腸道穩(wěn)態(tài)是腸黏膜屏障、腸道內(nèi)環(huán)境等相互作用所構(gòu)成的動態(tài)平衡狀態(tài)。腸粘膜包括機(jī)械屏障即腸黏膜上皮結(jié)構(gòu),包括了腸上皮細(xì)胞及腸上皮細(xì)胞間的連接等,具有吸收營養(yǎng)物質(zhì)并將有害物質(zhì)排除在屏障外的功能。腸粘膜受損時,傷口附近的腸上皮細(xì)胞會喪失極性,細(xì)胞表面的微絨毛也會消失,從而使屏障功能受損,內(nèi)毒素和細(xì)菌容易侵入。為了修復(fù)腸粘膜,損傷周圍的腸上皮細(xì)胞會迅速遷移,隱窩基底部的干細(xì)胞也會發(fā)生增殖分化對腸粘膜進(jìn)行修復(fù)。大腦海綿狀血管瘤（CCM）是一種以擴(kuò)張微血管為主要特征的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病,CCM疾病相關(guān)的蛋白（KRIT1,CCM2,PDCD10）已經(jīng)證明在內(nèi)皮細(xì)胞及其外膜細(xì)胞連接和屏障功能有一定影響,三種蛋白的缺失都會破壞內(nèi)皮細(xì)胞的功能。但CCM蛋白在上皮屏障功能中的作用尚不明確,因此,我們擬通過CCM基因敲除小鼠探討CCM在腸上皮穩(wěn)態(tài)中的作用和機(jī)制。方法:CCM基因敲除小鼠及對照組小鼠給予腹腔注射它莫昔芬（TAM）控制CCM蛋白特異性表達(dá),連續(xù)注射兩周,通過體重百分比、疾病活動度、結(jié)腸縮短程度、組織病理學(xué)等方面評估結(jié)腸粘膜損傷程度;HE和PAS染色觀察腸上皮細(xì)胞形態(tài);免疫熒光法檢測鈣粘蛋白等在上皮組織... 

【文章來源】：武漢科技大學(xué)湖北省

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

1 PDCD10全身敲除小鼠基本情況

腸粘膜損傷時,上皮細(xì)胞極性也會發(fā)生變化。E-cadherin一般分布在細(xì)胞之間,在細(xì)胞基底分布較少。但我們通過染色,可以看到相對于對照組,腸上皮PDCD10敲除組的E-cadherin蛋白分布從均勻分布變成了極性分布,聚集在基部一側(cè)。(如圖3.4 A所示)HE染色和PAS染色,觀察腸上皮細(xì)胞形態(tài),兩個絨毛之間形成橋狀結(jié)構(gòu),可以看出腸絨毛細(xì)胞發(fā)生融合現(xiàn)象,也對腸上皮細(xì)胞極性有所影響。(如圖3.4 B所示)3.5 PDCD10腸上皮特異性敲除與腸上皮細(xì)胞的遷移和分化

Ezrin(埃茲蛋白)和pNHE3是兩種腸上皮頂模上部的標(biāo)記物,染色結(jié)果可見表達(dá)均主要分布在腸隱窩上部,并且表達(dá)比對照組明顯增多,即細(xì)胞向上發(fā)生了遷移。這些結(jié)果都提示PDCD10可以對腸上皮細(xì)胞的遷移和分化產(chǎn)生影響。3.6腸上皮細(xì)胞的增殖和凋亡


本文編號：3363310