第一部分高濃度膽汁酸對(duì)肝臟干細(xì)胞HP14-19的增殖及凋亡的影響目的:探究高濃度毒性膽汁酸對(duì)肝臟干細(xì)胞HP14-19細(xì)胞的增殖、凋亡的影響及凋亡相關(guān)信號(hào)通路的調(diào)控機(jī)制,為肝臟干細(xì)胞HP14-19體內(nèi)移植入膽汁淤積性微環(huán)境更好的存活提供理論及實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:1.以胚胎肝臟干細(xì)胞HP14-19細(xì)胞為研究對(duì)象,CCK-8試劑盒檢測(cè)膽汁酸在不同濃度（0、100、200、400、800、1200μmol/L）、不同時(shí)間（6 h、12 h、24 h、48 h）對(duì)HP14-19細(xì)胞的活力的影響。2.通過結(jié)晶紫染色檢測(cè)膽汁酸在不同濃度（0、100、200、400、800、1200μmol/L）、不同時(shí)間點(diǎn)（6 h、12 h、24 h、48 h）對(duì)HP14-19細(xì)胞的增殖能力的影響。3.運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)及DAPI染核法檢測(cè)膽汁酸處理HP14-19細(xì)胞后的凋亡情況。4.運(yùn)用Western-blot在蛋白水平檢測(cè)膽汁酸對(duì)HP14-19細(xì)胞處理后凋亡信號(hào)通路相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)情況。結(jié)果:1.CCK-8細(xì)胞活力檢測(cè)顯示不同濃度膽汁酸作用HP14-19細(xì)胞24 h后,當(dāng)膽汁酸濃度約600μmol/L,細(xì)胞存活率接近7... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學(xué)重慶市

【文章頁(yè)數(shù)】：69 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度不同時(shí)間點(diǎn)GCDC處理HP14-19細(xì)胞后的抑制率

重慶醫(yī)科大學(xué)碩士研究生學(xué)位論文圖 2 結(jié)晶紫染色檢測(cè) GCDC 處理 HP14-19 細(xì)胞的克隆形成Figure 2 Crystal violet staining for detection of colony formation of GCDC-treated HP14-19cells3.3 細(xì)胞流式檢測(cè) HP14-19 細(xì)胞的凋亡細(xì)胞流式 Annexin V FITC/PI 雙染結(jié)果顯示：600μmol/LGCDC 處理 HP14-19細(xì)胞 24 h 后，與對(duì)照組相比，處理組的細(xì)胞凋亡率高于對(duì)照組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

圖 4 DAPI 染色檢測(cè) GCDC 處理 HP14-19 細(xì)胞 24h 后的細(xì)胞凋亡Fig.4 Detection of apoptosis in HPDC-14-19 cells treated with GCDC for 24h by DAPI staining3.5 Western-blot 檢測(cè)凋亡信號(hào)通路相關(guān)蛋白的表達(dá)圖 5 Western-blot 檢測(cè) GCDC 處理 HP14-19 細(xì)胞后凋亡蛋白 Caspase-3、Bax 及 Bcl-2 的表達(dá)Fig. 5 Western-blot detected expressions of apoptosis proteins Caspase-3, Bax and Bcl-2 after

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Human hepatocytes loaded in 3D bioprinting generate mini-liver[J]. Cheng Zhong,Hai-Yang Xie,Lin Zhou,Xiao Xu,Shu-Sen Zheng.  Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International. 2016(05)
[2]膽道閉鎖Kasai術(shù)后早期并發(fā)癥的研究[J]. 葉曉爍,吳宙光,王建堯.  中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥. 2016(19)
[3]氧化應(yīng)激誘導(dǎo)自噬對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞增殖與凋亡的影響[J]. 劉關(guān)羽,何衛(wèi)陽(yáng),朱鑫,楊帆,黃小龍,印胡濱,茍欣.  中國(guó)病理生理雜志. 2015(12)
[4]膽汁淤積性肝病診斷和治療共識(shí)（2015）[J]. 陳成偉,成軍,竇曉光,段鐘平,范建高,傅青春,高春芳,韓濤,韓英,侯金林,胡和平,胡錫琪,黃建榮,賈繼東,劉玉蘭,陸倫根,馬雄,茅益民,南月敏,牛俊奇,邱德凱,任紅,尚佳,唐紅,王貴強(qiáng),王建設(shè),王吉耀,王磊,王宇明,魏來,謝青,謝渭芬,許建明,徐銘益,徐小元,楊長(zhǎng)青,楊云生,尤紅,曾民德,張文宏,張躍新,莊輝,周新民,鄒曉平.  臨床肝膽病雜志. 2015(12)
[5]膽汁酸代謝與膽固醇結(jié)石病[J]. 蔡強(qiáng),韓天權(quán),蔣兆彥.  上海醫(yī)藥. 2015(18)
[6]先天性膽道閉鎖的病因研究進(jìn)展[J]. 郭振亞,張若巖,柳明江,杜曉宏,張平,王廣義,葉軍鋒.  臨床肝膽病雜志. 2015(08)
[7]Importance of the stem cell microenvironment for ophthalmological cell-based therapy[J]. Peng-Xia Wan,Bo-Wen Wang,Zhi-Chong Wang.  World Journal of Stem Cells. 2015(02)
[8]aFGF、HGF體外誘導(dǎo)小鼠ESC向肝細(xì)胞定向分化及標(biāo)志物研究[J]. 應(yīng)佳麗,王雪玲,范麗嬌,張少艷.  胃腸病學(xué)和肝病學(xué)雜志. 2014(11)
[9]HGF/c-Met相關(guān)信號(hào)通路在大鼠肝臟祖細(xì)胞增殖中的作用[J]. 臧金鋒,袁寅,高軍業(yè),錢海鑫.  中國(guó)老年學(xué)雜志. 2014(10)
[10]氧化應(yīng)激在膽汁淤積性肝損傷中的作用及抗氧化治療研究進(jìn)展[J]. 王貴陽(yáng),李可為.  中國(guó)現(xiàn)代普通外科進(jìn)展. 2014(01)

博士論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植修復(fù)慢性期脊髓損傷的基礎(chǔ)研究和轉(zhuǎn)化探索[D]. 張超.天津醫(yī)科大學(xué) 2016
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和造血干細(xì)胞的體內(nèi)示蹤及其促進(jìn)肝損傷修復(fù)的對(duì)比研究[D]. 李強(qiáng).第四軍醫(yī)大學(xué) 2013
[3]自體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植促進(jìn)肝硬化肝臟門靜脈栓塞剩余肝臟再生的研究[D]. 李廷軍.第三軍醫(yī)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]胚胎干細(xì)胞疫苗和肝臟干細(xì)胞疫苗對(duì)預(yù)防和治療小鼠皮下肝癌移植瘤的對(duì)比研究[D]. 鄭毅超.福建醫(yī)科大學(xué) 2014
[2]膽鹽（GCDA）對(duì)肝細(xì)胞增殖與凋亡影響及其分子機(jī)制研究[D]. 王寧.中南大學(xué) 2013
[3]IGF-1、bFGF及TGFα對(duì)人表皮干細(xì)胞增殖的影響[D]. 陳建國(guó).南京大學(xué) 2012
[4]疏水性膽汁酸致新生鼠肝線粒體活性氧產(chǎn)生與膜通透性轉(zhuǎn)換的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 張秉宜.蘇州大學(xué) 2007



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