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丙肝病毒核心基因靶向性M1GS核酶的優(yōu)化及其活性研究

發(fā)布時間:2021-08-31 02:17
  自1989年美國加州的Chiron公司首先成功地從受感染的黑猩猩血液標(biāo)本中克隆了丙肝病毒(hepatitis C virus,HCV)的cDNA以來,對其關(guān)注和研究不斷加強和深入。HCV感染不僅是造成慢性肝病的主要原因,同時也是部分國家和地區(qū)肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的主要病因。目前全球HCV感染者約有1.7億,每年新增感染者達300萬~400萬。HCV感染的慢性率高達70%以上,至今尚無有確切保護作用的疫苗問世,國際上公認(rèn)的治療方法α干擾素聯(lián)合利巴韋林持續(xù)應(yīng)答率低下、副作用大且受HCV基因型限制,故迫切需要發(fā)展更有效的療法控制HCV的感染和傳播。大腸桿菌來源RNase P是催化切割ptRNA 5’端成熟的天然核酶,該酶的催化核心為一個377nt的RNA亞單位(M1 RNA),能在具備高鹽離子和適當(dāng)Mg2+的體外緩沖環(huán)境中對RNA底物進行位點特異的切割。M1 RNA主要識別底物的二級結(jié)構(gòu),其最小的底物結(jié)構(gòu)必須含有5’單鏈區(qū)和tRNA氨基酸接受臂的雙鏈莖-環(huán)結(jié)構(gòu);诖,對于已知序列的靶基因mRNA,均可通過設(shè)計一小段引導(dǎo)序列(Guide Seq... 

【文章來源】:廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】:61 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

丙肝病毒核心基因靶向性M1GS核酶的優(yōu)化及其活性研究


1GSDNA模板的結(jié)構(gòu)

瓊脂糖電泳,質(zhì)粒


HCV質(zhì)粒的瓊脂糖電泳分析

序列,PCR擴增產(chǎn)物,脂糖,瓊脂糖電泳


圖 3 HCV 質(zhì)粒的瓊脂糖電泳分析M:DNA KB ladder 1:HCV PCR 擴增結(jié)果核心基因序列,預(yù)期長度是 585bp。通過脂糖凝膠電泳分析,可見 PCR 產(chǎn)物與預(yù)


本文編號:3373976

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