小鼠腸道TRIF水平
2.6 小鼠腸道NF-κB蛋白水平
討論
1 大鼠腸道淋巴液引流操作
2 小鼠尾靜脈注射技術(shù)
3 血漿游離氨基酸水平
4 “腸-淋巴”途徑在腸道缺血再灌注中的作用
5 內(nèi)毒素在腸道缺血再灌注中的作用
6 內(nèi)源性配體HMGB1在腸道缺血再灌注中的作用
7 TLR4傳導(dǎo)通路在腸道缺血再灌注中的作用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
本文編號(hào):3408864
【文章來(lái)源】:北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院北京市 211工程院校 985工程院校
【文章頁(yè)數(shù)】:81 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略詞表(Abbreviation)
前言
實(shí)驗(yàn)材料
1 主要實(shí)驗(yàn)試劑
1.1 內(nèi)毒素試劑盒
1.2 細(xì)胞因子測(cè)定試劑盒
1.3 HE染色試劑盒
1.4 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)
1.5 RT-PCR檢測(cè)基因表達(dá)
2 一般耗材
3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)耗材和手術(shù)器械
3.1 實(shí)驗(yàn)耗材
3.2 手術(shù)器械
4 主要儀器設(shè)備
4.1 一般儀器
4.2 HE染色中用到的儀器
4.3 ELISA檢測(cè)相關(guān)
4.4 Western Blot檢測(cè)相關(guān)儀器
4.5 RT-PCR檢測(cè)儀器
研宄內(nèi)容和方法
1 研究設(shè)計(jì)
2 大鼠腸道缺血再灌注及淋巴液和血清收集
2.1 動(dòng)物分組
2.2 腸道缺血再灌注
2.3 取材
3 小鼠TLR4與HMGB1及下游信號(hào)途徑的研宄
3.1 動(dòng)物分組
3.2 術(shù)前準(zhǔn)備
3.3 尾靜脈注射
3.4 取材
4 檢測(cè)指標(biāo)與方法
4.1 鱟試劑法內(nèi)毒素測(cè)定
4.2 血清中細(xì)胞因子測(cè)定
4.3 氨基酸分析
4.4 HE染色和腸道形態(tài)觀察
4.5 Western Blot檢測(cè)蛋白表達(dá)水平
4.6 RT-PCR檢測(cè)目的基因水平
5 統(tǒng)計(jì)分析
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1 腸道I/R大鼠淋巴液和血清測(cè)定及組織變化
1.1 腸道I/R大鼠淋巴液中內(nèi)毒素水平
1.2 腸道I/R大鼠淋巴液中HMGBl水平
1.3 血漿游離氨基酸
1.4 腸道粘膜形態(tài)
2 TLR4與HMGB1及下游信號(hào)途徑的研究
2.1 腸道組織學(xué)變化
2.1.1 小鼠腸道HE染色情況
2.1.2 小鼠腸道粘膜變化
2.1.3 小鼠腸道粘膜評(píng)分
2.2 小鼠血清中內(nèi)毒素水平
2.3 小鼠血清中細(xì)胞因子變化
2.4 小鼠體內(nèi)HMGB1水平狀況
2.4.1 小鼠血清中HMGB1水平
2.4.2 小鼠腸道組織中HMGB1蛋白表達(dá)水平
2.4.3 小鼠腸道組織HMGB1基因表達(dá)水平
2.5 小鼠腸道TLR4傳導(dǎo)通路情況
2.5.1 小鼠腸道MyD88水平
2.5.2 小鼠腸道TRIF水平
2.6 小鼠腸道NF-κB蛋白水平
討論
1 大鼠腸道淋巴液引流操作
2 小鼠尾靜脈注射技術(shù)
3 血漿游離氨基酸水平
4 “腸-淋巴”途徑在腸道缺血再灌注中的作用
5 內(nèi)毒素在腸道缺血再灌注中的作用
6 內(nèi)源性配體HMGB1在腸道缺血再灌注中的作用
7 TLR4傳導(dǎo)通路在腸道缺血再灌注中的作用
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
參考文獻(xiàn)
個(gè)人簡(jiǎn)歷
致謝
本文編號(hào):3408864
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