人體攝入大量高脂飲食時常伴隨脂肪酸代謝異常,可造成肝細(xì)胞脂質(zhì)沉積并進(jìn)一步誘導(dǎo)氧化應(yīng)激發(fā)生。非酒精性脂肪性肝�。∟onalcoholic fatty liver disease,NAFLD）是一種與肝臟脂質(zhì)沉積和氧化應(yīng)激密切相關(guān)的代謝疾病。油酰乙醇酰胺（Oleoylethanolamide,OEA）作為一種內(nèi)源性生物脂質(zhì)信號分子,具有多種生理功能。但其調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝和氧化應(yīng)激進(jìn)而調(diào)控NAFLD的作用機(jī)制尚未完全闡明。本研究以人肝癌細(xì)胞HepG2和人正常肝細(xì)胞L02為研究對象,從OEA可能參與調(diào)控細(xì)胞脂質(zhì)代謝并調(diào)節(jié)氧化應(yīng)激水平兩個方面出發(fā),探究OEA改善NAFLD的可能性,從而為NAFLD的預(yù)防和治療提供一些科學(xué)依據(jù)與理論參考。首先,油酸棕櫚酸混合物（2:1）誘導(dǎo)細(xì)胞建立脂質(zhì)沉積模型。將不同濃度（0.2-1.2mM）的脂肪酸與HepG2和L02細(xì)胞處理24 h,結(jié)果發(fā)現(xiàn):0.2 mM和0.4 mM脂肪酸對兩種細(xì)胞活性無明顯抑制作用,當(dāng)脂肪酸濃度增加到0.6 mM,L02細(xì)胞的活性下降至空白組的69.33%,差異極顯著（p<0.01）;隨著脂肪酸濃度的增加,HepG2和L02細(xì)胞內(nèi)紅色脂... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

游離脂肪酸引發(fā)肝臟脂質(zhì)沉積Fig.1-1LipidaccumulationincucedbyFFAintheliver人體攝入的膳食脂肪首先在腸腔被吸收并酯化成新的乳糜微粒，經(jīng)淋巴進(jìn)入循環(huán)系

turase1，SCD-1）等[39,40]。人們普遍認(rèn)為，NAFLD的起始事件是脂肪組織和肝臟中的肥胖以及IR的發(fā)展[41]。它們造成FFA通量增加，超過了骨骼肌，肝臟和胰腺等組織的儲存和氧化能力[42]。過量的高毒性FFA積累于肝臟中，最終導(dǎo)致TG在肝細(xì)胞中沉積[43]。脂肪變性，肝臟TG積累是NAFLD的組織學(xué)標(biāo)志[44]。1.1.2.2氧化應(yīng)激與NAFLD盡管還不清楚氧化應(yīng)激（Oxidativestress，OS）與NAFLD發(fā)病之間的因果關(guān)系，但OS可能是NAFLD中傳遞肝損傷的重要機(jī)制[45,46]，在NAFLD從單純脂肪變性到NASH的進(jìn)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用[47]。圖1-2游離脂肪酸誘發(fā)肝臟氧化應(yīng)激Fig.1-2Oxidativestressincucedbyfreefattyacidsintheliver脂肪氧化的增加是活性氧（Reactiveoxygenspecies，ROS）過量產(chǎn)生的主要原因。β-氧化是一種分解代謝過程，脂解作用產(chǎn)生的FFA是其主要的能量來源[48]。在正常生理狀態(tài)下，短鏈，中鏈和長鏈脂肪酸在各種酶的作用下進(jìn)入線粒體進(jìn)行β-氧化，這是一種“安全”的加工機(jī)制[44]。然而，當(dāng)FFA大量積聚在線粒體中，會被識別為“攻擊性”脂質(zhì)，從而造成肝損傷[49,50]。ROS在多種細(xì)胞器中產(chǎn)生，包括內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體，是蛋白質(zhì)氧化折疊，線粒體呼吸和解毒反應(yīng)過程中的副產(chǎn)物，通過內(nèi)源性抗氧化物質(zhì)將其維持在

實(shí)驗(yàn)流程圖


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