pCMV-HSF2-FLAG重組質(zhì)粒的構(gòu)建及其在Caco-2細(xì)胞中的表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2021-07-29 08:19
背景:潰瘍性結(jié)腸炎(Ulcerative colitis, UC)是一種病因尚未明確的腸道非特異性炎癥性疾病,病情可反復(fù)發(fā)作、遷延不愈,其臨床表現(xiàn)無(wú)特異性。我國(guó)UC發(fā)病率逐年增高,由于缺乏特異的診斷指標(biāo)及根治措施常誤診誤治,被世界衛(wèi)生組織公認(rèn)為難治愈的疾病之一。本小組通過(guò)基因芯片、雙向凝膠電泳及質(zhì)譜分析等系列研究篩選出UC患者于正常對(duì)照差異表達(dá)的基因和蛋白質(zhì),發(fā)現(xiàn)熱休克轉(zhuǎn)錄因子2(Heat shock factor2, HSF2)在基因及蛋白水平均表達(dá)上調(diào),隨后免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示HSF2在UC患者腸粘膜中的表達(dá)與疾病嚴(yán)重程度呈成相關(guān)。上述結(jié)果提示HSF2與UC發(fā)病密切相關(guān)。因此,細(xì)胞水平的研究有助于探索HSF2在UC的發(fā)病機(jī)制中的作用。目的:構(gòu)建人HSF2pCMV-Myc真核表達(dá)載體,研究其在人結(jié)腸上皮腫瘤細(xì)胞Caco-2內(nèi)的表達(dá)和定位。方法:以HSF2Human cDNA ORF clone為模板,PCR法擴(kuò)增出全長(zhǎng)HSF2編碼系列,用EcoRI和Kpn I對(duì)HSF2PCR純化產(chǎn)物雙酶切后,采用基因重組技術(shù)將其插入至pCMV-Myc載體中。DNA測(cè)序正確后,脂質(zhì)體法將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到...
【文章來(lái)源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)試劑和儀器設(shè)備
試驗(yàn)方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附件
綜述
參考文獻(xiàn)
研究經(jīng)費(fèi)和發(fā)表論文情況說(shuō)明
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于新一代高通量技術(shù)的人類(lèi)疾病組學(xué)研究策略[J]. 楊旭,焦睿,楊琳,吳莉萍,李英睿,王俊. 遺傳. 2011(08)
[2]CEACAM6、Syndecan-1、PDGFA、HLA-DRB5在潰瘍性結(jié)腸炎中的表達(dá)和意義[J]. 陳麗芳,繆應(yīng)雷,杜艷,李紅納,肖玉良. 世界華人消化雜志. 2010(28)
[3]Meta-analysis and systematic review of colorectal endoscopic mucosal resection[J]. Srinivas R Puli,Yasuo Kakugawa,Takuji Gotoda,Daphne Antillon,Yutaka Saito,Mainor R Antillon. World Journal of Gastroenterology. 2009(34)
[4]Risk for colorectal cancer in ulcerative colitis:Changes,causes and management strategies[J]. Peter Laszlo Lakatos,Laszlo Lakatos. World Journal of Gastroenterology. 2008(25)
[5]Effects of sulfasalazme on biopsy mucosal pathologies and histological grading of patients with active ulcerative colitis[J]. Ying-Qiang Zhong, Zhao-Hua Zhu, Qi-Kui Chen, Jun Zhan, Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China Hua-Rong Huang, Department of Pediatrics, the Second Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China Lian-Chun Xing, Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(28)
[6]我國(guó)炎癥性腸病研究的概況和策略[J]. 歐陽(yáng)欽. 四川醫(yī)學(xué). 2005(04)
[7]An analysis of 10218 ulcerative colitis cases in China[J]. Xue-Liang Jiang Department of Gastroenterology,Chinese PLA General Hospital of Jinan Command,Jinan 250031,China Hui-Fei Cui Department of Biochemical Pharmaceutics,Shandong University,Jinan 250012,Shandong Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2002(01)
