背景和目的:梗阻性黃疸（Obstructive jaundice,OJ）可導(dǎo)致腸道黏膜損傷和腸道屏障功能破壞。機(jī)制可能與NF-κB介導(dǎo)的免疫損傷有關(guān)。梗阻性黃疽對腸道損傷的關(guān)鍵在于膽汁無法入腸,腸肝軸破壞。本研究旨在探究梗阻性黃疽發(fā)生和解除過程中腸道NF-κB表達(dá)和活性的變化,以及對的腸黏膜損傷的作用機(jī)制。方法:第一部分采用102只成年雄性C57B/6小鼠隨機(jī)分成3組,即假手術(shù)對照組（SH,n=36）,膽總管結(jié)扎組（BDL,n=60）,正常對照組（C,n=6）進(jìn)行手術(shù)建模。SH組開腹分離膽總管不結(jié)扎,BDL組開腹分離膽總管結(jié)扎并離斷,C組不做處理。其中SH與BDL組在手術(shù)后按照術(shù)后時間各分為1天,3天,5天,7天,10天,14天6個亞組。取小鼠血液標(biāo)本檢測血生化與血內(nèi)毒素水平。取回腸末段組織進(jìn)行HE染色觀察病理改變。利用免疫組織化學(xué)染色、Western blot和R-T PCR檢測回腸組織NF-κB及其相關(guān)炎癥因子TNF-α,IL-1β,IL-6,和凋亡相關(guān)Caspase 3,Caspase-8的表達(dá)情況。第二部分實驗采用60只小鼠隨機(jī)分成5組,假手術(shù)組假手術(shù)對照組（SH,n=10）,... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１膽總管結(jié)扎手術(shù)示意??

一、?小鼠一般情況??本實驗采用１０２只小鼠建模。其中６０只小鼠行膽總管結(jié)扎術(shù)（ＢＤＬ）?，?３６只手術(shù)組（ＳＨ）開腹分離膽管不結(jié)扎，６只正常對照組（Ｃ）不作處理直接處死取材。??建模時間共１４天。在前期預(yù)實驗熟練手術(shù)操作，并創(chuàng)新使用自制拉鉤暴露術(shù)野，手術(shù)過程中避免了對腹內(nèi)臟器的觸碰與損傷，尤其是避免了觸碰損傷導(dǎo)致的胰腺演發(fā)生。手術(shù)過程及環(huán)境盡可能保持無菌，防止小鼠術(shù)后感染。以上方式使建模更加定，各模型組１４天內(nèi)無一意外死亡。??ＳＨ組及Ｃ組小鼠進(jìn)食活躍，體重穩(wěn)定，毛發(fā)柔順光澤；精神狀態(tài)良好，行為躍；皮膚紅潤無黃染，小便正常呈白色或淡黃色。ＢＤＬ組小鼠膽總管結(jié)扎后食欲減??退、體重下降，毛發(fā)粗糙，失去光澤；精神倦怠，易于激惹；膽總管結(jié)扎１天可見便赤黃，３天可見皮膚黃染，耳部及爪心明顯。??

ＢＤＬ組小鼠血清內(nèi)毒素（ＬＰＳ）在膽管結(jié)扎術(shù)后持續(xù)升高，與對照組相比，從術(shù)??后第五天起差異顯著（５ｄＢＤＬ?ｖｓ?５ｄＳＨ，?７．?８１±１．４２?ｖｓ?５．８９?ｖｓ?０．?７８，?ｐ＜０．０５）并??于１４天生至最高（９．?８５±１．?４８），詳見圖１－４。隨著梗阻性黃疸的進(jìn)展，小鼠內(nèi)毒??素水平持續(xù)升高，提示梗黃誘發(fā)的內(nèi)毒素血癥的出現(xiàn)。見表１－１，圖１－４。??表１－１各組小鼠血清內(nèi)毒素（ＥＵ／ｍＬ）??組別例數(shù)?０天?１天?３天?５天?７天?１０天?１４天??ＢＤＬ?１０?１．７３士?１．２２?士?１．６０土?３．２８士?４．４１土?６．?７４士??０．９１?１．１３?０．９２?０．８６?１．２１?１．０７??ＳＨ?６?１．４３士?１．０５土?０．７５?土?０．６８土?０．６７土?０．５８士??０．８７?０．７４?０．５１?０．４８?０．３２?０．３５??Ｃ?６?０．５６±０．３７??２６??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]梗阻性黃疸動物模型的研究進(jìn)展[J]. 駱偉偉,余水平.  臨床肝膽病雜志. 2017(09)
[2]肝內(nèi)膽汁淤積癥診治專家共識解讀[J]. 黃建榮.  中國醫(yī)學(xué)前沿雜志(電子版). 2016(03)
[3]梗阻性黃疸模型小鼠肝臟自然殺傷細(xì)胞水平變化及意義[J]. 陳琳,付強(qiáng),唐強(qiáng),劉傳江,張莉,張宏偉.  中華實用診斷與治療雜志. 2016(01)
[4]Effect of biliary drainage on inducible nitric oxide synthase, CD14 and TGR5 expression in obstructive jaundice rats[J]. Zi-Kai Wang,Jian-Guo Xiao,Xue-Fei Huang,Yi-Chun Gong,Wen Li.  World Journal of Gastroenterology. 2013(15)
[5]Bile duct ligation in rats: A reliable model of hepatorenal syndrome?[J]. Stelios F Assimakopoulos,Constantine E Vagianos.  World Journal of Gastroenterology. 2009(01)
[6]NF-κB的信號通路與阻斷策略[J]. 邢飛躍,趙克森,姜勇.  中國病理生理雜志. 2003(06)

碩士論文
[1]膽汁內(nèi)外引流術(shù)對梗阻性黃疸大鼠腸黏膜膽汁酸受體GP-BAR1及其mRNA表達(dá)的影響[D]. 羅開發(fā).中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院 2014



本文編號：3369954