自1989年美國(guó)加州的Chiron公司首先成功地從受感染的黑猩猩血液標(biāo)本中克隆了丙肝病毒（hepatitis C virus,HCV）的cDNA以來,對(duì)其關(guān)注和研究不斷加強(qiáng)和深入。HCV感染不僅是造成慢性肝病的主要原因,同時(shí)也是部分國(guó)家和地區(qū)肝細(xì)胞癌（hepatocellular carcinoma,HCC）的主要病因。目前全球HCV感染者約有1.7億,每年新增感染者達(dá)300萬(wàn)～400萬(wàn)。HCV感染的慢性率高達(dá)70%以上,至今尚無(wú)有確切保護(hù)作用的疫苗問世,國(guó)際上公認(rèn)的治療方法α干擾素聯(lián)合利巴韋林持續(xù)應(yīng)答率低下、副作用大且受HCV基因型限制,故迫切需要發(fā)展更有效的療法控制HCV的感染和傳播。大腸桿菌來源RNase P是催化切割ptRNA 5’端成熟的天然核酶,該酶的催化核心為一個(gè)377nt的RNA亞單位（M1 RNA）,能在具備高鹽離子和適當(dāng)Mg2+的體外緩沖環(huán)境中對(duì)RNA底物進(jìn)行位點(diǎn)特異的切割。M1 RNA主要識(shí)別底物的二級(jí)結(jié)構(gòu),其最小的底物結(jié)構(gòu)必須含有5’單鏈區(qū)和tRNA氨基酸接受臂的雙鏈莖-環(huán)結(jié)構(gòu)�；诖�,對(duì)于已知序列的靶基因mRNA,均可通過設(shè)計(jì)一小段引導(dǎo)序列（Guide Seq... 

【文章來源】：廣東藥科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

1GSDNA模板的結(jié)構(gòu)

HCV質(zhì)粒的瓊脂糖電泳分析

圖 3 HCV 質(zhì)粒的瓊脂糖電泳分析M：DNA KB ladder 1：HCV PCR 擴(kuò)增結(jié)果核心基因序列，預(yù)期長(zhǎng)度是 585bp。通過脂糖凝膠電泳分析，可見 PCR 產(chǎn)物與預(yù)


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