[8]昆明市炎癥性腸病多中心臨床資料分析[J]. 繆應(yīng)雷,黃華麗,王光耀,杜艷,段麗平. 中華消化雜志. 2009 (02)
[9]寡聚核苷酸芯片檢測(cè)潰瘍性結(jié)腸炎患者基因表達(dá)譜的研究[J]. 繆應(yīng)雷,肖玉良,段麗平,李曉燕,陳麗芳,李紅納. 中華消化雜志. 2009 (11)
[10]潰瘍性結(jié)腸炎血清差異蛋白的篩選研究[J]. 繆應(yīng)雷,陳麗芳,杜艷,李紅納,朱艷平,肖玉良. 中華消化雜志. 2010 (12)
本文編號(hào):3308970
【文章來(lái)源】:昆明醫(yī)科大學(xué)云南省
【文章頁(yè)數(shù)】:71 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
前言
實(shí)驗(yàn)試劑和儀器設(shè)備
試驗(yàn)方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附件
綜述
參考文獻(xiàn)
研究經(jīng)費(fèi)和發(fā)表論文情況說(shuō)明
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]基于新一代高通量技術(shù)的人類(lèi)疾病組學(xué)研究策略[J]. 楊旭,焦睿,楊琳,吳莉萍,李英睿,王俊. 遺傳. 2011(08)
[2]CEACAM6、Syndecan-1、PDGFA、HLA-DRB5在潰瘍性結(jié)腸炎中的表達(dá)和意義[J]. 陳麗芳,繆應(yīng)雷,杜艷,李紅納,肖玉良. 世界華人消化雜志. 2010(28)
[3]Meta-analysis and systematic review of colorectal endoscopic mucosal resection[J]. Srinivas R Puli,Yasuo Kakugawa,Takuji Gotoda,Daphne Antillon,Yutaka Saito,Mainor R Antillon. World Journal of Gastroenterology. 2009(34)
[4]Risk for colorectal cancer in ulcerative colitis:Changes,causes and management strategies[J]. Peter Laszlo Lakatos,Laszlo Lakatos. World Journal of Gastroenterology. 2008(25)
[5]Effects of sulfasalazme on biopsy mucosal pathologies and histological grading of patients with active ulcerative colitis[J]. Ying-Qiang Zhong, Zhao-Hua Zhu, Qi-Kui Chen, Jun Zhan, Department of Gastroenterology, the Second Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China Hua-Rong Huang, Department of Pediatrics, the Second Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China Lian-Chun Xing, Department of Pathology, the Second Affiliated Hospital, Sun Yat-Sen University, Guangzhou 510120, Guangdong Province, China. World Journal of Gastroenterology. 2005(28)
[6]我國(guó)炎癥性腸病研究的概況和策略[J]. 歐陽(yáng)欽. 四川醫(yī)學(xué). 2005(04)
[7]An analysis of 10218 ulcerative colitis cases in China[J]. Xue-Liang Jiang Department of Gastroenterology,Chinese PLA General Hospital of Jinan Command,Jinan 250031,China Hui-Fei Cui Department of Biochemical Pharmaceutics,Shandong University,Jinan 250012,Shandong Province,China. World Journal of Gastroenterology. 2002(01)
[8]昆明市炎癥性腸病多中心臨床資料分析[J]. 繆應(yīng)雷,黃華麗,王光耀,杜艷,段麗平. 中華消化雜志. 2009 (02)
[9]寡聚核苷酸芯片檢測(cè)潰瘍性結(jié)腸炎患者基因表達(dá)譜的研究[J]. 繆應(yīng)雷,肖玉良,段麗平,李曉燕,陳麗芳,李紅納. 中華消化雜志. 2009 (11)
[10]潰瘍性結(jié)腸炎血清差異蛋白的篩選研究[J]. 繆應(yīng)雷,陳麗芳,杜艷,李紅納,朱艷平,肖玉良. 中華消化雜志. 2010 (12)
本文編號(hào):3308970
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